经典Wnt信号通路与子宫肌瘤

随着中国女性育龄期的延迟,健康查体和医学超声技术的进步,越来越多育龄期女性被发现患有子宫肌瘤。既往有症状的子宫肌瘤最主要的治疗方法是手术治疗,但子宫切除术和子宫肌瘤剔除术均会对育龄期女性生活质量产生不同程度的影响。因此,探讨子宫肌瘤发病机制,寻求新的治疗方法,对于罹患子宫肌瘤女性的诊治具有重要意义。经典Wnt信号通路是调节子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的关键途径,参与子宫肌瘤的发生、发展。因此,探讨经典Wnt信号通路在子宫肌瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。

糖基化终末产物对牙周膜干细胞增殖及其Wnt经典信号通路相关基因表达的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对人牙周膜干细胞(HPDLSC)增殖及其Wnt经典信号通路相关基因DKK-1、β-catenin表达的影响。方法:体外组织块法和有限稀释法克隆化培养HPDLSC,并与100μg/mL AGEs共同培养,通过细胞克隆形成率、细胞生长曲线观察AGEs对HPDLSC增殖能力的影响;RT-PCR和Western Blot检测实验组和对照组DKK-1、β-catenin mRNA以及核蛋白β-catenin的表达量。结果:经100μg/mL AGEs刺激的HPDLSC,其克隆形成率、增殖速度以及β-catenin mRNA和核蛋白β-catenin的表达量均明显低于对照组(P<0.05);而DKK-1 mRNA则明显高于对照组(P<0.05)。结论:AGEs能抑制HPDLSC的增殖及其Wnt经典信号通路。

BMP2信号通路与经典Wnt信号通路及相互交联对成骨分化的调控

在以间充质干细胞为代表的具有成骨分化潜能的细胞中,多条信号传导通路及其构成的动态调控网络参与调控其成骨分化过程。其中BMP2和经典Wnt信号通路在此过程中的作用日益受到关注。国内外研究表明,BMP2和经典Wnt信号通路在调控靶细胞成骨分化过程中伴有彼此通路中的关键分子的表达水平和功能活性的改变,并在一定条件下表现出对成骨分化特异性标志物的协同和拮抗调控。成骨增殖分化过程是一个动态过程,在成骨分化的不同阶段,分子通路的作用不同,相互之间的调节也动态变化的,研究BMP2和经典Wnt信号通路在成骨分化过程中的相互调节作用,对于指导治疗骨质疏松和骨折有重要的作用,本文就BMP2和经典Wnt信号通路对靶细胞成骨分化的调控作用以及在此过程中两条信号通路之间的交联作一简要综述。

炎症微环境作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的:探讨非经典Wnt钙离子信号通路在慢性牙周炎组织来源的牙周膜干细胞中的表达及其对炎症微环境作用下牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法:收集解放军总医院口腔科因治疗需要拔除的无龋前磨牙、第三磨牙及慢性牙周炎牙齿,培养正常及炎症微环境下的牙周膜干细胞(H-PDLSCs,P-PDLSCs)。成骨诱导3d后采用免疫荧光检测CaMKII在细胞内的表达。H-PDLSCs,P-PDLSCs成骨诱导7d后实时定量PCR检测CaMKII、NLK和Runx2 mRNA表达水平,同时采用Western blot检测两种细胞成骨诱导7d后Runx2、ALP、CaMKII、和NLK的表达。结果:免疫荧光结果显示在H-PDLSCs及P-PDLSCs的对照组中CaMKII均有弱阳性表达,成骨诱导3d后两组细胞中CaMKII的表达增强。实时定量PCR结果显示常规培养条件下CaMKII、Runx 2在H-PDLSCs与P-PDLSCs中的表达不存在显著性差异,当成骨诱导后其在两组中的表达量显著增高,但H-PDLSCs组显著高于P-PDLSCs组。P-PDLSCs中NLK的表达水平显著高于H-PDLSCs,成骨诱导后两种组织来源细胞中NLK mRNA的表达水平均有显著性升高但H-PDLSCs组显著高于P-PDLSCs组。非经典信号通路的关键蛋白CaMKII、NLK在成骨诱导7d后其表达水平升高,成骨关键蛋白Runx2及ALP的表达趋势与之一致,但P-PDLSCs低于H-PDLSCs。结论:在慢性炎症微环境中非经典Wnt信号通路参与牙周膜干细胞的成骨分化,Wnt/Ca2+通路中CaMKII、NLK蛋白与干细胞成骨分化正相关。

经典Wnt信号通路与肝脏关系的研究进展

经典Wnt信号转导通路的暂时激活在肝脏发育、出生后肝脏正常生长、肝细胞再生、肝小叶分带、肝脏代谢和氧化应激反应过程中发挥着重要作用,研究显示这条通路异常持续激活与多种慢性肝病的进展显著相关.近年来针对经典的Wnt信号通路在肝脏病理生理过程中的作用作了大量的研究,并取得一些进展,本文对此作一综述.

经典Wnt信号通路调控对大鼠心肌梗死后心肌愈合的影响

目的探讨经典Wnt信号通路对大鼠心肌梗死后心肌组织愈合的影响。方法建立大鼠急性心肌梗死模型,采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术检测经典Wnt信号通路中的两个关键信号分子Wnt-1、β-catenin蛋白及mRNA在对照组(C组)、梗死组(I组)和非梗死组(N组)各时间点心肌组织中的时空表达;同时观察心肌梗死后心肌组织的病理学变化。结果各时间点心肌组织中Wnt-1、β-catenin的表达水平在C组与N组中无显著性差异。I组4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的蛋白表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);I组1天、4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的mRNA表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);且动态变化与心肌梗死后心肌的愈合过程相平行。通过病理形态学与免疫组化分析发现肌纤维母细胞、内皮细胞在发生梗死的大鼠心脏中增殖和迁移的过程中伴随着Wnt-1、β-catenin的高表达。结论经典Wnt信号通路参与心肌梗死后心肌组织的修复和愈合过程;并对肌纤维母细胞和血管内皮细胞的增殖、迁移起一定的调控作用。

经典Wnt/β-catenin信号通路在神经干细胞增殖和分化中的作用

Wnt信号通路是调控细胞增殖、分化的关键途径，在胚胎发育中起重要作用。这一通路最早发现在于果蝇，为无翅基因（wingless）。后来，在小鼠乳腺肿瘤中发现int-1蛋白，可在细胞间传递增殖和分化信号，并在小鼠胚胎发育中也有重要作用，为果蝇无翅基因的同源物，所以两者统一称为Wnt基因家族。

经典Wnt信号通路与精神分裂症

精神分裂症是一种重性精神病性障碍,病因和机制尚未明确,但目前普遍认为是由多个微效基因协同并与环境因素共同作用导致的疾病。由多基因组成的信号通路及通路间的相互作用在精神分裂症发病中可能起重要作用。与中枢神经系统发育和功能维持密切相关的经典Wnt信号通路近年来受到较多关注。许多针对Wnt信号通路与精神分裂症的关联研究均表明,精神分裂症患者细胞内Wnt信号通路异常。文章就目前针对经典Wnt信号通路在精神分裂症发病中潜在作用的相关研究作一综述。

经典Wnt信号通路与弥漫大B细胞淋巴瘤

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的发病机制虽未完全阐明,但研究显示与信号通路表达异常有关,如经典Wnt通路。在DLBCL发病机制的研究中观察到经典Wnt通路的重要下游因子β-catenin的表达和核内定位。同时证据显示经典Wnt通路不仅与DLBCL发病机制有关,还和DLBCL临床分期密切相关,经典Wnt通路通路有可能成为治疗DLBCL潜在的有用靶点。

辛伐他汀对大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路相关因子表达的影响

目的观察不同浓度、不同时间辛伐他汀对体外培养的大鼠成骨细胞经典Wnt通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达的影响,探讨辛伐他汀抗骨质疏松的可能机制。方法用酶消化法培养大鼠颅骨成骨细胞,采用倒置相差显微镜及碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察和鉴定成骨细胞。用浓度分别为10^-8mol/L、10-7mol/L、10^-6mol/L和10^-5mol/L的辛伐他汀干预大鼠成骨细胞24 h、48 h和72 h,并设无辛伐他汀为对照组,采用RT-PCR检测经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达情况。结果镜下观察及染色结果均显示具有成骨细胞典型特征。RT-PCR结果显示：10^-5mol/L辛伐他汀组干预24 h后较对照组Wnt3a[（2.09±0.12）vs（1.82±0.09）]、LRP5[（1.42±0.07）vs（1.29±0.07）]和β-catenin[（1.10±0.06）vs（0.95±0.06）]的m RNA表达显著增加;干预48 h和72 h后各组Wnt3a（F=37.78和96.52,P=0.000）、LRP5（F=10.32,P=0.001和F=22.02,P=0.000）的m RNA表达随着辛伐他汀浓度的增大而显著增加,β-catenin的m RNA表达较对照组显著增加（F=6.67和21.90,P〈0.05）;10^-8-10^-5mol/L辛伐他汀各组中分别干预24 h、48 h和72 h,随着干预时间延长Wnt3a和LRP5的m RNA表达均增加;干预48 h与24 h比较,β-catenin的m RNA表达差异无统计学意义[（1.08±0.09）vs（1.02±0.06）,P〉0.05],而干预72 h较24 h显著增加[（1.23±0.10）vs（1.02±0.06）,P〈0.05],且辛伐他汀浓度为10^-6mol/L和10^-5mol/L干预72 h较48 h显著增加[（1.32±0.07）vs（1.11±0.05）和（1.47±0.08）vs（1.19±0.04）,P〈0.05]。结论辛伐他汀可促进体外培养大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达。

益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究

目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。

黄芪桂枝五物汤不同剂量治疗糖尿病周围神经病变量效关系及对经典Wnt信号通路的影响

目的观察《金匮要略》黄芪桂枝五物汤原方不同给药剂量治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证的疗效及对经典Wnt信号通路的影响。方法将2018年4月—2020年12月嘉定区中医医院收治的120例糖尿病周围神经病变患者随机分为甲钴胺组、中药低剂量组、中药正常剂量组、中药高剂量组,每组30例。甲钴胺组给予甲钴胺口服,中药正常剂量组给予原方剂量黄芪桂枝五物汤口服,中药低、高剂量组分别给予0.5倍和1.5倍原方剂量黄芪桂枝五物汤口服,4组均治疗12周。观察比较4组治疗前后糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]、多伦多临床神经病变评分量表(TCSS)评分、中医症状积分、腓总神经和正中神经的运动神经传导速度(MNVC)及感觉神经传导速度(SNVC)、血清中经典Wnt信号通路关键分子(β-catenin、cyclinD1、c-myc、DKK1)mRNA表达量,统计4组临床疗效及达到显效、有效的时间。结果治疗后,中药正常剂量组和中药高剂量组FPG、2hPG、HbA1c、TCSS评分、中医症状积分及血清中DKK1 mRNA表达量均明显低于甲钴胺组(P均<0.05),血清中β-catenin、cyclinD1、c-myc mRNA表达量均明显高于甲钴胺组(P均<0.05),腓总神经和正中神经MNVC、SNVC均明显快于甲钴胺组(P均<0.05);中药正常剂量组和中药高剂量组总有效率分别为90.0%(27/30)和93.3%(28/30),均明显高于甲钴胺组的63.3%(19/30),且达到显效、有效的时间均明显短于甲钴胺组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论黄芪桂枝五物汤原方剂量和1.5倍原方剂量治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证疗效优于甲钴胺,且疗效呈剂量依赖性提高,其作用机制可能与激活经典Wnt信号通路有关。

wnt经典信号通路在酸性pH抑制成骨细胞功能中的作用

目的:探讨wnt经典通路在酸性pH抑制成骨细胞功能中的作用。方法:胶原酶消法提取新生Sprague-Dawley(SD)大鼠颅骨原代成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)和茜素红(ARS)染色鉴定。传代培养至第3代,分别用pH6.0、pH6.4、pH6.8、pH7.4(对照)的DMEM高糖培养基进行培养。CCK8法检测各组细胞增殖情况;Live/Dead染色观察凋亡情况;反转录聚合酶链反应(RTPCR)检测各组细胞COL1A1、β-catenin、RUNX2、wnt3a的mRNA表达水平;Western印迹法分析各组细胞COL1A1、β-catenin、RUNX2、wnt3a蛋白的表达情况。结果:ALP和ARS染色结果均为阳性,证明提取的原代细胞为成骨细胞。CCK8结果显示随着pH值降低和时间延长,pH6.0、pH6.4、pH6.8组实验各组细胞增殖活力均有下降(F=42.800、93.700,均P<0.05)。Live/Dead染色结果显示,随着pH值降低,细胞凋亡百分比显著增加(F=63.74,均P<0.05)。RT-PCR结果显示,与对照组相比,pH6.0、pH6.4、pH6.8组mRNA的表达显著降低(F=20.32、17.76、7.809、11.16,均P<0.05)。Western印迹结果显示,与对照组相比,pH6.0、pH6.4、pH6.8组蛋白表达水平均显著下降(F=20.02、15.67、22.11、42.11,均P<0.05)。结论:酸性pH可影响成骨细胞的增殖、凋亡和分化,其机制可能与wnt经典信号通路有关。

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中作用的研究进展

骨肉瘤是骨组织中最常见的恶性肿瘤,恶性程度高,易发生于儿童和青少年。Wnt信号通路是一条含有高度保守的碱基序列的信号通路,它调控细胞极性、增殖、分化,胚胎发育,组织稳态及细胞癌变,肿瘤细胞侵袭转移等众多生物过程。经典Wnt信号通路与骨肉瘤的发生、发展关系密切,在骨肉瘤细胞增殖、侵袭转移等方面的重要调控作用为骨肉瘤发病、转移机制以及化疗耐药方面的研究提供了重要方向和方法。

经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化

牙周炎是口腔最常见的疾病之一,累及牙周支持组织,随着疾病的进展将引起附着丧失、牙周袋形成、牙槽骨吸收,最终导致牙齿松动脱落.因被牙周炎破坏吸收的牙槽骨自愈能力十分有限,所以牙周炎的治疗目标是在彻底清除菌斑生物膜的基础上,争取获得较多的牙周组织再生.牙周膜干细胞作为最适宜进行牙周组织再生的细胞,被广泛研究.Wnt信号通路分为经典Wnt通路和非经典Wnt信号通路,为十分复杂而高度保守的通路传导途径.该通路与牙周膜干细胞成骨分化的关系十分密切,牙周膜干细胞的成骨分化又对牙周组织再生有重要意义.该文对经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化的研究概况作一综述.

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制

随着社会医疗水平的进步,骨肉瘤患者5年生存率提高,已被证实与身高、家族遗传病史、辐射、病毒等相关,但其发病机制至今尚不明确,晚期骨肉瘤患者仍存在远处转移的问题,没有得到有效控制。而经典Wnt信号通路在骨肉瘤的凋亡、化疗耐药性及侵袭转移等方面均起着重要的调控作用,通过抑制经典Wnt信号通路的活性,可以减缓骨肉瘤的生长和侵袭。因此,探讨经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。

不同微结构磷酸三钙材料对Wnt非经典信号通路相关标志物蛋白的表达影响

背景:骨诱导的发生机制目前还不明确,骨诱导过程中支架材料微结构通过调控相关骨向分化信号通路从而发挥关键性作用。目的:探讨不同微结构磷酸三钙材料对MG63细胞中Wnt非经典信号通路相关标志物表达水平的影响。方法:利用H2O2发泡及控制烧结温度合成具有不同微结构的磷酸三钙材料(TCP-compact,TCP-middle,TCP-big),通过压汞实验、扫描电镜扫描确证材料微结构;同时将已确证的3组具有不同微结构磷酸三钙材料与MG63细胞共培养,检测Wnt非经典信号通路的标志物(Wnt5a,FZD1,ROR2,DKK1)的表达。结果与结论:与具有微孔结构材料共培养的细胞中Wnt5a,FZD1,ROR2,DKK1表达水平显著提高(P<0.05),不同孔径的材料之间Wnt5a,ROR2,DKK1表达存在差异(P<0.05);在共培养末期材料组之间4组标记物表达无显著差异(P>0.05)。材料微结构影响Wnt非经典信号通路的表达水平,其相关标志蛋白表达水平的差异为材料微孔结构所调控,在一定范围内材料孔径越大Wnt非经典信号通路被明显促进。

经典Wnt信号通路中β-catenin在细胞核内外分布的调控机制及潜在治疗靶点的研究进展

经典Wnt信号通路在肿瘤细胞的增殖分化中发挥重要作用,该信号通路中的核心蛋白分子β-catenin介导信号从细胞质传递到细胞核,并在核内参与组成转录复合体,激活下游靶基因转录。β-catenin进入细胞核内是其激活下游转录因子的重要前提,其出入细胞核的方式尚未完全解析。β-catenin入核方式主要为利用经典入核途径关键蛋白直接入核及通过“分子伴侣”协助入核,而出核方式主要为依赖染色体维持区域1(chromosome maintenance region 1,CRM1)的出核途径。细胞膜上的钙黏蛋白、细胞质内的降解复合体相关蛋白及细胞核内的转录复合体相关蛋白等均可导致β-catenin滞留,从而影响其在细胞核内外的分布。在不改变细胞内β-catenin总量的情况下,通过减少β-catenin入核及核内滞留作用、增加其出核及核外滞留作用,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路,也是治疗经典Wnt信号通路相关疾病的有效途径。本文总结近年来关于β-catenin在细胞核内外分布状态的调控机制,为进一步研究治疗经典Wnt信号通路相关疾病提供潜在靶点及新思路。

经典Wnt信号通路在放射性肠损伤中的研究进展

放射治疗(Radiation therapy,RT)是肿瘤常用的治疗手段,是多种放射源的重要组成部分。RT通过杀死肿瘤细胞为肿瘤治疗做出了重大贡献。然而,肠道等快速更新的组织是人体对辐射最敏感的器官,在腹腔内或盆腔恶性肿瘤治疗过程中,不可避免受到照射,随后表现为放射性肠损伤。目前,广为接受的辐射损伤防护假说涉及经典Wnt信号通路(即Wnt/β-catenin),激活Wnt/β-catenin信号通路能保护肠道上皮免受辐射损伤,其潜在的机制包括诱导肠道隐窝干细胞再生、清除ROS等。本文就肠道放射性损伤特点、经典Wnt信号通路及其在放射性肠损伤中的研究进展作一综述。

经典Wnt信号通路与肿瘤免疫耐受的研究进展

经典Wnt信号通路是调控胚胎发育、组织稳态和损伤修复的重要通路,在进化过程中高度保守,但其信号转导异常也与恶性肿瘤的发生、进展、耐药及复发等密切相关。经典Wnt信号通路过度激活通过影响免疫细胞诱导肿瘤免疫耐受并抑制T细胞浸润到肿瘤微环境,破坏正常的免疫监测,导致恶性肿瘤患者对免疫检查点抑制剂产生耐药。经典Wnt信号通路调节剂能够增强肿瘤免疫治疗的效果。因此,进一步阐明经典Wnt信号通路在肿瘤免疫耐受发生中的作用及机制将为恶性肿瘤的治疗提供更多策略。