WNT信号通路抑制因子-1和β连环蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨WNT信号通路抑制因子-1(WIF-1)和β连环蛋白(β-catenin)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与肾癌临床分期、病理分级的相关性。方法选取2010年2月—2015年6月中国医科大学附属盛京医院第二泌尿外科行根治性手术切除的ccRCC患者102例为研究对象,应用免疫组织化学SP法检测102例肾细胞癌组织及相对应的癌旁正常肾脏组织中WIF-1、β-catenin表达情况。结果 WIF-1在ccRCC组织及正常组织中的表达差异有统计学意义(59.7±19.6 vs.112.2±18.6,t=3.104,P<0.05);β-catenin在ccRCC组织及正常组织中的表达差异亦有统计学意义(157.1±17.2 vs.102.1±18.7,t=4.015,P<0.05)。WIF-1的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=-0.542,P<0.05)、病理分级(r=-0.476,P<0.05)呈负相关;β-catenin的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=0.511,P<0.05)、病理分级(r=0.562,P<0.05)呈正相关.;WIF-1与β-catenin在肾癌中的表达呈负相关(r=-0.425,P<0.01)。结论 WIF-1表达降低和β-catenin表达升高与肾癌的病理分级和临床分期有关,对ccRCC预后评价有一定参考意义,也可为其治疗提供一种可能的靶向治疗途径。

类风湿关节炎与Wnt信号通路抑制因子的关系

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）作为一种慢性、多系统性、侵袭性、进行性自身免疫性疾病,病程长,难治愈,严重威胁人类健康,影响生活质量,甚至减少患者预期寿命。目前临床上常用治疗RA的药物包括非甾体类抗炎药、糖皮质激素和传统改善病情抗风湿药（diseose-modifying anti-rhumatic drugs,DMARDs）、生物制剂等,但这些药物的应用均存在各种问题，如不能迅速控制患者病情进展、药物近远期毒副作用大或疗效不确切、价格昂贵等。

Wnt信号通路与自身免疫调节因子共同参与胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞的分化

背景:自身免疫调节因子(autoimmune regulator gene,Aire)及Wnt信号通路在小鼠胚胎干细胞多能性的维持及分化中都发挥着重要作用,但Wnt信号与Aire是否参与了小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞的分化尚未可知。目的:探讨Wnt信号通路和自身免疫调节因子与胚胎干细胞分化的关系。方法:采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,然后用Aire shRNA慢病毒感染小鼠胚胎干细胞,嘌呤霉素筛选单克隆稳定株,再采用两步分化方法进行诱导分化,分别于定向诱导分化第0,3,10天,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time qPCR检测相关基因及蛋白的表达变化。结果与结论:①定向诱导分化第0天,免疫荧光染色显示SSEA1、OCT4表达呈阳性;②定向诱导分化第3天,免疫荧光染色显示SOX17、FOXA2表达呈双阳性;③定向诱导分化第10天,流式细胞术结果显示EPCAM1、K5、K8表达呈阳性;④与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达升高,Aire蛋白表达降低;⑤与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β及Aire mRNA表达升高;⑥与正常培养的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞相比,敲低Aire基因的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达水平降低。综上所述,Wnt信号通路和Aire共同参与了小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为小鼠胸腺上皮祖细胞的过程。

白细胞介素-33/瘤变抑制因子2信号通路与心力衰竭心肌纤维化关系的研究进展

心力衰竭(heart failure,HF)是各种心血管疾病的终末阶段,具有较高的发病率与死亡率[1]。我国最新流行病学调查数据显示,HF患者患病率在年龄≥35岁人群中为1.3%(约1370万人),已成为重要的公共卫生问题,严重影响着我国居民健康。

Wnt/β联蛋白信号通路在纤维化疾病中的研究进展

纤维化疾病涉及肝脏、肺、皮肤、肾脏、心脏等器官,以器官组织内纤维结缔组织增多、实质细胞减少为主要病理改变,持续进展可致器官结构破坏和功能减退,甚至导致器官衰竭,严重威胁人类生命健康。近年认为,Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路可能在多种组织纤维化进展过程中发挥调控作用,因此调控Wnt/β-catenin信号通路可能有助于减缓纤维化疾病进展或逆转纤维化进程,但目前其具体作用机制尚不清楚。未来,深入研究Wnt/β-catenin信号通路在纤维化疾病中的作用机制及其调控靶点将为纤维化疾病的临床治疗提供新策略。

SOX9通过转化生长因子β信号通路调节角膜内皮损伤后内皮-间质转化过程

目的探究性别决定区Y框蛋白9(sex-determining region Y-box protein 9,SOX9)是否会调控角膜内皮细胞损伤后的角膜上皮-间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程及具体机制。方法转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低人角膜内皮细胞B4G12中SOX9的表达,使用甲萘醌构建体外B4G12细胞损伤模型,设4个分组:si-NC组(转染siRNA-阴性对照)、si-SOX9组(转染siRNA-SOX9)、si-NC+甲萘醌组(转染siRNA-阴性对照后添加外源性甲萘醌做损伤处理)、si-SOX9+甲萘醌组(转染siRNA-SOX9后添加外源性甲萘醌做损伤处理)。通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测各组细胞中EndMT关键因子Snail家族转录抑制因子2(snail family transcriptional repressor 2,SNAIL2)及相关信号通路关键因子表达变化,阐明SOX9调控EndMT过程的功能和机制。结果转染siRNA-SOX9敲低细胞SOX9表达后,给予甲萘醌细胞损伤处理,观察到细胞中SNAIL2的表达会随SOX9的敲低而降低,同时观察到转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)信号通路中SNAIL2的上游关键因子Smad2/Smad3的表达也随着SOX9的敲低而降低。结论SOX9通过TGF-β信号通路调控角膜内皮损伤后EndMT过程。

血清胸苷激酶1、细胞角质蛋白19片段抗原21-1及dickkopfWNT信号通路抑制剂1对食管癌的诊断价值

目的探讨血清胸苷激酶1(TK1)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)及dickkopf WNT信号通路抑制剂1(DKK1)对食管癌的诊断价值。方法选取62例食管癌患者作为食管癌组,59例健康体检者作为对照组。对比两组受试者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平,对比不同分期食管癌患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平,分析TK1、CYFRA21-1、DKK1单独及联合检测对食管癌的诊断价值。结果食管癌组患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Ⅲ~Ⅳ期食管癌患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。TK1+CYFRA21-1+DKK1联合检测诊断食管癌的灵敏度和特异度分别为88.50%、79.10%,曲线下面积为0.779(95%CI:0.695~0.864),均高于三者单独检测。结论TK1、CYFRA21-1、DKK1联合检测有利于提高食管癌的诊断效能,防止误诊漏诊,三者对其病情评估具有一定参考价值。

艾灸对膝骨关节炎兔软骨Wnt信号通路及血清炎性因子的影响

目的:基于Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路探讨艾灸干预膝骨关节炎(KOA)模型兔的可能作用机制。方法:将24只新西兰兔随机分为正常组、模型组及艾灸组,每组8只。除正常组外,其余2组兔采用右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶水溶液的方法制作KOA模型。造模成功后,艾灸组兔每日予艾条悬灸右膝犊鼻穴20 min,连续治疗21 d;正常组和模型组正常饲养,不给予任何干预措施。干预结束后次日,各组兔麻醉后心脏采血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;取各组兔右膝关节股骨端软骨,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组兔膝关节软骨的组织形态,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分别测定各组兔膝关节软骨组织中Wnt信号蛋白-3α(Wnt3α)、β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白及mRNA的表达水平,采用免疫组化法检测各组兔膝关节软骨组织中IL-1β、TNF-α的表达,并分析其积分光密度(IOD)。结果:模型组兔血清IL-1β、TNF-α明显高于正常组(P<0.05),艾灸组上述指标明显低于模型组(P<0.05)。与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞明显变性,软骨组织损伤严重;艾灸组兔膝关节软骨结构较为完整,软骨细胞数目较多且分布较均匀,细胞形态较为正常。模型组兔膝关节软骨组织中Wnt3α、β-catenin、MMP-13蛋白和mRNA相对表达量均明显高于正常组(P<0.05),艾灸组兔膝关节软骨组织中上述指标蛋白和mRNA相对表达量均明显低于模型组(P<0.05)。模型组兔膝关节软骨组织IL-1β、TNF-α蛋白表达显著高于正常组(P<0.05),艾灸组兔膝关节软骨组织上述蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:艾灸犊鼻穴可下调KOA模型兔血清及软骨组织中炎性因子的表达,有效缓解膝关节软骨组织损伤,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。

LEF1-AS1通过Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞迁移侵袭的影响

目的探讨淋巴增强结合因子1反义RNA 1(LEF1-AS1)通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测胃癌细胞和正常胃黏膜细胞GES-1中LEF1-AS1的表达情况。BGC-823细胞分为阴性对照组、LEF1-AS1干扰组和LEF1-AS1干扰+Wnt激动剂组。CCK-8法检测细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;qPCR和Western blot检测Wnt1、β-catenin和Survivin表达。结果LEF1-AS1在胃癌细胞中的相对表达量高于GES-1细胞(P<0.05)。与阴性对照组比较,LEF1-AS1干扰组BGC-823细胞的增殖和迁移侵袭能力均下降(P<0.05)。LEF1-AS1干扰组Wnt1和β-catenin表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。LEF1-AS1干扰+Wnt激动剂组BGC-823细胞的增殖和迁移侵袭能力均强于LEF1-AS1干扰组(P<0.05),且β-catenin和Survivin水平较LEF1-AS1干扰组升高(P<0.05)。结论LEF1-AS1沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化来负调控胃癌细胞的生物学行为,该因子有作为胃癌治疗靶点的潜能。

缺氧诱导因子1α调控wnt/β-catenin信号通路对常氧条件下大鼠髓核细胞衰老的作用及机制

目的:探究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)调控wnt/β-catenin信号通路对常氧培养下大鼠髓核细胞衰老的影响及作用机制.方法:取5只4周龄雌性SD大鼠,提取鼠尾髓核原代细胞进行研究.(1)将髓核细胞分为5组:转染对照组[用磷酸盐缓冲盐水(PBS)处理髓核细胞]、空载腺病毒组(用空载腺病毒处理髓核细胞)、过表达HIF-1α组(用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞)、空载siRNA组(用空载siRNA处理髓核细胞)、敲减HIF-1α组(用siRNA敲减HIF-1α处理髓核细胞),在常氧下培养48h后,免疫蛋白印迹(western blot,WB)检测HIF-1α和衰老相关基因p53、p21、p16,β-gal染色检测细胞衰老,评估常氧条件下HIF-1α对于髓核细胞衰老的影响.(2)取髓核细胞,分为空载腺病毒组、过表达HIF-1α组、空载siRNA组、敲减HIF-1α组,处理方式同前,在常氧下培养48h后,WB检测HIF-1α、GSK-3β和β-catenin通路的表达.取髓核细胞,分为对照组(用PBS处理髓核细胞)、过表达HIF-1α组(用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞)、XAV-939组(用XAV-939处理髓核细胞)、XAV-939+过表达HIF-1α组(用XAV-939+载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞),WB检测HIF-1α、p53、p21、p16和wnt/β-catenin的表达,β-gal染色检测细胞衰老,以检测HIF-1α与wnt/β-catenin信号通路的关系以及对髓核细胞衰老的影响.结果:(1)腺病毒转染HIF-1α后,与转染对照组和空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加(P<0.05).小干扰RNA转染HIF-1α后,与转染对照组和空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低(P<0.05).WB结果显示,与空载腺病毒组相比过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加(P<0.05),而p53、p21和p16表达降低(P<0.05),与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低(P<0.05),而p53和p16表达增加(P<0.05).β-gal染色显示,在常氧条件下培养48h,与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组衰老细胞降低(P<0.05),与空载siRNA组相比,敲减HIF-1α组衰老细胞数量则增加(P<0.001).(2)与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组β-catenin表达升高(P<0.01),同时GSK-3β表达降低(P<0.05).与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组β-catenin表达降低(P<0.0001),同时GSK-3β表达升高(P<0.05).与对照组相比,XAV-939组β-catenin表达降低(P<0.001),p53、p21和p16的表达升高,XAV-939+过表达HIF-1α组β-catenin表达降低(P<0.05),p21表达升高(P<0.05).与过表达HIF-1α组相比XAV-939+过表达HIF-1α组衰老细胞数增加(P<0.001),与对照组相比过表达HIF-1α组的细胞核内β-catenin表达更多,而XAV-939组和XAV-939+过表达HIF-1α组则相对较少(P<0.05).结论:HIF-1α通过激活wnt/β-catenin信号通路抑制常氧条件培养下大鼠髓核细胞的衰老.

成纤维细胞生长因子1在促人脂肪细胞形成中抑制Wnt/β-catenin信号通路

目的:研究成纤维细胞生长因子1(fibroblast growth factor-1,FGF-1)调控人脂肪细胞形成的时序性,明确其潜在的分子调控机制。方法:以过度生长综合征(Simpson-Golabi-Behmel syndrome,SGBS)患者前体脂肪细胞为模型,利用人重组蛋白FGF-1处理细胞,分别于细胞增殖期(D-3)、融合期(D0)、诱导分化前期(D3)、中期(D7)及成熟期(D14)收集细胞,通过油红O染色及油红O提取法观察细胞内脂滴聚集情况,运用实时定量PCR及Western印迹方法分析成脂相关基因及Wnt/β-catenin信号通路相关因子的时序表达情况。结果:与对照组相比,FGF-1显著增加了SGBS细胞的脂质聚集,持续促进过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisome proliferater-activated receptorγ,PPARγ)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,G3PDH)、脂连蛋白(adiponectin)和葡萄糖转运体4(glucose transporter type 4,GLUT4)m RNA的高表达;同时,FGF-1显著下调Wnt/β-catenin信号通路相关因子β连环蛋白(β-catenin)和转录因子4(transcription factor 4,TCF4)的表达。结论:FGF-1促进SGBS脂肪形成的作用贯穿整个增殖及分化期,提示FGF-1促进脂肪形成的作用是通过调节Wnt/β-catenin信号通路来完成的。

过表达细胞因子信号转导抑制因子2调控JAK2/STAT3通路抑制直肠癌细胞活性和移植瘤生长

目的:探究细胞因子信号转导抑制因子2(suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)过表达对直肠癌细胞生长、运动和JAK2/STAT3通路的影响。方法:HCT8细胞分为对照组、pcDNA组和pcDNA-SOCS2组,根据组别转染pcDNA空载体或pcDNA-SOCS2重组表达载体,RT-PCR检测SOCS2基因表达,BrdU染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,Western blot检测细胞SOCS2、上皮钙黏蛋白、波形蛋白、纤连蛋白表达以及JAK2和STAT3的磷酸化。另设BALB/c nu/nu裸鼠分为对照组、pcDNA-SOCS2组,建立HCT8皮下移植瘤模型,称取移植瘤质量,免疫组化检测Ki-67和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)平均光密度,Western blot检测瘤组织JAK2和DTAT3磷酸化。结果:离体实验中,RT-PCR结果显示,与对照组(1.00±0.00)比较,pcDNA-SOCS2组细胞SOCS2 mRNA水平(4.70±0.27)明显升高(P=0.000)。Western blot结果显示,pcDNA-SOCS2组细胞SOCS2蛋白表达(0.130±0.020)较对照组(0.010±0.005)明显上调(P=0.000)。BrdU阳性百分比明显降低(P=0.000);流式细胞术结果显示,pcDNA-SOCS2组[(35.0±5.0)%]HCT8细胞凋亡率较对照组[(6.0±3.4)%]明显升高(P=0.000)。Transwell分析结果显示,pcDNA-SOCS2组(89.0±10.0)HCT8细胞侵袭数目较对照组(87.0±13.0)明显减少(P=0.000)。Western blot结果显示,pcDNA-SOCS2组HCT8细胞中上皮钙黏蛋白水平(0.120±0.030)较对照组(0.010±0.004)明显升高(P=0.000),同时波形蛋白水平(0.008±0.004)和纤连蛋白水平(0.010±0.005)较对照组(0.170±0.024,0.070±0.020)明显降低(P=0.000),JAK2和STAT3磷酸化水平降低(P=0.000)。在体实验中,pcDNA-SOCS2组瘤体质量(0.14±0.06)较对照组(0.45±0.08)明显减轻(P=0.000)。免疫组化结果显示,pcDNA-SOCS2组Ki-67和VEGF平均光密度(17.0±6.0,7.0±6.0)较对照组(52.0±9.0,43.0±9.0)明显降低(P=0.000),瘤体JAK2和STAT3磷酸化水平明显下调(P=0.000)。结论:SOCS2过表达可抑制直肠癌HCT8细胞的增殖和运动能力并促进其凋亡,这一作用与JAK2/STAT3通路有关。

转录因子TEAD4调控WNK1表达介导Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌增殖和迁移

目的探究转录因子TEA结构域转录因子(TEAD)4通过调控赖氨酸缺乏激酶(WNK)1表达介导Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路促进结肠癌的增殖和迁移。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TEAD4在正常人结肠上皮细胞NCM-460和人结肠癌细胞系SW620、SW480、LOVO、HCT 116中的表达情况。构建低表达TEAD4和WNK1的SW620和LOVO细胞,并通过平板克隆实验和细胞划痕实验评估TEAD4和WNK1对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响。通过生物分析找到TEAD4与WNK1启动子之间的结合位点序列,运用染色质免疫沉淀技术(ChIP)-qPCR验证TEAD4与WNK1启动子的结合情况。在沉默TEAD4的细胞中进一步过表达WNK1检测细胞增殖、迁移和Wnt/β-catenin信号通路的变化。结果TEAD4在结肠癌细胞中显著高表达(P<0.05)。敲低TEAD4显著抑制结肠癌细胞的增殖和迁移(P<0.01)。沉默TEAD4能显著抑制WNK1的表达(P<0.01)。通过抑制Wnt/β-catenin信号通路显著减弱结肠癌细胞的增殖和迁移(P<0.01)。在沉默TEAD4的细胞中进一步过表达WNK1,部分回调细胞的增殖、迁移能力,显著激活Wnt/β-catenin信号通路(P<0.05)。结论转录因子TEAD4促进WNK1表达,激活Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌的增殖和迁移。

肿瘤坏死因子-α通过Wnt/β-catenin信号通路对胆囊癌细胞增殖的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)通过Wnt/β-catenin信号通路对胆囊癌细胞系NOZ的增殖作用,并探讨其相关分子机制。方法 采用CCK-8实验和生长曲线实验测得TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ增殖作用的最佳浓度和时间;采用流式细胞术检测TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ周期的影响;应用Western blot方法检测胆囊癌细胞系NOZ中Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、c-myc、cyclinD1)蛋白的表达;采用平板克隆形成实验测定胆囊癌细胞系NOZ的增殖能力。结果 CCK-8实验法和生长曲线实验测得TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ增殖作用的最佳浓度是20 ng/mL,最佳时间是48 h;在TNF-α20 ng/mL作用下,G_(1)期细胞数目减少,S期细胞占比增加,G_(2)期细胞占比减少;TNF-α可促进胆囊癌细胞系NOZ中Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、c-myc、cyclinD1)蛋白的表达;经TNF-α(20 ng/mL)处理的胆囊癌细胞系NOZ克隆数量大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进胆囊癌细胞系NOZ的增殖,促进胆囊癌发展。

Wnt/β-catenin信号通路抑制剂的抗肿瘤研究进展

Wnt信号通路广泛存在于多细胞真核生物中,并且高度保守,在胚胎发育过程中起到重要作用。大量研究表明,Wnt信号通路的异常激活与肿瘤的发生发展密切相关,其在多种恶性肿瘤的增殖、分化、凋亡、迁移、侵袭、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)及肿瘤干细胞特性中发挥重要作用,因此开发靶向Wnt信号通路的抗肿瘤药物具有重要意义。目前,Wnt信号通路抑制剂的研究已取得一定进展。本文主要对近年来Wnt途径中关键成员Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。

红细胞沉降率、血清白蛋白及dickkopf WNT信号通路抑制剂1在多发性骨髓瘤中的表达及对预后的预测价值分析

目的探讨红细胞沉降率(ESR)、血清白蛋白(ALB)、dickkopf WNT信号通路抑制剂1(DKK1)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及对预后的预测价值。方法选取106例MM患者作为MM组,另选取同期100例健康体检者作为健康对照组,比较两组受试者ESR、ALB、DKK1水平。根据预后情况,将MM患者分为死亡组(n=14)和生存组(n=92),比较两组患者ESR、ALB、DKK1水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ESR、ALB、DKK1单独及联合检测对MM的诊断价值及对MM患者预后的预测价值。结果MM组患者ESR、DKK1均明显高于健康对照组,ALB明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。死亡组患者ESR、DKK1均明显高于生存组,ALB明显低于生存组,差异均有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线显示,ESR、ALB、DKK1联合检测对MM的诊断价值及对MM患者预后的预测价值均高于任一指标单独检测。结论ESR、DKK1在MM中高表达,ALB在MM中低表达,ESR、ALB、DKK1联合检测对MM具有较好的诊断效能,可作为MM发生发展及预后判断的辅助参考指标,值得临床推广应用。

儿童急性淋巴细胞白血病中Wnt通路抑制因子-1基因甲基化研究

目的探讨Wnt通路抑制因子-1(Wif-1)表达及其甲基化状态在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的意义。方法选取徐州医科大学附属医院2017年6月至2022年2月新确诊的43例ALL患儿为试验组,20名骨髓移植供者为对照组。留取试验组、对照组骨髓血各3~5 ml,实时荧光定量聚合链反应法检测Wif-1 mRNA表达;Western blot法检测Wif-1蛋白表达;甲基化特异性聚合酶链反应法检测Wif-1基因甲基化状态。结果试验组Wif-1 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组Wif-1基因甲基化阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童ALL存在Wif-1基因高甲基化。

沉默Sp5对mEPMCs中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响

目的 探讨沉默转录因子特异蛋白5(Sp5)对小鼠胚胎腭突间充质细胞(m EPMCs)中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响。方法 体外分离并培养孕14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,细胞免疫荧光染色鉴定细胞来源;利用慢病毒转染技术沉默mEPMCs中Sp5基因的表达,Western blot验证转染效率。后续实验设空白对照组、空载病毒组、沉默组(Sp5-shRNA组)。各组细胞转染72 h后,采用Western blot及RT-qPCR法分别检测β-连环蛋白(β-catenin)、丝氨酸/苏氨酸激酶(GSK-3β)、Wnt家族成员3a(Wnt3a)、特异性周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白及m RNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;免疫荧光法检测5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)阳性细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期。结果 成功分离mEPMCs并沉默Sp5的表达。Western blot及RT-qPCR结果显示,Sp5-shRNA组β-catenin、GSK-3β、Wnt3a、CyclinD1蛋白及mRNA表达水平均高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05);Sp5-shRNA组细胞增殖能力和EdU阳性细胞增殖率均高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05);Sp5-shRNA组mEPMCs处于S期的细胞比例高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05)。结论 沉默m EPMCs中Sp5可通过对Wnt信号通路的调控来参与腭的发育,促进mEPMCs的增殖。

Wnt信号通路及其抑制剂在胃癌中的研究进展

胃癌是一种复杂的异质性疾病,发病和死亡率常年居高不下,分子靶向治疗有望成为一种更有效、毒副反应更轻的治疗策略。无翅型小鼠乳腺肿瘤病毒(Mouse mamary tumor virus,MMTV)整合位点家族成员(Wingless-type MMTV integration site family,Wnt)/beta-连环蛋白(β-catenin)(简称Wnt)信号通路参与调控胚胎发育、细胞增殖、分化、迁移和凋亡等生理活动,是涉及癌症发生发展和转移的主要途径之一。在超过50%的胃癌患者中观察到Wnt通路失调,因此可能提供了一个新的治疗靶点。近年来,越来越多的证据表明Wnt信号通路在胃癌发生进展中的核心作用,一些在配体/受体水平靶向该通路的抑制剂正在进行临床前或临床试验研究,在通路中找到的或与该通路相关的新靶点可能成为胃癌早期诊断和治疗的潜在标志物。本文就Wnt信号通路与胃癌的关系及该通路抑制剂在胃癌中的研究进展作一综述,以期为胃癌的诊断和治疗提供新的策略。

转化生长因子-β/白血病抑制因子信号通路与儿童肝细粒棘球蚴成囊调控的相关性

目的探讨转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)信号通路与儿童肝细粒棘球蚴成囊调控的相关性。方法2020年1月至2021年6月,就诊于新疆维吾尔自治区儿童医院普通外科的肝细粒棘球蚴病患儿中,选取40例为研究对象。行囊肿摘除术,体外分离原头蚴并培养。分为3个研究组(分别添加LIF因子、LIF siRNA、Smad4 siRNA)及1个对照组。培养2周后,镜检具有成囊特征的原头蚴,提取总蛋白,采用酶联免疫吸附试验检测TGF-β、Smad2、Smad3、Smad4和LIF的表达水平。统计学方法采用单因素方差分析和t检验。结果各组间TGF-β、Smad2、Smad3、Smad4、LIF的表达水平比较,差异均有统计学意义(P值均<0.001)。对照组上述5个指标的表达水平分别为(3152±276)ng/L和(17.4±3.0)、(15.9±0.9)、(18.6±1.8)、(1334±236)μg/L。LIF组TGF-β、Smad2、Smad4、LIF的表达水平[(4100±173)ng/L和(34.3±3.0)、(26.3±2.2)、(1984±237)μg/L]均高于对照组(P值均<0.05)。LIF siRNA组上述5个指标的表达水平[(2151±136)ng/L和(9.2±1.2)、(12.2±0.8)、(12.8±0.4)、(464±244)μg/L]均低于对照组(P值均<0.05)。Smad4 siRNA组上述5个指标的表达水平[(2529±267)ng/L和(5.7±1.3)、(10.1±0.7)、(9.8±2.0)、(246±53)μg/L]也均低于对照组(P值均<0.05)。结论体外实验表明,TGF-β/LIF信号通路可能与儿童肝细粒棘球蚴病原头蚴成囊调控具有相关性,原头蚴往成囊方向发育可能受LIF调控。