N-甲基-D-天门冬氨酸诱导Wistar乳鼠癫痫发作及脑电图改变

目的观察N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)诱导Wistar乳鼠的癲痫发作表现及皮质脑电图特点,以其对婴幼儿时期的癫痫进行更加深入的研究。方法12日龄Wistar乳鼠腹腔注射NMDA可诱导癫痫发作,其痫性发作的特点和皮质脑电图变化均做相应记录。结果12日龄的Wistar乳鼠引出甩尾等自动症及前弓反张发作,且上述行为发作期间出现某些特征性皮质脑电图改变。结论12日龄Wistar乳鼠腹腔注射NMDA产生一种独特的、年龄依赖性癫痫发作与婴幼儿时期West综合征在发作表现和脑电图改变有相似之处。

蒙药药对广枣-肉豆蔻对Wistar乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨蒙药药对广枣-肉豆蔻对Wistar乳鼠心肌细胞氧化损伤的干预作用。方法:取新生Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,300μmol/L H2O2诱导建立心肌细胞氧化损伤模型,MTT法观察广枣水提物、广枣10%~95%醇提物、肉豆蔻超临界提取物和广枣-肉豆蔻药对对氧化损伤的心肌细胞和正常心肌细胞的影响,并用qRT-PCR方法检测Bcl-2和Bax的基因表达。结果:诱导损伤模型组细胞生存率较空白组显著降低(P<0.05或P<0.01);广枣水提物无抗氧化损伤活性,不同浓度的广枣醇提物、肉豆蔻挥发油和半固体组及广枣-肉豆蔻药对均能显著增加细胞生存率,且多表现与剂量呈正相关。筛选出70%广枣醇提物、药对广枣-肉豆蔻(70%广枣醇提物∶肉豆蔻挥发油+肉豆蔻半固体成分=1∶1)抗氧化活性最强(P<0.05或P<0.01)。广枣、肉豆蔻、广枣-肉豆蔻药对均能显著调节H2O2诱导的氧化损伤心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达,增加Bcl-2/Bax比值(P<0.01),广枣-肉豆蔻药对最强,广枣、肉豆蔻次之。结论:蒙药药对广枣-肉豆蔻能显著降低体外Wistar乳鼠心肌细胞的氧化损伤,抑制心肌细胞凋亡的发生。

B组轮状病毒引起Wistar乳鼠流行性腹泻的病原学和病理学研究

研究了１９８５年至１９８６年本所繁育场发生的３次较大规模Ｗｉｓｔａｒ乳鼠流行性腹泻，经过电镜、聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）、实验感染动物、血清学及荧光组化抗原定位，证实病原为Ｂ组轮状病毒（ＧＢＲＶ），且与我国发现的成人腹泻轮状病毒（ＡＤＲＶ）有交叉反应，其ＲＮＡ电泳型与国外近来发现的唯－一株大鼠Ｂ组轮状病毒有差异，同时观察了病理学变化。

Wistar乳鼠局灶性皮质发育不良模型的脑电图及核磁共振实验研究

目的 应用液氮冷冻方法建立局灶性皮质发育不良(Focal cortical dysplasia,FCD)的Wistar乳鼠模型.分析FCD模型的脑电图(EEG)及核磁共振(MRI)特点,为进一步探讨人类FCD诊断及治疗提供理论及实验依据.方法 取Wistar孕鼠产后1d乳鼠70只为实验对象,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=10).液氮冷冻新生Wistar乳鼠大脑皮层,实验组依据冷冻时间不同分为30、60和90 s组3个实验亚组(n=20).第8周监测实验动物发作间期EEG并行头颅MRI检查,之后Wistar乳鼠脑组织灌注取材,行HE染色光镜检查.结果 实验组乳鼠EEG癫痫样放电率平均为41.6%,可见棘波、棘慢波频繁发放;MRI阳性表现为长T1、长T2信号;脑组织切片HE染色见大脑皮层层状结构和柱状结构紊乱,存在形态异常神经元和气球样细胞.实验组和对照组之间差异有统计学意义(P<0.05),3个实验亚组之间无统计学差异(P>0.05).结论 液氮冷冻Wistar乳鼠大脑皮层方法可成功建立FCDⅢd型动物模型,呈特异性的EEG及MRI表现,对诊断与治疗人类FCD具有重要价值.

补肾益精方含药血清对β-淀粉样蛋白干预血脑屏障体外模型渗透性的影响

目的:以Aβ1-42干预血脑屏障大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共培养模型,评价补肾益精方含药血清对该模型的渗透性的影响。方法:体外分别培养胚胎鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞,鉴定并测定跨内皮细胞电阻,利用Transwell细胞培养池,建立内皮细胞和星形胶质细胞共培养的血脑屏障体外模型,将5μmol/L Aβ1-42加入大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞非接触式共培养血脑屏障模型。分为Aβ1-42模型组和Aβ1-42加补肾益精方低、中、高剂量组,另设血脑屏障空白组,分别检测并比较各培养组荧光素钠的渗透性。结果:补肾益精方低、中剂量组荧光素钠的通透性明显低于Aβ1-42模型组(P<0.05)。结论:补肾益精方含药血清对Aβ1-42诱导的血脑屏障渗透性增加有抑制作用。

杨梅素和二氢杨梅素对氧化应激损伤模型心肌细胞的保护作用研究

目的:研究杨梅素和二氢杨梅素对氧化应激损伤模型心肌细胞的保护作用机制。方法:取Wistar乳鼠心肌细胞分为对照(常规培养液)组、模型(常规培养液)组、杨梅素(50μmol/L)组、二氢杨梅素(50μmol/L)组。不同药液培养心肌细胞1 h后,用100μmol/L H2O2培养16 h以复制心肌细胞氧化应激损伤模型。通过荧光染色法观察心肌细胞的形态,并测定凋亡率;流式细胞仪测定细胞线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞胞浆中细胞色素(Cyt)C、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、Caspase-9蛋白的表达。结果:与模型组比较,杨梅素组心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05);杨梅素组、二氢杨梅素组心肌细胞线粒体膜电位下降,Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达减弱(P<0.01或P<0.05)。结论:杨梅素和二氢杨梅素对体外心肌细胞氧化应激损伤有保护作用,其机制与通过线粒体途径抑制线粒体膜电位下降、抑制Cyt C从线粒体释放及活化Caspase-3和Caspase-9有关。