宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7水平及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1(WISP1)、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)水平及临床意义。方法选取150例宫颈癌患者和164例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者。采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清WISP1水平,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组患者血清TRPM7 mRNA水平。宫颈癌发生的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清TRPM7 mRNA、WISP1单独及联合检测对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。宫颈癌患者中文化程度为初中及以下、孕次≥3次、产次≥2次、合并高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的比例均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,TRPM7 mRNA水平升高、WISP1水平升高、合并高危HPV感染均是宫颈癌发生的独立危险因素(P﹤0.01)。ROC曲线显示,TRPM7 mRNA、WISP1联合检测诊断宫颈癌的AUC为0.944(95%CI:0.921~0.966),高于二者单独检测(P﹤0.05)。结论宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平较高,二者联合检测可提高对宫颈癌的诊断价值。

生长抑制蛋白家族成员5(ING5)在人乳腺癌细胞的核质转运与不良临床病理特征的相关性分析

目的探究生长抑制蛋白家族成员5(ING5)在人乳腺癌细胞的核质转运及其ING5在细胞核和胞质高表达与不良临床病理特征的相关性。方法收集乳腺癌260例、淋巴结转移性乳腺肿瘤55例、乳腺纤维腺瘤61例、乳腺腺瘤病110例及癌旁乳腺组织91例。制作组织芯片,采用免疫组织化学染色法检测其ING5在细胞核和细胞质中表达情况,并分析核、质ING5蛋白与不良临床病理特征的相关性。结果乳腺癌旁组织细胞核ING5蛋白表达明显高于乳腺纤维腺瘤、乳腺腺瘤病和乳腺癌组织,腺瘤病组织细胞核ING5表达高于乳腺癌组织,乳腺癌组织细胞核ING5表达高于淋巴结转移癌细胞;癌旁乳腺组织细胞质ING5表达高于乳腺纤维腺瘤、乳腺腺瘤病和乳腺癌组织。提示ING5蛋白在人乳腺癌细胞存在核质转运。细胞核ING5高表达与远处转移呈负相关,与P53表达呈正相关,而细胞质ING5高表达与肿瘤直径和雌激素受体(ER)表达呈正相关,三阴乳腺癌(TNBC)细胞质ING5表达比非三阴乳腺癌(non-TNBC)低。结论 ING5蛋白在乳腺癌细胞存在核质转运,且细胞核ING5蛋白高表达与一些不良临床病理行为特征呈负相关。

Wnt5a在糖尿病前期及糖尿病中的表达差异及其与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性分析

目的:分析Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)在糖尿病前期及糖尿病中的表达差异及其与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性。方法:将2020年11月至2021年11月期间枣庄市立医院收治的糖尿病前期者64例作为A组,糖尿病患者51例作为B组,体检的健康人群50例作为C组。采集3组基线资料,测定Wnt5a水平,分析Wnt5a在糖尿病前期、糖尿病中的表达差异,测定免疫炎症相关指标,分析Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性。ROC曲线分析Wnt5a对糖尿病前期、糖尿病的预测价值,确定其截断值,用于临床疾病预测。结果:与B组相比,A组Wnt5a水平、免疫炎症指标Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22水平降低(P<0.05)。Logistic回归分析显示空腹血糖、Wnt5a、Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22是影响糖尿病前期发生的独立危险因素(P<0.05)。Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症相关指标Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,Wnt5a预测糖尿病前期、糖尿病的AUC值分别为0.921、0.897,AUC均>0.7,表明Wnt5a对糖尿病前期、糖尿病发生的预测价值较高(P<0.05)。结论:Wnt5a在糖尿病前期、糖尿病中的表达具有一定差异,当42.38 pg/ml≤Wnt5a水平<62.50 pg/ml时为糖尿病前期,当Wnt5a水平≥62.50 pg/ml时则说明已经从糖尿病前期过渡至糖尿病,且认为Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症有关,可能是通过放大糖尿病前期患者局部免疫炎症增加胰岛素抵抗程度,最终导致糖尿病发生。

卵巢癌组织中miR-431-5p、驱动蛋白超家族成员11的表达水平及临床意义

目的探讨卵巢癌组织中miR-431-5p、驱动蛋白家族成员11(KIF11)的表达水平及临床意义。方法选取113例接受根治性或姑息性切除术治疗的卵巢癌患者,取术中切除的卵巢癌组织和癌旁组织,采用实时定量PCR法检测两种组织中miR-431-5p、KIF11 mRNA表达水平。分析卵巢癌组织中miR-431-5p和KIF11 mRNA表达水平的相关性,并分析二者与卵巢癌患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制不同miR-431-5p、KIF11 mRNA表达水平的卵巢癌患者术后5年的生存曲线。采用多因素Cox回归模型分析卵巢癌患者预后不良的影响因素。结果与癌旁组织比较,癌组织中miR-431-5p的表达水平降低,KIF11 mRNA表达水平升高(均P<0.05)。卵巢癌组织中miR-431-5p表达水平与KIF11 mRNA表达水平呈负相关。国际妇产科联盟(FIGO)分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移的患者卵巢癌组织中miR-431-5p表达水平更低,KIF11 mRNA表达水平更高(P<0.05)。113例卵巢癌患者术后5年总生存率为53.98%,miR-431-5p表达水平≥0.49的患者术后5年总生存率高于miR-431-5p表达水平<0.49的患者,KIF11 mRNA表达水平≥1.70的患者术后5年总生存率低于KIF11 mRNA表达水平<1.70的患者(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、KIF11 mRNA表达水平≥1.70为卵巢癌患者预后不良的独立危险因素,miR-431-5p表达水平≥0.49为独立保护因素(均P<0.05)。结论卵巢癌组织中miR-431-5p表达下调,KIF11表达上调,二者均与肿瘤进展有关,可能共同影响卵巢癌患者的预后。

趋化素样因子超家族成员5研究进展

趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM5是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的四次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。研究表明,CMTM5广泛表达于人类正常组织,在大多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,恢复其表达可抑制肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移等生物行为。CMTM5抗肿瘤活性的机制尚不明确,可能参与了多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM5与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。

脑梗死患者血浆miR-129-5p、PHLDA1水平与颈动脉粥样硬化斑块性质及神经功能损伤程度的关系研究

目的探讨脑梗死患者血浆微小RNA-129-5p(miR-129-5p)、普列克底物蛋白同源结构域家族A成员1蛋白(PHLDA1)水平与颈动脉粥样硬化斑块性质及神经功能损伤程度的关系。方法选取2022年6月至2023年2月该院收治的89例脑梗死患者为观察组,另选取同期于该院体检的85例健康者为对照组。根据脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块性质,将斑块表面光滑且回声强的归为稳定斑块组(37例),斑块低回声/表面不光滑/偏心指数>2/存在血流信号的归为不稳定斑块组(52例)。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻中度损伤组(≤15分,63例)和重度损伤组(>15分,26例)。采用多因素Logistic回归分析确定影响脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性的因素,采用Spearman相关分析脑梗死患者D-二聚体、C反应蛋白(CRP)、miR-129-5p、PHLDA1水平与NIHSS评分的相关性。结果观察组miR-129-5p水平明显低于对照组(P<0.001),PHLDA1水平明显高于对照组(P<0.001);与稳定斑块组比较,不稳定斑块组D-二聚体、CRP和PHLDA1水平升高(P<0.001),miR-129-5p水平降低(P<0.001);D-二聚体、CRP、PHLDA1是导致脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块不稳定的独立危险因素(OR=1.354、1.392、1.376,P<0.05),miR-129-5p为其保护因素(OR=0.752,P<0.05)。与轻中度损伤组比较,重度损伤组患者D-二聚体、CRP和PHLDA1水平升高(P<0.001),miR-129-5p水平降低(P<0.001)。脑梗死患者D-二聚体、CRP和PHLDA1水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.571、0.532、0.435,P<0.001),miR-129-5p水平与NIHSS评分呈负相关(r=-0.427,P<0.001)。结论血浆miR-129-5p和PHLDA1在脑梗死患者中表达异常,且与患者颈动脉粥样硬化斑块性质和神经功能损伤程度密切相关。

lncRNA SMAD5-AS1在肺腺癌细胞中的表达及其通过Wnt/β-catenin通路对癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SMAD家族成员5反义RNA1(SMAD5-AS1)在肺腺癌(LUAD)中的表达及其对LUAD细胞恶性生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法通过生物信息学网站对LUAD组织中lncRNA SMAD5-AS1的表达进行分析;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测72例LUAD组织与邻近正常组织以及人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)与人LUAD细胞(SPC-A-1、A549、H1299、LTEP-a-2)中lncRNA SMAD5-AS1表达水平。体外培养对数生长期的SPC-A-1和H1299细胞,分为SPC-A-1对照组(SPC-A-1-Ctr组)、SPC-A-1+sh-NC组、SPC-A-1+sh-SMAD5-AS1组、H1299对照组(H1299-Ctr组)、H1299+LV5-NC组、H1299+LV5-SMAD5-AS1组。采用携带lncRNA SMAD5-AS1敲除的短发夹RNA(sh-SMAD5-AS1)和lncRNA SMAD5-AS1过表达的重组质粒(LV5-SMAD5-AS1)及相应空载体的重组慢病毒转染细胞,qRT-PCR验证转染效率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)测定细胞增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路相关蛋白[E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin]的表达。结果lncRNA SMAD5-AS1在LUAD组织和细胞中呈高表达(均P<0.05);敲低lncRNA SMAD5-AS1表达后,SPC-A-1细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及N-cadherin、Vimentin和细胞核β-catenin蛋白水平显著降低(均P<0.05),E-cadherin和GSK-3β蛋白水平显著升高(均P<0.05);过表达lncRNA SMAD5-AS1后,H1299细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及N-cadherin、Vimentin和细胞核β-catenin蛋白水平显著升高(均P<0.05),E-cadherin和GSK-3β蛋白水平显著降低(均P<0.05)。结论lncRNA SMAD5-AS1在LUAD中高表达,其可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进LUAD细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。

miR-137通过靶向MCL1和谷氨酰胺转运SLC1A5调节肺癌细胞的铁死亡机制

目的 探讨miR-137通过靶向髓系白血病1蛋白(MCL1)和谷氨酰胺转运蛋白溶质载体家族A1成员(SLC1A)5调节肺癌细胞铁死亡的机制。方法 非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549从美国典型培养物保藏中心获得。培养基均补充有10%胎牛血清(FBS),在37℃的含5%CO_(2)的潮湿空气中孵育。培养细胞以进行miR-137载体转染,直至细胞融合度达到70%~80%。将培养细胞分为对照组、miR-137转染组和miR-137沉默组。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析细胞MCL1和SLC1A5、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4 mRNA表达。通过双重荧光素酶报告基因测定miR-137与MCL1和SLC1A的靶向作用。通过铁测定试剂盒测量每个细胞系中的Fe2+浓度。通过线粒体超氧化物(MitoSOX)指示剂测量了细胞中MitoSOX的产生。通过相应试剂盒检测活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。通过流式细胞仪检测细胞凋亡。通过Transwell法测定miR-137对细胞迁移、侵袭的影响。结果 miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组MCL1、GPX4和SLC1A5 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组MCL1、SLC1A5和GPX4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-137转染组显著降低了用Wt-SLC1A5和Wt-MCL1载体共转染的NSCLC细胞中的荧光素酶活性(P<0.05),而Mut-SLC1A5和Mut-MCL1模拟共转染荧光素酶活性酶无显著变化(P>0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著降低,线粒体相对膜电位显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著升高,线粒体相对膜电位显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组ROS和MDA浓度显著降低,GSH浓度显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组ROS和MDA浓度显著升高,GSH浓度显著降低(P<0.05)。24、48和72 h时,miR-137转染组较miR-137沉默组和对照组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),72 h时miR-137沉默组较对照组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组细胞迁移、侵袭数量显著增多(P<0.05),miR-137转染组较对照组细胞迁移、侵袭数量显著减少(P<0.05)。结论 miR-137可以靶向调控SLC1A5和MCL1,诱导肺癌细胞铁死亡,从而促进细胞凋亡。

GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响

目的ATP结合盒B亚家族成员1(ATP binding cassette subfamily B member 1,ABCB1)的异常表达在多种癌症的发生发展中发挥关键作用。然而,G蛋白偶联受体C家族5组A型(G protein coupled receptor family C group5 type A,GPRC5A)调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响仍不清楚。本研究探讨了GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响。方法我们采用RT-PCR、Western-blot或免疫组化实验,分析ABCB1在肺腺癌细胞系、人肺腺癌组织以及GPRC5A基因敲除小鼠和野生型小鼠的气管上皮细胞和肺组织中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析GPRC5A基因敲除小鼠气管上皮细胞对化疗药物的敏感性。采用皮下肿瘤形成实验探讨下调ABCB1表达是否可抑制体内肺腺癌增殖。采用免疫荧光和免疫沉淀实验研究GPRC5A和ABCB1之间潜在的调控关系。结果ABCB1在肺腺癌细胞系和人类肺腺癌组织中表达上调。GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞及肺组织的ABCB1表达高于野生型小鼠。与GPRC5A野生型小鼠的气管上皮细胞相比,GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞对塔立奇达和多柔比星更敏感。注射移植细胞28天后,接受ABCB1基因敲除细胞移植的GPRC5A-/-C57BL/6小鼠的肺肿瘤的体积和重量均明显低于野生型细胞移植小鼠(P=0.0043,P=0.0060)。此外,免疫荧光和免疫沉淀实验表明,GPRC5A通过直接结合方式调控ABCB1的表达。结论GPRC5A通过抑制ABCB1表达降低肺腺癌增殖。GPRC5A调节ABCB1表达的途径有待研究。

周期素依赖性蛋白激酶5及其激动剂在神经系统发育中的作用

周期素依赖性蛋白激酶5（cyclin dependent kinase5，CDK5）是CDKs家族的成员之一，属于丝氨酸／苏氨酸激酶家族，具有与其他的CDKs成员同源的序列。CDK5最早是从Hela细胞中分离并克隆，并且发现是一种PSSALRE激酶与cdc2和CDK2的基因序列有57％的同源性，故又称为edc2相关的蛋白激酶。近年的研究表明CDK5并不像其他家族成员（CDKs）主要参与细胞周期的调控，

替加环素治疗小鼠脓毒症肺损伤的作用及其对Wnt5a与Syndecan-1的影响

目的探讨替加环素治疗小鼠脓毒症肺损伤的作用及其对无翅型MMTV整合位点家族成员5a(Wnt5a)与多配体蛋白聚糖1(Syndecan-1)的影响。方法30只成年雄性BABL/c小鼠随机分为假手术组、模型组和替加环素组,每组10只。采用盲肠结扎穿孔手术对模型组和替加环素组制备脓毒症模型,假手术组术中仅翻动盲肠,但不结扎穿孔。造模3 h后对替加环素组小鼠腹腔注射6.25 mg/kg替加环素,其余两组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。24 h后处死小鼠并取肺组织。进行苏木精-伊红(HE)染色,记录病理评分;电镜下观察肺血管内皮细胞的病理变化;计算肺湿/干质量比值(W/D);免疫组织化学染色法及Western-blot检测肺组织中Wnt5a与Synde-can-1的表达。结果假手术组小鼠肺泡壁正常,肺泡内无出血,炎症细胞浸润较少。模型组小鼠可见肺泡壁结构破坏,肺泡内有出血,并且可见大量炎症细胞浸润。与模型组比较,替加环素组肺肺部病理损伤减轻。假手术组和替加环素组肺损伤病理评分均低于模型组(P<0.05)。假手术组小鼠肺血管内皮细胞内空泡较少,线粒体无明显肿胀,并且基膜完整。模型组肺血管内皮细胞肿胀,细胞内空泡增加,可见线粒体肿胀,基膜和内皮细胞分离。替加环素可以改善脓毒症小鼠的肺血管内细胞病理变化。假手术组和替加环素组W/D、Wnt5a及Syndecan-1免疫组化检测平均光密度值和蛋白相对表达量均低于模型组(P<0.05)。结论替加环素对脓毒症肺损伤有一定保护作用,并且可以下调Wnt5a和Syndecan-1的表达。

急性胰腺炎患者血清葡萄糖调节蛋白78、miR-181-5p的表达及意义

目的探讨急性胰腺炎(AP)患者血清葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、miR-181-5p的表达水平及其临床意义。方法选取141例AP患者作为研究对象,依据AP严重程度分为轻症组86例和重症组55例。另选取同期体检的健康人员100例纳入对照组。采用实时荧光定量PCR法检测受试者血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平。采用Pearson相关分析法分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平对重症AP的预测价值。结果对照组、轻症组、重症组的血清miR-181-5p表达水平依次升高,GRP78 mRNA表达水平依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-181-5p与GRP78 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.665,P<0.05)。miR-181-5p表达水平偏高、GRP78 mRNA表达水平偏低是重症AP的危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-181-5p预测重症AP的曲线下面积(AUC)为0.836,血清GRP78 mRNA预测重症AP的AUC为0.741,二者联合预测重症AP的AUC为0.861。结论AP患者血清miR-181-5p表达水平升高,GRP78 mRNA表达水平降低。miR-181-5p、GRP78与AP严重程度有关,对重症AP具有一定预测价值,可作为重症AP的潜在预测标志物。

KIF18B通过激活Wnt/βcatenin信号通路促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的实验研究

目的 探讨驱动蛋白家族成员18B(kinesin family member18b,KIF18B)在子宫内膜癌组织中的表达,及促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的作用机制。方法 收集子宫内膜癌组织50例和正常子宫内膜组织30例,采用免疫组织化学染色检测KIF18B表达水平,分析KIF18B表达与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系及对患者预后的影响。KIF18B小干扰RNA(siRNA)转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,分为si-NC组和si-KIF18B组,蛋白免疫印迹法检测KIF18B siRNA的转染效果;噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的转移能力;双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞中的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路活性;蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a和β-catenin,及其下游增殖相关蛋白cMYC,细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase,MMP-2)、基质金属蛋白酶7 (matrix metalloproteinase-7,MMP-7)的表达。结果KIF18B在子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于正常子宫内膜组织(70.00%vs 46.67%),差异有统计学意义(χ2=4.301,P=0.038)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者KIF18B阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(88.89%vs47.82%)、无淋巴结转移患者(86.36%vs 57.14%),差异有统计学意义(χ2=9.972, 5.009;P=0.002,0.025)。KIF18B高表达组五年总生存率低于KIF18B低表达组(34.29%vs 66.67%),差异有统计学意义(χ2=4.305,P=0.038)。siKIF18B组KIF18B表达低于si-NC组(0.15±0.04 vs 1.01±0.03),差异有统计学意义(t=29.790,P<0.001)。第2~5天si-KIF18B组细胞增殖率低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=3.267~11.080,均P<0.05)。si-KIF18B组细胞穿膜数目低于si-NC组(39.67±4.52个vs 74.33±4.51个),差异有统计学意义(t=9.402,P<0.001)。si-KIF18B组细胞中荧光素酶相对活性低于si-NC组(0.41±0.04 vs 1.00±0.03),差异有统计学意义(t=20.438,P<0.001)。si-KIF18B组Wnt3a,β-catenin,cMYC,cyclinD1,MMP-2和MMP-7表达低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=4.695~36.509,均P <0.05)。结论 KIF18B在子宫内膜癌组织中表达增加,下调KIF18B可以抑制子宫内膜癌细胞的增殖和转移,KIF18B可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路参与子宫内膜癌的发生、发展。

SLC1A5协同TM4SF1通过mTOR信号通路调控食管鳞癌细胞迁移

目的探讨氨基酸转运载体溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的相关性,以及SLC1A5对ESCC细胞迁移的影响及潜在分子机制。方法采用TNM plot在线数据库分析SLC1A5基因在ESCC组织和正常组织中的表达情况。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测ESCC组织和癌旁组织中SLC1A5 mRNA表达情况;采用免疫组化(IHC)法检测SLC1A5蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理资料的相关性。分别构建SLC1A5过表达(SLC1A5-OE组)、四跨膜蛋白超家族成员1过表达(TM4SF1-OE组)、SLC1A5和TM4SF1共同过表达的Eca109细胞。采用细胞增殖试验、Transwell实验检测Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过免疫共沉淀(IP)实验证实SLC1A5和TM4SF1的相互作用;采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达水平。结果TNM plot数据库分析显示,ESCC组织中SLC1A5基因表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中SLC1A5 mRNA表达高于成对的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。IHC结果显示,SLC1A5蛋白在癌组织中高表达,并且与临床分期(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.029)显著相关。细胞增殖实验结果显示,SLC1A5-OE组和对照细胞(Con组)增殖能力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示,与Con组比较,SLC1A5-OE组细胞迁移及侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.01)。IP结果表明,SLC1A5与TM4SF1存在相互作用。WB结果显示,相对于SLC1A5-OE组或TM4SF1-OE组,p-mTOR、p-S6蛋白表达水平在SLC1A5和TM4SF1共同过表达的细胞中最高。Transwell实验证实,共同过表达SLC1A5和TM4SF1的ESCC细胞迁移能力最强。结论ESCC中SLC1A5呈高表达,且与患者临床分期、淋巴结转移显著相关,SLC1A5可能通过与TM4SF1相互作用,激活mTOR信号通路,进而促进ESCC细胞迁移。

miR-383-5p、KIF3B mRNA在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌内miR-383-5p、驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)mRNA的表达及临床意义。方法 选取73例皮肤鳞状细胞癌患者作为研究对象,均行手术采集肿瘤标本及癌旁标本。比较肿瘤组织及癌旁组织内miR-383-5p、KIF3B mRNA表达水平,并分析其与病理特征间的关系。结果 肿瘤组织内miR-383-5p表达量低于癌旁组织,KIF3B mRNA表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移及侵袭程度深部患者miR-383-5p表达低于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结未转移及侵袭程度浅表患者,KIF3B mRNA表达高于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结未转移及侵袭程度浅表患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-383-5p在皮肤鳞状细胞癌内呈低表达,KIF3B mRNA呈高表达,两者均与肿瘤分期、淋巴结转移及侵袭程度有关,共同参与肿瘤发展,可为临床诊治提供重要参考。

Sfrp5/Wnt5a在人心外膜脂肪组织中的表达及其与冠心病的关系探讨

目的分析分泌型卷曲相关蛋白5(Sfrp5)/无翅型MMTV整合位点家族成员5a(Wnt5a)在人心外膜脂肪组织(EAT)中的表达及其与冠心病(CHD)的关系。方法选取2017年4月—2020年4月于平顶山市第二人民医院诊治的CHD病人179例和同期行瓣膜置换术的非CHD病人101例,收集研究对象临床资料、血管造影检查结果、EAT标本。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测EAT中Sfrp5、Wnt5a表达水平,分析Sfrp5/Wnt5a在CHD发生和病情进展中的临床意义。结果CHD组体质指数(BMI)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Wnt5a高于非CHD组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、脂联素(APN)、Sfrp5、Sfrp5/Wnt5a低于非CHD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Sfrp5与HDL-C、APN呈正相关,与收缩压、舒张压、高血压比例呈负相关(P<0.01);Wnt5a与HDL-C、APN呈负相关(P<0.01);Sfrp5/Wnt5a与HDL-C、APN呈正相关(P<0.05),与收缩压、舒张压、高血压比例呈负相关(P<0.01);Sfrp5与Wnt5a呈负相关(P<0.05)。Sfrp5、Sfrp5/Wnt5a是CHD的保护因素(P<0.05),Wnt5a为危险因素(P<0.05)。血管造影检查确定179例CHD病人Gensini积分轻度31例,中度57例,重度91例;冠状动脉节段权重(CAGE)≥20组82例,CAGE≥50组97例。轻度组、中度组、重度组Sfrp5、Wnt5a比较差异有统计学意义(P<0.05);CAGE≥50组和CAGE≥20组Sfrp5、Wnt5a比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论CHD病人EAT中Sfrp5降低,Wnt5a升高,Sfrp5为CHD发生和病情进展的保护因素,Wnt5a为危险因素,Sfrp5/Wnt5a保持平衡可能有助于调节机体糖脂代谢功能。

miR-9-5p和溶质载体家族26硫酸盐转运蛋白成员2在哮喘患儿血清中的表达及与疾病严重程度的相关性

目的探讨miR-9-5p和溶质载体家族26硫酸盐转运蛋白成员2(SLC26A2)在哮喘患儿血清中的表达情况及与疾病严重程度的相关性。方法选取2019年7月—2021年6月在杭州市富阳区第一人民医院就诊并确诊为哮喘的患儿168例为研究对象,根据疾病严重程度分为重度组(52例)、中度组(56例)及轻度组(60例),另选取同期在该院体检且与患儿一般资料匹配的健康儿童50例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清中miR-9-5p、SLC26A2 mRNA表达水平;检测各组血清炎症细胞因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及C-反应蛋白(CPR)]水平;采用肺功能检测仪检测所有研究对象的肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)];采用Pearson法分析miR-9-5p与SLC26A2表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-9-5p、SLC26A2水平预测重度哮喘患儿的价值。结果哮喘患儿血清中miR-9-5p、SLC26A2表达水平均低于对照组,且miR-9-5p、SLC26A2表达水平随着哮喘严重程度的增加而不断降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与健康儿童相比,哮喘患儿血清中TNF-α、CRP、IL-6表达均上升,FEV1、FEV1/FVC水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。哮喘患儿血清中miR-9-5p、SLC26A2水平与TNF-α、CRP及IL-6均呈负相关关系(r_(miR-9-5p)=-0.506、-0.657、-0.411,rSLC26A2=-0.301、-0.399、-0.279,均P<0.05),与FEV1、FEV1/FVC均呈正相关关系(r_(miR-9-5p)=0.376、0.46,rSLC26A2=0.262、0.254,均P<0.05)。miR-9-5p与SLC26A2表达呈正相关关系(r=0.477,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清miR-9-5p、SLC26A2水平预测重度哮喘患儿的曲线下面积(AUC)分别为0.934(95%CI:0.885~0.967)、0.884(95%CI:0.826~0.928),对应的灵敏度分别为98.15%、77.78%,特异度分别为82.46%、83.33%,血清miR-9-5p、SLC26A2水平联合预测重度哮喘患儿的AUC为0.974(95%CI:0.936~0.992),灵敏度为98.14%,特异度为85.96%。结论miR-9-5p和SLC26A2在哮喘患儿血清中低表达,二者呈正相关关系,且联合检测对评估重度哮喘患儿的临床价值高于单一指标,具有一定价值,可作为临床诊断重度哮喘患儿的潜在标志物。

示-环指长比与6个指骨发育相关基因多态性的关联性

目的探讨6个指骨发育相关基因,即成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)、印度刺猬信号分子(IHH)、Msh同源盒1(MSX1)、Runx家族转录因子2(RUNX2)、SRY盒转录因子9(SOX9)及Wnt家族成员5A(WNT5A)13个位点单核苷酸多态性(SNP)与人类示-环指长比(2D∶4D)的关联性。方法采用数码相机拍摄宁夏地区731名在校大学生(男性358名,女性373名)手部正面照片,采用GraphPad Prism 8.0图像分析软件标记解剖点并测量示(2)指及环(4)指指长;多重PCR法进行6个基因13个SNP位点(rs1047057、rs755793、rs41258305、rs3731881、rs3100776、rs12532、rs3821949、rs45585135、rs3749863、rs1042667、rs12601701、rs1829556和rs3732750)的基因分型;单因素方差分析或独立样本t检验间接评估2D∶4D与13个SNP位点间的关联性。结果宁夏大学生女性左手和右手2D∶4D均显著高于男性(均P<0.01);13个SNP位点基因型、等位基因频率在不同性别间的差异均无显著统计学意义(均P>0.05);不同性别中,男性左手2D∶4D与SOX9基因rs12601701位点基因型显著关联(P<0.05),右手2D∶4D与WNT5A基因rs1829556位点基因型显著关联(P<0.05);女性右手2D∶4D与MSX1基因rs12532(P<0.01)和rs3821949(P<0.05)位点基因型显著关联。结论SOX9(rs12601701)、WNT5A(rs1829556)、MSX1(rs12532和rs3821949)基因多态性可能与宁夏地区人群2D∶4D的形成有关。

基于TCGA数据库分析SLC5A1在胰腺癌中的表达及潜在促癌作用

目的基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析溶质载体家族5-成员1(solute carrier family 5-member 1,SLC5A1)在胰腺癌中的表达及其与临床病理、预后的相关性,探索其在胰腺癌发生、进展中的作用。方法利用GEPIA分析TCGA数据库中胰腺癌数据,比较SLC5A1在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达情况,同时利用LinkedOmics和GEPIA分析其在胰腺癌中表达与不同临床病理特征的相关性;利用cBioPortal和LinkedOmics分析胰腺癌中与SLC5A1表达相关的基因,并利用DAVID和KEGG进行信号通路聚类;探讨SLC5A1与胰腺癌不同基因亚型标志物表达的相关性。结果SLC5A1 mRNA表达在胰腺癌组织显著高于非胰腺癌组织(P<0.05)。在胰腺癌中与SLC5A1高表达相关的基因大多位于细胞膜和细胞核,负责蛋白和离子的结合,参与细胞生物功能、代谢调节,其高表达与葡萄糖摄取、糖酵解/糖异生、胰腺分泌等的基因信号通路呈正相关。SLC5A1的表达与胰腺癌异常分化的内分泌外分泌(aberrantly differentiated endocrine exocrine,ADEX)亚型的胰岛素(insulin,INS)、核受体亚家族5-组A-成员2(nuclear receptor subfamily 5-group A-member 2,NR5A2)和蛋白酶-丝氨酸-3(protease-serine-3,PRSS3)表达呈正相关,差异有统计学意义;与胰腺祖细胞型叉头框A3(forkhead box A3,FOXA3)、肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1-alpha,HNF1A)、叉头框A2(forkhead box A2,FOXA2)、肝细胞核因子1β(hepatocyte nuclear factor 1β,HNF1B)、胰十二指肠同源框因子-1(pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1)、肝细胞核因4-γ(hepatocyte nuclear factor 4-gamma,HNF4G)、肝细胞核因子4-α(hepatocyte nuclear factor 4-alpha,HNF4A)、多毛和增强子断裂1(hairy and enhancer of split 1,HES1)表达均呈正相关,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论SLC5A1在胰腺癌中高表达;其高表达与葡萄糖摄取、糖酵解、胰腺分泌的基因信号通路呈正相关,与胰腺癌祖细胞亚型及ADEX亚型密切相关。

喉鳞癌组织CHD5、E-cadherin、Smad4表达变化及其意义

目的探讨染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Smad家族成员4(Smad4)在喉鳞癌组织中的表达变化及其意义。方法选择喉鳞癌组织及其配对的癌旁正常组织各35例份,采用免疫组化SP法检测两种组织CHD5、E-cadherin、Smad4表达。比较两种组织CHD5、E-cadherin、Smad4阳性表达,分析喉鳞癌组织CHD5、E-cadherin、Smad4阳性表达的关系及其与患者临床病理参数和预后的关系。结果喉鳞癌组织CHD5、E-cadherin、Smad4阳性表达率均低于癌旁正常组织(P均<0.05)。相关分析显示,喉鳞癌组织CHD5阳性表达与Smad4阳性表达呈正相关关系(r=0.810,P<0.05),与E-cadherin阳性表达无相关性(r=-0.263,P>0.05),E-cadherin阳性表达与Smad4阳性表达呈正相关关系(r=0.481,P<0.05)。喉鳞癌组织CHD5阳性表达与淋巴结转移、TNM分期有关,E-cadherin阳性表达与组织分化程度、淋巴结转移有关,Smad4阳性表达与淋巴结转移有关(P均<0.05)。CHD5、E-cadherin、Smad4阳性表达者术后生存时间>3年比例明显高于其阴性表达者(P均<0.05)。结论喉鳞癌组织CHD5、E-cadherin、Smad4低表达,其表达变化与喉鳞癌的恶性生物学行为和患者预后有关。