WNK1基因多态性与血管紧张素转换酶抑制剂降压疗效的相关性研究

目的探讨缺乏赖氨酸的丝氨蜃受／苏氨酸蛋白激酶1（WNK1）基因单核苷酸多态性与血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）降压疗效的相关性。方法选取新发的轻中度原发性高血压病患者121例，均来自北京市昌平地区的常住汉族人群。予以贝那普利口服治疗8周，对降压疗效进行评定。利用TaqManMGB等位基因分型试剂盒检测患者WNK1基因多态性rs880054和rs2301880的分布频率。结果患者rs880054位点和rs2301880位点不同基因型的降压疗效间差异有统计学意义（P〈0．05）。rs880054位点不同基因型的舒张压（DBP）降低幅度间差异有统计学意义（P〈0．05），收缩压（SBP）降低幅度间差异无统计学意义（P〉0．05）；rs2301880位点不同基因型的DBP降低幅度间差异有统计学意义（P〈0．05），SBP降低幅度间差异无统计学意义（P〉0．05）。rs880054位点不同基因型与经ACEI治疗后DBP的降低幅度有关（R^2=0．167，P〈0．001）；rs2301880位点不同基因型同样与治疗后DBP的降低幅度有关（R^2=0．080，P=0．003）；未发现上述两位点与SBP降低幅度的相关性。结论WNK1基因单核苷酸多态性可能与ACEI的降压疗效有关。

Wnk1基因多态性与汉族人缺血性卒中的关联分析

目的：探索赖氨酸缺乏蛋白激酶1（Wnk1）基因单核苷酸多态性（SNP）与中国汉族人群缺血性卒中的关系.方法：收集2008年1月～2009年12月新疆5所医院294例汉族缺血性卒中患者（病例组）和同期外科系统住院治疗的其他无脑梗死疾病的汉族患者314例（对照组）进行病例对照研究.用标签SNP（tSNP）策略选择Wnk1基因10个SNP位点（rs3858703、rs11611246、rs7305065、rs1990021、rs34408667、rs12309274、rs1012729、rs956868、rs12828016、rs953361）.SNP基因分型检测采用多重SNaPshot平台.用t检验、卡方检验和logistic回归分析对数据进行统计分析,用Haploview软件进行连锁不平衡分析和单倍型分析.结果：病例组饮酒（37.1%）、高血压病（62.9%）、糖尿病（18.0%）、高脂血症（36 4%）患者比例均高于对照组（均P〈0.01）,而吸烟者比例在两组间差异无统计学意义（P〉0 05）.所有位点基因分型缺失率均在1%以下.除rs34408667位点外,其余tSNP均通过Hardy-Weinberg平衡检验.Wnk1基因第四内含子rs11611246位点与汉族缺血性卒中相关.T等位基因在病例组中的分布频率低于对照组（30 3%与35 7%,P=0.046）.进行性别分层后发现,rs11611246 T等位基因是汉族男性缺血性卒中发病的保护因子.GT基因型及TT基因型在病例组男性中的分布频率分别为43.3%及7.2%,而在对照组男性中的分布频率分别为43.1%及15.2% （P=0.038）.加性遗传模型显示T等位基因携带者发生缺血性卒中的风险是对照组的0.702倍（95%CI：0.517~0.953,P=0.023）.调整年龄后差异仍然存在（P=0.022）,进一步调整年龄、体质量指数、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、高脂血症等混杂因素后,差异仍然存在（P=0.008）.未发现Wnk1基因其余9个SNP位点与汉族人脑梗死相关.结论：Wnk1基因第四内含子rs11611246多态性影响中国人缺血性卒中的发生.rs11611246位点T等位基因可能是汉族男性发生缺血性卒中的保护因素.

WNK1基因单核苷酸多态性位点与高血压患者左心室质量指数的相关性研究

目的:探讨缺乏赖氨酸的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(WNK1)基因单核苷酸多态性位点rs956868与高血压患者左心室质量指数的相关性。方法:新发的轻中度原发性高血压患者121例,均来自北京市昌平地区的常住汉族人群,予以超声心动图检查,利用TaqMan MGB等位基因分型试剂盒检测患者WNK1基因多态性rs956868的分布频率。结果:rs956868位点(CA+AA)基因型患者的左心室质量指数显著高于CC基因型患者〔(86.46±26.35)vs.(77.16±20.64),P=0.046〕。用多元逐步回顾分析,校正年龄、性别、体质量指数、吸烟、饮酒、血压、血糖及血脂水平后,rs956868位点基因型仍与左心室质量指数具有相关性,它和性别、年龄、BMI一起与高血压患者左心室质量指数变异的34.3%有关(R2=0.343,P=0.026)。结论:WNK1基因单核苷酸多态性位点可能与高血压患者左心室肥厚的易感性有关。

WNK1基因不同转录本在小鼠肾脏中的表达及意义

目的 研究WNK1基因长短两个转录本在小鼠肾脏组织中的表达分布特征 ,为进一步研究它们的生物学功能提供实验数据。方法 RT PCR扩增两个转录本的特异性片段 ,Northern印迹杂交证实片段特异性后 ,将片段克隆入pGEM T载体中 ,体外转录同位素标记的正义和反义RNA探针 ,在小鼠肾脏组织石蜡切片上进行原位杂交检测。结果 WNK1基因长转录本微弱广泛地表达在小鼠肾脏组织上 ,短转录本特异地表达在小鼠肾脏皮质部的远曲小管上。结论 在肾脏 ,WNK1基因的短转录本是功能性转录本 ,其编码的蛋白质在生物学功能上可能与其它激酶不同。

WNK1基因Pro1056Thr多态与高血压病的关联研究

目的探讨WNK1基因Exon13 Pro1056Thr多态是否与高血压病有关。方法为研究WNK1基因多态与原发性高血压的相关性,我们通过病例对照研究在河南省信阳市农村入选高血压病患者820例,正常对照772例。应用PCR-RFLP方法检测WNK1基因Exon13 Pro1056Thr多态性,结果经测序验证。应用Logistic回归分析该多态与高血压病的关联性。结果WNK1基因Exon13 Pro1056Thr与高血压病的易感性显著相关(优势比1.42,95%可信区间1.16～1.74,P=0.001),应用logistic回归校正传统危险因素后,这一关联性依然存在(优势比1.39,95%可信区间1.10～1.77,P= 0.007)。WNK1基因Exon13 Pro1056Thr A等位基因携带者增加高血压病的易感性。结论WNK1基因Exon13 Pro1056Thr多态与高血压病密切相关,A等位基因是高血压病的独立危险因素。因而,WNK1基因可能参与了高血压病的发病过程。

WNK1基因rs2301880位点多态性与血压钠反应性的家系关联分析

目的本研究通过对正常血压受试者进行饮食干预试验,探讨WNK1基因rs2301880位点对血压钠反应性的作用。方法 342例正常成人(来自126个家系),采用7 d低盐-7 d高盐饮食干预,分析血压对钠干预的反应性;采用LDR测序分型技术对WNK1基因rs2301880单核苷酸多态性位点进行基因分型,应用FBAT2.0.2软件分析WNK1基因rs2301880位点与血压及血压钠反应性之间的关系。结果 rs2301880位点与高盐期血压反应性密切相关,与收缩压、舒张压以及中心动脉压反应性均有关;但是该位点与低盐期血压反应性无关。结论人群WNK1基因rs2301880位点多态性与血压对钠反应性有关,而该位点可能成为血压钠反应性识别的重要生化标记物之一。

WNK1基因对宫骶韧带成纤维细胞生长的影响

目的研究WNK 1基因对宫骶韧带成纤维细胞的影响。方法采用组织块法培养大鼠宫骶韧带成纤维细胞。根据慢病毒转染的方法分为WNK 1+组、WNK 1-组和空白对照组。RT-qPCR检测细胞的转染效率;CCK-8法检测细胞增殖的情况;用RT-qPCR和Western blot检测成纤维细胞WNK 1基因、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果WNK 1+组的成纤维细胞的WNK 1基因表达明显高于WNK 1-组及空白对照组(P<0.05);镜检及CCK-8检测成纤维细胞增殖数目和体积均显著增加(P<0.05);Western-blot及RTq PCR结果显示WNK 1+组WNK 1激酶、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的mRNA相对表达量及蛋白水平较WNK 1-组及空白对照组均显著增加(P<0.05)。结论WNK 1基因能够促进宫骶韧带中成纤维细胞的增殖,使胶原蛋白表达增加,继而能增加宫骶韧带的弹力及张力,为患有盆底功能障碍疾病患者的诊断和治疗提供新思路。

WNK1与原发性高血压相关性研究进展

WNK1是WNK家族中第一个被发现的成员,WNK1有多个转录起始位点,在不同的组织有不同的转录产物。进一步的研究发现,WNK1基因1号内含子大片段缺失可导致Gordon综合征。WNK1是肾脏中多个离子转运体和通道的调控蛋白,在维持肾脏钾钠氯离子平衡以及血压调控中起非常重要的作用,因此,WNK1基因被认为是原发性高血压的致病候选基因,并且WNK1的基因多态性可能与普通人群患原发性高血压的遗传易感性相关。本文综述了WNK1的来源、结构与功能,从不同层次阐述了WNK1与原发性高血压的相关性,目的在于指导降压药的临床用药方案及预测其药效。