细胞增殖抑制基因调控慢性阻塞性肺疾病大鼠Wnt/PCP通路抑制气道成纤维细胞增殖

目的探讨细胞增殖抑制基因(HSG)在大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重建中Wnt/PCP通路的作用及其机制。方法将大鼠分为对照组和COPD模型组;采用烟熏+气道内注射脂多糖建立;取气管做小气道成纤维细胞原代培养,第3代细胞系用于实验。HE染色鉴定肺组织是否造模成功。ELISA检测培养上清液中MMP-9、PDGF和TGF-β1的表达;real-time PCR检测成纤维细胞中HSG、PDGF、TGF-β1和RhoA的mRNA的表达;Western blot法检测成纤维细胞HSG和RhoA蛋白表达。结果模型组成纤维细胞上清液中PDGF、TGF-β1和MMP-9表达显著高于对照组(P<0.01);模型组成纤维细胞中HSG mRNA及蛋白表达显著低于对照组(P<0.01);RhoA蛋白及PDGF、TGF-β1和RhoA mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。HSG表达与MMP-9、PDGF、TGF-β1和RhoA表达呈负相关(P<0.01)。结论HSG可能通过调控Wnt/PCP通路,抑制大鼠气道成纤维细胞的增殖从而参与气道重建。

骨髓间充质干细胞向软骨及骨分化：Wnt5a/PCP信号通路作用的研究与进展

背景:Wnt5a具有抑制经典Wnt信号和激活非经典Wnt信号途径的生物学功能。近年来,研究发现Wnt5a介导的Wnt5a/PCP非经典信号通路在骨髓间充质干细胞的增殖和分化过程中发挥着重要作用。但其参与骨髓间充质干细胞向软骨和骨分化形成的机制并不完全清楚。目的:综述Wnt5a/PCP信号通路中的相关下游效应分子,及其在骨髓间充质干细胞向软骨和骨分化形成过程中作用的最新研究进展。方法:以"间充质干细胞、Wnt信号通路、软骨分化、骨分化"为中文捡索词,以"BMSCs、Chondrogenic differentiation、Osteogenic differentiation、Wnt、Fzd、Ror2、Rho A、ROCK、JNK"为英文检索词,在维普、中国知网(CNKI)期刊全文数据库和Pub Med数据库检索2000年1月至2016年2月有关Wnt信号通路参与间充质干细胞向软骨及骨分化的文献。排除陈旧性和重复性研究,重点分析43篇文献进行综述。结果与结论:Wnt5a是非经典Wnt信号途径的代表性Wnt蛋白,主要通过其下游信号分子Fzd、Ror、Rho A、ROCK、JNK等介导,参与细胞骨架、细胞迁移和细胞极化等活动,从而调控其增殖和分化。然而Wnt5a/PCP信号通路在骨髓间充质干细胞向软骨和骨分化过程中具体的作用机制并不清楚,下游效应分子之间是如何协同或独立发挥作用也是未知的,这些问题均需要进一步深入研究。

肾衰营养胶囊改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路的作用探析

目的分析肾衰营养胶囊改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路的作用。方法选取2018年1月~6月饲养大鼠80只为研究对象,随机摸球法分为正常组、模型组、开同组和中药组。检测Myogenin以及MyoD表达,以及Wnt7a/PCP信号通路内蛋白表达。结果相比于正常组,模型组大鼠湿重、和干重均更低;开同组和中药组治疗后干重、湿重均有显著提升;模型组细胞内Myogenin阳性细胞核数多于正常组;中药组和开同组Myogenin阳性细胞核显著多于模型组,中药组和开同组MyoD光密度值低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾衰营养胶囊可有效改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路。

Wnt11与ROCK2在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究Wnt/PCP通路中Wnt1l和ROCK2在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学染色法,在250例石蜡包埋标本中检测Wnt11和ROCK2蛋白的表达变化。采用Western印迹在20例ESCC患者肿瘤组织和癌旁正常组织中检测Wnt11和ROCK2的表达情况。结果:Wnt11在正常食管组织中的阳性表达率为29.8%,而在ESCC组织中为31.9%,差异无统计学意义(P>0.05);Rcok2在正常食管组织中的阳性表达率为12.3%,而在ESCC中的阳性表达率为56.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。ROCK2在肿瘤组织的表达与其浸润血管相关(P<0.05),而与肿瘤发生的部位、肿瘤分化程度、肿瘤T分期、肿瘤是否有淋巴结转移无关。在食管癌组织中Wnt11的蛋白表达与ROCK2的表达无明显相关性。结论:在食管癌组织中,ROCK2的异常表达可能与食管癌的发生发展密切相关,其具体作用机制有待进一步深入研究。

Rspo1调控斑马鱼胚胎汇聚延伸运动的研究

Rspo1 (R-spondin 1)是分泌型Rspos (R-spondins)蛋白家族的成员,在雌性发育、血管生成和癌症等多个方面具有调控作用。为了研究Rspo1在早期胚胎发育中的功能,以斑马鱼(Danio rerio)作为模式生物,利用反转录PCR及原位杂交技术检测rspo1基因的时空表达模式;通过显微注射rspo1 mRNA或rspo1反义寡核苷酸(Morpholino, MO)对rspo1进行过表达或敲降;通过形态观察及原位杂交技术检测胚胎汇聚延伸(Convergence and extension, CE)运动是否正常;利用荧光素酶活性检测实验测定Wnt/PCP信号通路活性水平;通过蛋白印迹法检测表征Wnt/PCP信号通路活性的磷酸化JNK (Jun N-terminal kinase)蛋白的水平。结果显示:rspo1为母源基因,在12hpf前胚胎中呈全身性表达, rspo1的过表达或敲降均影响胚胎的CE运动;过表达rspo1降低Wnt/PCP信号通路报告质粒的活性,而敲降rspo1则增加其活性,与之相一致, rspo1敲降的胚胎中磷酸化JNK的水平显著升高;此外, rspo1 mRNA与dnJNK (Dominant negative JNK) mRNA的共同注射,以及rspo1MOs与wnt11或wnt5b mRNA的共同注射均能协同诱导CE运动缺陷。综上,在斑马鱼胚胎中, Rspo1通过负调控Wnt/PCP信号通路来调控胚胎的汇聚延伸运动。

纤毛、纤毛发生与Wnt/PCP信号通路

纤毛是以微管为核心组分、突出于细胞表面且高度保守的细胞器,具有运动、摄食、感知并传递外界信号等功能。纤毛发生是纤毛在细胞膜表面定位并装配的过程。多年来,对纤毛发生过程及其调控机制的探索始终是亚细胞结构与功能研究的热点之一。Wnt/PCP信号通路是参与胚胎及器官发育的主要信号转导途径之一。近年来大量研究显示,Wnt/PCP信号通路和纤毛发生密切相关。纤毛结构与功能的异常可造成Wnt/PCP信号通路异常,导致纤毛相关疾病的发生;同时,Wnt/PCP信号通路又决定着纤毛的形态和极性。因此,深入研究纤毛与Wnt/PCP信号通路的关系将有助于从细胞与分子生物学水平揭示纤毛发生的调控机制。

平面细胞极性在晶状体发育中的作用

晶状体发育是一个复杂的生物学过程,受多种信号分子及其构成的通路网络调控。近年研究发现,平面细胞极性(PCP)信号通路在晶状体发育过程中起重要作用,是形成晶状体正常透明度和形态的基础。PCP的深入研究为临床治疗先天性白内障提供了指导意义,同时更是有望成为完善再生晶状体的新干预靶点。本文结合目前该领域研究进展就PCP在晶状体的发育过程中的作用进行详细综述。

CTHRC1与肿瘤关系的研究进展

胶原三股螺旋重复蛋白1基因是从大鼠正常动脉和受损动脉中筛选出的差异表达基因,其通过TGF-β和Wnt/PCP通路发挥作用,使胶原生成减少,促进细胞迁移。在多种肿瘤中发现CTHRC1异常表达,并与肿瘤转移相关。该文就CTHRC1与肿瘤的关系作一综述。