外源性p53诱导肝癌细胞Wnt通路抑制因子Dickkopf-1的表达

研究p53对Wnt通路抑制抑制因子Dickkopf-1(DKK-1)表达的调节作用。将携带p53基因的复制缺陷型腺病毒栽体(Adp53)导入到p53缺失的人肝癌细胞株Hep3B中,以RT-PCR技术检测p53对DKK-1表达的调节作用。检测结果表明DKK-1mRNA水平在转染p53 20 h后即有明显升高,其中以32 h达最高水平,随后逐渐降低。量效关系研究表明在转染剂量为0.5、5、50 pfu/cell的Adp53时DKK-1mRNA表达均有显著增高,尤以50 pfu/cell时表达水平最高。提示p53能明显诱导Wnt通路抑制因子DKK-1的mRNA表达。

儿童急性淋巴细胞白血病中Wnt通路抑制因子-1基因甲基化研究

目的探讨Wnt通路抑制因子-1(Wif-1)表达及其甲基化状态在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的意义。方法选取徐州医科大学附属医院2017年6月至2022年2月新确诊的43例ALL患儿为试验组,20名骨髓移植供者为对照组。留取试验组、对照组骨髓血各3~5 ml,实时荧光定量聚合链反应法检测Wif-1 mRNA表达;Western blot法检测Wif-1蛋白表达;甲基化特异性聚合酶链反应法检测Wif-1基因甲基化状态。结果试验组Wif-1 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组Wif-1基因甲基化阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童ALL存在Wif-1基因高甲基化。

Wnt/β-catenin信号通路在眼部病理性血管新生过程中作用的研究进展

眼部病理性新生血管相关疾病会对视力造成显著影响,目前临床一线治疗方案为眼内注射抗血管内皮生长因子类药物,但存在应答欠佳、潜在不良反应等局限性。Wnt/β-catenin信号通路有促进胚胎发育、维持组织稳态的功能,在组织中广泛表达。Wnt/β-catenin信号通路异常激活时,下游基因产物的表达增加能够上调缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)等细胞因子,促进眼部的病理性血管新生。Wnt抑制剂能够延缓眼部病理性血管新生进展。Wnt/β-catenin信号通路与眼部血管新生病理机制的研究为眼部病理性新生血管相关疾病的治疗提供了新的潜在靶点。

miR-552靶向调控Wnt抑制因子-1促进MG-63骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的实验研究

目的 探讨miR-552对Wnt抑制因子-1(WIF1)的靶向调控作用以及对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移活性的影响。方法 体外培养人骨肉瘤细胞MG-63和人成骨细胞hFOB1.19,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-552的表达水平。分别采用miR-552 inhibitor和shWIF1转染MG-63细胞,实验分为空白对照组、anti-阴性对照(anti-NC)组、anti-552组、miR-552 inhibitor+pcDNA3.1vector共转染阴性对照(anti-552-NC)组、miR-552 inhibitor+pcDNA3.1-shWIF1(共转染)组。采用MTT法、Transwell法检测细胞增殖、侵袭和迁移活性的变化。采用双荧光素酶报告实验验证WIF1与miR-552的靶向关系。采用Western blotting检测各组β-catenin、CyclinD1、APC的表达水平。结果 MG-63细胞中miR-552的表达水平为1.48±0.21,明显高于hFOB1.19细胞的1.00±0.07(P<0.05)。anti-552组miR-552的表达水平为0.51±0.12,低于空白对照组(P<0.05);WIF1表达水平为1.45±0.23,高于空白对照组(P<0.05)。共转染组WIF1表达水平为0.68±0.13,低于空白对照组和anti-552组(P<0.05)。培养24、48、72和96h后,anti-552组MG-63细胞增殖率分别为(83.14±4.25)%、(67.58±3.26)%、(53.41±3.25)%和(48.29±2.86)%,低于anti-NC组(P<0.05)。anti-552组MG-63侵袭、迁移细胞数分别为264±32和489±44,均少于空白对照组和anti-NC组(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实WIF1是miR-552的下游靶基因。anti-552组β-catenin、Cyclin D1、APC蛋白表达量分别为0.84±0.15、0.83±0.16和0.59±0.12,均低于空白对照组和anti-NC组(P<0.05)。而共转染组β-catenin、CyclinD1、APC蛋白表达量分别为2.86±0.45、1.93±0.34和1.40±0.28,明显高于anti-552组(P<0.05)。结论 miR-552在骨肉瘤中表达上调,可通过靶向抑制WIF1的表达,异常激活Wnt/β-catenin信号,进而促使骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。

多发性骨髓瘤患者的血清PINP、DKK1和SFRP3水平及其临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者的血清I型原胶原氨基端前肽(PINP)、dickkopf Wnt信号通路抑制因子1(DKK1)和分泌型卷曲相关蛋白3(SFRP3)水平及其临床意义。方法纳入150例MM患者(MM组)及150健康体检者(对照组)。比较两组研究对象之间、不同临床分期MM患者之间、不同临床疗效MM患者之间的血清DKK1、PINP、SFRP3水平。采用Logistic回归模型分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平与MM患者临床疗效的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平对MM患者临床疗效的预测效能。结果MM组患者治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于对照组(P<0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期MM患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平依次升高(P<0.05);有效组患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平低于无效组(P<0.05)。治疗前血清DKK1、SFRP3、PINP水平升高是影响MM患者临床疗效的独立危险因素(P<0.05)。治疗前血清DKK1和SFRP3水平对MM患者临床疗效无预测价值(曲线下面积<0.5,P>0.05),而治疗前血清PINP水平对MM患者的临床疗效有一定的预测价值(曲线下面积=0.663,P<0.05)。结论MM患者治疗前的血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于健康人群,且与疾病严重程度有关,是MM患者临床疗效的影响因素。治疗前血清PINP水平对预测MM患者的临床疗效有一定的价值。

HBP1--一种重要的肿瘤抑制因子

HMG盒转录因子1(HMG-box transcription factor 1,HBP1)是高泳动盒蛋白家族中的成员.HBP1是一种转录抑制因子,含有513个氨基酸残基的多肽,可与RB蛋白结合,抑制促细胞分裂基因的表达,从而抑制细胞的增殖.近期工作表明,HBP1转录因子和p38 MAPK信号通路共同参与细胞周期调控细胞早衰及抑制肿瘤的生长.此外,HBP1与Wnt信号通路中的蛋白相互作用抑制肿瘤生长.这些发现可以提供一个新的肿瘤抑制网络,进而可能有助于癌症的诊断和治疗.本文对HBP1在转录阻遏、细胞周期和抑制肿瘤生长等方面进行综述.

宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1预测价值分析

目的 探讨宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)、同种异体移植物炎性因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)、S100钙结合蛋白-A11(S100 calcium-binding protein-A11,S100-A11)、Wnt通路抑制因子Dickkopf-1(Wnt pathway inhibitor Dickkopf-1,DKK1)的预测价值。方法 选择2021年1月—2023年1月本院收治的71例宫颈癌患者作为研究对象,根据患者有无盆腔淋巴结转移分为淋巴结转移阳性组(28例)和淋巴结转移阴性组(43例)两组。收集两组患者临床病理特征,并检测血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1水平。结果 单因素分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3、S100-A11、DKK1是患者发生宫颈癌淋巴结转移的影响因素(P<0.05)。与年龄、分化程度、肿瘤大小、组织学类型、脉管浸润及血清AIF-1无关(P>0.05);Logistic多元回归分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润及血清TFF3是影响宫颈癌淋巴结转移的独立因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,TFF3对淋巴结转移有中等预测价值(AUC=0.649),明显大于机会参考线下面积(P<0.05)。而AIF-1、S100-A11、DKK1对淋巴结转移无预测价值(AUC分别为0.477、0.517、0.524),与机会参考线下面积比较无统计学意义(P>0.05)。结论 FIGO分期高、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3异常升高是宫颈癌淋巴结转移的危险因素,血清TFF3有望成为预测宫颈癌淋巴结转移的新标志物;血清AIF-1、S100-A11、DKK1对宫颈癌淋巴结转移的预测效能不理想。

急性缺血性脑卒中患者血清sTREM2和DKK-1水平检测对抑郁发生的预测价值研究

目的 研究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清可溶性髓细胞表达触发受体2(soluble triggering receptor expressed on myeloid cells 2,s TREM2)及Wnt信号通路抑制因子1(DKK-1)水平对抑郁发生的预测价值。方法 选取2019年1月~2021年1月于武汉市汉口医院住院治疗的AIS患者251例为研究对象。根据卒中后6个月汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)评分,将AIS患者分为非卒中后抑郁(NPSD)组(<7分,n=183)和卒中后抑郁(PSD)组(≥7分,n=68)。比较两组一般临床资料、神经功能评分及实验室检查指标的差异。相关性分析采用Pearson相关分析。多因素Logistic回归分析影响AIS患者PSD发生的影响因素。受试者工作曲线分析血清sTREM2,DKK-1及联合检测对AIS患者PSD的预测价值。结果 PSD组患者血清sTREM2(312.79±51.24 ng/L),DKK-1(4.47±0.62μg/L),美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin量表(mRS)评分均高于NPSD组(172.96±32.55 ng/L,3.01±0.57μg/L),日常生活活动能力量表(ADL)评分明显低于NPSD组,差异均有统计学意义(t=25.585,17.607,5.937,47.288,2.990,均P<0.05)。PSD组血清sTREM2,DKK-1水平与NIHSS评分、mRS评分均呈显著正相关(r=0.657,0.669;0.620,0.614,均P<0.05),与ADL评分呈显著负相关(r=-0.712,-0.701,均P<0.05)。sTREM2(OR=1.219,95%CI=1.040~1.429)升高,DKK-1(OR=1.363,95%CI=1.076~1.728)升高是影响AIS患者PSD发生的独立危险因素(P <0.05)。血清sTREM2,DKK-1两者联合对AIS患者PSD的预测曲线下面积(95%CI)为0.914(0.843~0.967),高于血清sTREM2,DKK-1单一指标检测[0.823(0.760~0.869),0.801(0.743~0.851)],差异具有统计学意义(Z=3.864,4.072,均P<0.05)。结论 血清sTREM2和DKK-1水平升高是AIS患者PSD的独立影响因素,对AIS发生6个月内抑郁的发生有预测作用。

加味桂枝附子汤联合艾灸治疗类风湿关节炎疗效研究

目的:探讨加味桂枝附子汤联合艾灸治疗类风湿关节炎(RA)疗效及对血清白细胞介素-21(IL-21)、Wnt信号通路关键抑制因子Dickkopf-1(DKK-1)的影响。方法:选取80例RA患者随机分为对照组、联合组,各40例。对照组给予加味桂枝附子汤,联合组给予加味桂枝附子汤联合艾灸治疗。比较两组中医证候积分、临床疗效、晨僵时间、压痛关节数(TJC)、肿胀关节数(SJC)、关节功能评分、视觉模拟评分(VAS)、风湿性关节炎活动度评分(DAS28)、血清IL-21、血清DKK-1、不良反应。结果:与治疗前比较,两组治疗后晨僵、关节疼痛、关节肿胀评分、晨僵时间、TJC、SJC、WOMAC评分、VAS评分、DAS28评分、血清IL-21、DKK-1水平均下降,且治疗后联合组上述指标均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。联合组总有效率92.50%高于对照组72.50%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者便秘、失眠、皮肤瘙痒等不良反应发生率比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:加味桂枝附子汤联合艾灸治疗RA可有效改善患者临床症状,提高关节功能,减轻疼痛,降低血清IL-21、DKK-1水平,安全性较高。

多西他赛、雷替曲塞治疗无法手术胃癌患者的疗效及作用机制

目的探讨多西他赛联合雷替曲塞治疗无法手术的晚期胃癌患者的疗效及对血清dickkopf WNT信号通路抑制剂1(DKK1)、三叶因子3(TFF3)和内皮抑制蛋白(endostatin)水平的影响。方法采用随机数字表法将92例晚期无法接受手术治疗的胃癌患者分为研究组和对照组,每组46例。研究组采用多西他赛联合雷替曲塞治疗,对照组采用多西他赛联合5-氟尿嘧啶治疗。比较两组患者的疗效,化疗前后血清endostatin、DKK1、TFF3水平,不良反应发生情况及生存情况。结果化疗后,研究组患者总有效率为75.56%,高于对照组的52.27%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。化疗前,两组患者血清endostatin、DKK1、TFF3水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);化疗后,研究组患者血清DKK1、TFF3水平均低于对照组,endostatin水平高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。研究组患者恶心呕吐、骨髓抑制发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。研究组患者中位生存时间为22.0个月,长于对照组的17.0个月,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论多西他赛联合雷替曲塞治疗无法手术的晚期胃癌患者较多西他赛联合5-氟尿嘧啶更具有优势。

血清DKK1、Survivin水平与难治性多发性骨髓瘤患者FVAD方案化疗疗效的关系

目的探讨血清Wnt通路抑制抑制因子Dickkopf-1(DKK1)、凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)与难治性多发性骨髓患者FVAD方案(氟达拉滨、长春新碱、表阿霉素和地塞米松)化疗疗效的关系。方法选取2017年1月—2019年1月在西安医学院第一附属医院治疗的难治性多发性骨髓瘤患者81例,均给予FVAD方案化疗,观察治疗效果,检测血清DKK1、Survivin水平。结果达到完全缓解(CR)患者23例,部分缓解(PR)患者31例,疾病稳定(SD)患者17例,疾病进展(PD)患者10例,治疗有效率为66.67%;治疗有效患者治疗后血清KK1、Survivin水平分别为(3.54±0.97)ng/ml和(81.46±5.57)ng/L,明显低于治疗无效患者,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前后血清DKK1、Survivin水平变化值预测患者治疗有效的ROC曲线下面积分别为0.733和0.693,差异有统计学意义(P<0.05),截断值分别为4.03ng/ml和26.54ng/L,灵敏性分别为77.80%和88.00%,特异性分别为63.00%和48.10%。结论在难治性多发性骨髓瘤患者中,FVAD方案化疗有效者治疗后DKK1、Survivin水平明显降低,治疗前后变化值在预测治疗疗效中有一定应用价值。