wnt/β-catenin信号通路关键蛋白及Mucin1在喉鳞状细胞癌上表达与相关研究

目的研究喉鳞状细胞癌中wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白(β-catenin、cyclinD1)与Mucin1的表达,并分析三者是否有关联。方法通过SP免疫组织化学方法分析喉鳞癌中Mucin1、β-catenin与cyclinD1的阳性表达,χ2检验与Spearman秩相关分析三个指标的阳性率。结果喉鳞状细胞癌中Mucin1在胞浆染色为棕黄色,阳性率为52.38%;β-catenin异位表达于胞质,表达率为67.86%;cyclinD1在胞核为深棕色,阳性表达率为85.12%,三者与癌旁组织比较差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。随着喉癌组织Mucin1表达的增强,β-catenin与cyclinD1的阳性表达率也增高,相关分析结果显示:Mucin1与β-catenin、β-catenin与cyclinD1均成正相关。结论 Mucin1、β-catenin与cyclinD1可作为喉鳞状细胞癌治疗的新靶点。

急性髓系白血病初诊患者β-连环蛋白和周期蛋白D1 mRNA的表达及其意义

本研究旨在检测急性髓系白血病(AML)患者β-连环蛋白(beta-catenin)及周期蛋白D1(cyclinD1)mRNA的表达变化,分析其相关性,为探讨Wnt/β联蛋白(Wnt/beta-catenin)通路在AML发病机制中的作用提供理论依据。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测beta-catenin及cyclin D1 mRNA的相对表达水平,分析两者在AML不同亚型及良性血液病患者中的表达变化及相关性。结果表明,AML骨髓单个核细胞(BMMNC)中beta-catenin mRNA的表达水平明显高于良性血液病患者(p<0.05),但在AML各亚型之间其表达量无统计学差异(p>0.05,在AML中存在cyclin D1mRNA的过度表达,其表达水平明显高于良性血液病组(p<0.05),在各亚型间其表达量无统计学差异(p>0.05)。Beta-cate-nin与cyclin D1的表达水平在AML-M1、M2、M4中存在显著正相关性(r值分别为0.822,0.627,0.712,p值分别为0.001,0.020,0.002)。结论:在AML患者中存在beta-catenin及cyclin D1的过度表达,且在部分亚型中存在显著相关性;Wnt/beta-catenin通路在AML中被异常激活,很可能是通过该通路下游靶基因cyclin D1的激活,参与白血病细胞的周期紊乱和异常增殖的调节。

STEAP1对乳腺癌细胞增殖、侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨前列腺跨膜上皮抗原1(STEAP1)对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及Wnt/β-波连蛋白(β-catenin)信号通路的影响及其作用机制。方法:将BT549细胞分为STEAP1过表达组(LV-STEAP1)和沉默STEAP1组(siR-STEAP1),并设空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)。Western blot检测BT549细胞STEAP1、增殖细胞核抗原(PCNA)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、Wnt/β-catenin、E钙黏蛋白(E-cadherin)水平。RT-PCR测定BT549细胞STEAP1 mRNA水平。CCK8测定BT549细胞增殖情况。Transwell法测定BT549细胞侵袭能力。划痕实验测定BT549细胞迁移能力。结果:与BC组和NC组相比,LV-STEAP1组细胞STEAP1蛋白和mRNA水平提高(P<0.05),细胞增殖率、侵袭细胞数、迁移距离、细胞PCNA、Vimentin、MMP9、Wnt、β-catenin蛋白水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05)。siR-STEAP1组细胞STEAP1蛋白和mRNA水平降低(P<0.05),细胞增殖率、侵袭细胞数、迁移距离、细胞PCNA、Vimentin、MMP9、Wnt、β-catenin蛋白水平升高(P<0.05),E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05)。结论:STEAP1可抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭迁移,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

Wnt信号通路与肾脏纤维化

肾小管间质纤维化是各种不同病因的慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路,是导致终末期肾病的主要病理基础。近年研究显示,肾小管上皮细胞-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是肾小管间质纤维化的重要机制之一,肾小管上皮细胞可通过EMT转分化为肌成纤维细胞（myofi-broblast,MF）,进入间质,合成细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）,直接导致肾间质纤维化的进行性发展。

贝美前列素激活Wnt/β-环连蛋白信号通路对小鼠重构毛囊毛发生长的影响

目的探讨贝美前列素(BimP)对小鼠背部重构毛囊毛发生长的影响。方法自1日龄的新生C57BL/6J鼠皮肤分离培养表皮细胞和真皮细胞,用硅胶小室法在Balb/c-nu小鼠背部重构毛囊,术后将18只Balb/c-nu小鼠随机分为BimP组、米诺地尔组和对照组,每组各6只;2周后在小鼠背部的细胞移植区分别外涂0.03%BimP 100μl、2%的米诺地尔溶液100μl和生理盐水100μl,每天涂药1次,连续2周;观察局部毛发生长情况;取小鼠背部移植区皮肤的新生毛发测量其长度;组织学观察新生毛囊的数目与生长周期;用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测Wnt家族分泌蛋白3a(Wnt3a)、淋巴细胞增强因子(LEF1)、β-环连蛋白和Frizzled跨膜受体蛋白7(Frizzled7)mRNA和蛋白表达水平。免疫荧光检测毛囊细胞β-环连蛋白的分布与表达。结果BimP组毛干长度高于对照组[(0.57±0.07)比(0.36±0.05)cm,P<0.01],BimP组与米诺地尔组差异无统计学意义;BimP组毛囊细胞Wnt3a(2.73±0.17比1.00±0.14,P<0.01)、LEF1(1.71±0.12比1.00±0.19,P<0.01)、β-环连蛋白(2.37±0.21比1.00±0.11,P<0.01)和Frizzled7(2.62±0.15比1.00±0.18,P<0.01)mRNA表达水平均高于对照组;Western印迹结果相同,BimP组毛囊细胞Wnt3a(1.44±0.21比1.00±0.13,P<0.05)、LEF1(1.36±0.15比1.00±0.09,P<0.05)、β-环连蛋白(1.60±0.13比1.00±0.16,P<0.01)和Frizzled7(1.52±0.15比1.00±0.21,P<0.05)蛋白表达水平均高于对照组。免疫荧光染色发现β-环连蛋白在BimP组和米诺地尔组新生毛囊的毛球细胞和皮脂腺细胞强表达,而对照组几乎未见荧光染色存在。结论BimP可通过激活经典Wnt/β-环连蛋白信号通路促进小鼠重构毛囊的毛发生长。