不同微结构磷酸三钙材料对Wnt非经典信号通路相关标志物蛋白的表达影响

背景:骨诱导的发生机制目前还不明确,骨诱导过程中支架材料微结构通过调控相关骨向分化信号通路从而发挥关键性作用。目的:探讨不同微结构磷酸三钙材料对MG63细胞中Wnt非经典信号通路相关标志物表达水平的影响。方法:利用H2O2发泡及控制烧结温度合成具有不同微结构的磷酸三钙材料(TCP-compact,TCP-middle,TCP-big),通过压汞实验、扫描电镜扫描确证材料微结构;同时将已确证的3组具有不同微结构磷酸三钙材料与MG63细胞共培养,检测Wnt非经典信号通路的标志物(Wnt5a,FZD1,ROR2,DKK1)的表达。结果与结论:与具有微孔结构材料共培养的细胞中Wnt5a,FZD1,ROR2,DKK1表达水平显著提高(P<0.05),不同孔径的材料之间Wnt5a,ROR2,DKK1表达存在差异(P<0.05);在共培养末期材料组之间4组标记物表达无显著差异(P>0.05)。材料微结构影响Wnt非经典信号通路的表达水平,其相关标志蛋白表达水平的差异为材料微孔结构所调控,在一定范围内材料孔径越大Wnt非经典信号通路被明显促进。

KRT6A介导Wnt/β-catenin信号通路调节上皮-间质转化促进非小细胞肺癌A549细胞抗辐射

目的 探讨KRT6A对非小细胞肺癌A549细胞抗辐射的促进作用,并阐明其作用机制。方法 诱导并建立抗辐射A549(A549-RR)细胞,通过CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术验证细胞构建成功。Western blotting检测A549和A549-RR细胞中KRT6A表达情况。将A549-RR细胞分为敲减对照组(sh-NC组)和敲减KRT6A组(sh-KRT6A组),Western blotting检测KRT6A、上皮-间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug)以及β-catenin的表达;采用CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡情况。将A549-RR细胞分为sh-NC组、sh-KRT6A组、敲减KRT6A和过表达对照(shKRT6A+ov-NC组)以及敲减KRT6A和过表达β-catenin (sh-KRT6A+ov-β-catenin组),Western blotting检测β-catenin以及EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug的表达;采用CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡情况。结果 成功建立了A549-RR细胞,A549-RR细胞中KRT6A表达上调。敲减KRT6A降低A549-RR细胞增殖活性和克隆形成能力,增加细胞凋亡率,上调E-cadherin蛋白表达并下调N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和β-catenin蛋白表达;过表达β-catenin可逆转此作用。结论 KRT6A在A549-RR细胞中表达上调,敲减KRT6A可降低A549-RR细胞的抗辐射能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路诱导的EMT有关。

Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌中作用的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和细胞增殖、分化等生理过程中扮演着重要角色,同时它在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的肿瘤干细胞(cancerstemcell, CSCs)的维持、血管生成和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymaltransition, EMT)中起着至关重要的作用。有多项研究证实Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC中被显著激活,随着对Wnt/β-catenin信号通路的研究,靶向Wnt/β-catenin信号通路疗法在NSCLC的治疗中取得了显著成效。本文对Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC发生和发展中的作用以及治疗研究进行概述。

Wnt/β-catenin信号通路抗非小细胞肺癌的机制及中药干预研究进展

非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的呼吸系统恶性肿瘤,起病隐匿,早期不易发现,大多数患者就诊时已是晚期,肿瘤细胞易出现远处转移,错过最佳手术时机,尽管放化疗、免疫治疗和靶向治疗等在治疗非小细胞肺癌取得较好的临床效果,但存在诸多的不良反应,以及耐药、复发等问题,NSCLC患者的5年生存率仍然不理想。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路涉及许多重要细胞功能,参与调控机体的多种生物过程,是多种肿瘤疾病的潜在调控靶点,能够影响NSCLC的上皮-间充质转化(EMT)进程与癌症干细胞(CSCs)活性,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭与迁移。近年来,中药治疗NSCLC的相关研究受到广泛关注,并取得良好的疗效,大量的基础研究表明中药可通过调控Wnt /β-catenin信号通路对 NSCLC 细胞增殖、血管生成、凋亡、侵袭和转移及逆转耐药等过程发挥着重要的作用。基于此,本文通过梳理国内外相关文献,总结归纳Wnt /β-catenin信号通路在非小细胞肺癌中的作用机制,中药有效成分及中药复方通过Wnt /β-catenin信号通路的干预NSCLC的作用,以期为非小细胞肺癌的临床治疗、新药的研发提供参考和方向。

非小细胞肺癌中ncRNAs对Wnt/β-catenin信号通路调控的研究进展

肺癌乃中国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(NSCLC)作为肺癌的主要亚型,其研究一直备受关注。尽管在治疗方法上取得了相当大的进展,但NSCLC患者的预后和管理仍然很差。Wnt/β-catenin信号通路在恶性肿瘤中扮演关键角色,深刻地影响着肺癌的进展,尤其是在NSCLC的迁移、侵袭与远处转移方面。因此,Wnt/β-catenin通路已被确定为NSCLC患者治疗的主要靶标之一。非编码RNAs(ncRNAs)包含微小RNAs、长链非编码RNAs和环状RNAs,是基因调控中重要的表观遗传机制组成部分,它们在各种分子和细胞过程中发挥重要作用,调节诸多信号通路,包括Wnt/β-catenin通路。深入了解ncRNAs在NSCLC发展中的调控分子,或许有助于识别并克服目前治疗方法的局限性,发掘潜在的治疗靶点。因此,本文将对NSCLC中ncRNAs调控Wnt/β-catenin信号通路的机制进行综述。

炎症微环境作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的:探讨非经典Wnt钙离子信号通路在慢性牙周炎组织来源的牙周膜干细胞中的表达及其对炎症微环境作用下牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法:收集解放军总医院口腔科因治疗需要拔除的无龋前磨牙、第三磨牙及慢性牙周炎牙齿,培养正常及炎症微环境下的牙周膜干细胞(H-PDLSCs,P-PDLSCs)。成骨诱导3d后采用免疫荧光检测CaMKII在细胞内的表达。H-PDLSCs,P-PDLSCs成骨诱导7d后实时定量PCR检测CaMKII、NLK和Runx2 mRNA表达水平,同时采用Western blot检测两种细胞成骨诱导7d后Runx2、ALP、CaMKII、和NLK的表达。结果:免疫荧光结果显示在H-PDLSCs及P-PDLSCs的对照组中CaMKII均有弱阳性表达,成骨诱导3d后两组细胞中CaMKII的表达增强。实时定量PCR结果显示常规培养条件下CaMKII、Runx 2在H-PDLSCs与P-PDLSCs中的表达不存在显著性差异,当成骨诱导后其在两组中的表达量显著增高,但H-PDLSCs组显著高于P-PDLSCs组。P-PDLSCs中NLK的表达水平显著高于H-PDLSCs,成骨诱导后两种组织来源细胞中NLK mRNA的表达水平均有显著性升高但H-PDLSCs组显著高于P-PDLSCs组。非经典信号通路的关键蛋白CaMKII、NLK在成骨诱导7d后其表达水平升高,成骨关键蛋白Runx2及ALP的表达趋势与之一致,但P-PDLSCs低于H-PDLSCs。结论:在慢性炎症微环境中非经典Wnt信号通路参与牙周膜干细胞的成骨分化,Wnt/Ca2+通路中CaMKII、NLK蛋白与干细胞成骨分化正相关。

miR-183调控Wnt/β-catenin信号通路促进非小细胞肺癌特性肿瘤干细胞及上皮间质转化

目的研究miR-183在非小细胞肺癌中的表达情况及影响非小细胞肺癌的作用机制。方法收集10例新鲜非小细胞肺癌及癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组miR-183表达差异。同时,qRT-PCR检测miR-183在非小细胞肺癌细胞系中的表达情况。通过转染技术,抑制miR-183表达。通过Transwell小室实验检测对非小细胞肺癌细胞侵袭、迁移的影响。通过Western Blot探索miR-183对非小细胞肺癌的作用机制。结果miR-183在非小细胞肺癌组织及癌细胞系中相比于正常组织或上皮细胞表达水平显著上升。Transwell小室实验结果显示,抑制miR-183表达后,非小细胞肺癌细胞侵袭、迁移能力受到抑制。Western Blot实验结果显示,在抑制miR-183表达后,上皮间质转化标志物蛋白N-cadherin、Vimentin、肿瘤干细胞标志物CD133、CD44表达显著下降。对Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白检测,发现下调miR-183表达后,WNT1、p-β-catenin蛋白水平明显下降。结论miR-183在非小细胞肺癌中高表达,并且可能通过Wnt/β-catenin信号通路调控非小细胞肺癌上皮间质转化和肿瘤干细胞。

椎间盘退变中的Wnt信号通路

背景:Wnt信号通路在退变的椎间盘中过表达,而抑制其表达可延缓椎间盘退变进程,因此Wnt信号通路与椎间盘退变关系密切。目的:综述分析Wnt信号通路与椎间盘之间的相互关系,阐明Wnt信号通路在椎间盘退变进程中具体起到的作用和影响。方法:第一作者以“Intervertebral disc,Wnt,Cell proliferation,Cell senescence,Cell apoptosis,Extracellular matrix”为英文检索词,检索2000年至2023年1月PubMed数据库、Web of Science和OVID LWWspringlink数据库,查阅Wnt信号通路与椎间盘退变的相关研究文献,通过阅读整理保留54篇英文文献进行综述。结果与结论:①在胚胎的椎间盘形成过程中,Wnt信号通路可过表达,参与椎间盘形成并促进脊索后伸展。②在椎间盘退变过程中,Wnt信号通路可停滞细胞周期而抑制细胞增殖,使衰老相关蛋白表达增加并参与氧化应激而促进细胞衰老,此外还可受长链非编码RNA调控参与细胞凋亡。③Wnt信号通路亦可以减少细胞外基质相关蛋白合成、促进细胞外基质降解而加快椎间盘退变进程。④Wnt信号通路可通过作为早期椎间盘形成信号激活促进细胞再生,并参与诱导干细胞分化为椎间盘细胞而修复损伤的椎间盘,例如Wnt信号通路可诱导源自软骨终板细胞的干细胞向椎间盘迁移和转化。

靶向Wnt/β-catenin信号通路治疗宫颈癌的研究进展

宫颈癌是一种发病率和转移率均较高的妇科癌症。尽管手术、放射、化学治疗在宫颈癌治疗中取得了显著的临床效果,但仍存在一定的局限性,因此亟需新的治疗药物。近年研究发现,Wnt/β-catenin信号通路在宫颈癌发生发展、转移、耐药等过程中起关键性作用。Wnt/β-catenin信号途径参与宫颈癌的发生发展和远处转移及对化疗药物的耐受性;天然化合物如中药白藜芦醇和黄芩素等及合成化合物如伊曲康唑等均可通过此信号通路发挥抗宫颈癌的作用;非编码RNA和一些蛋白分子均可以通过此通路影响宫颈癌的发生发展。研究说明,Wnt/β-catenin信号途径是宫颈癌治疗的潜在靶点。本文归纳宫颈癌中Wnt/β-catenin信号途径的作用,以期为宫颈癌的临床研究与新药开发提供参考依据。

胃癌组织LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达与Wnt/β-catenin信号通路和预后的关系

目的研究胃癌组织长链非编码核糖核酸(LncRNA)NCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达水平与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路和预后的关系。方法选取2019年2~10月行胃癌根治术的113例胃癌患者,术中取其胃癌组织与癌旁组织。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌组织与癌旁组织LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量及Wnt/β-catenin信号通路相关指标[Wnt3a、Wnt5a、β-catenin、细胞周期素D1(cyclin D1)、原癌基因(c-myc)]信使RNA(mRNA)表达量。采用Pearson相关性法分析LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量与Wnt/β-catenin信号通路相关指标mRNA表达量的相关性。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析胃癌患者术后3年生存情况。结果胃癌组织LncRNA NCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量高于癌旁组织(P<0.05)。胃癌组织Wnt/β-catenin信号通路中Wnt3a mRNA、Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA、cyclin D1 mRNA、c-myc mRNA表达量均高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson法分析显示,Wnt/β-catenin信号通路中Wnt3a mRNA、Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA、cyclin D1 mRNA、c-myc mRNA表达量与LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量呈正相关(P<0.05)。LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量与胃癌患者的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。患者随访3年,随访中位时间为27.90个月。Kaplan-Meier生存曲线显示,LncRNANCK1-AS1高表达组3年生存率52.31%(34/65)低于LncRNANCK1-AS1低表达组的77.08%(37/48)(P<0.05),LncRNA TP73-AS1高表达组3年生存率52.78%(38/72)低于LncRNATP73-AS1低表达组80.49%(33/41)(P<0.05)。结论LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1在胃癌组织中表达上调,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌发生、发展,还可导致不良预后,有望作为辅助评估胃癌患者预后的生物标志物。

非经典Wnt通路在卵巢癌中的作用与潜在治疗意义研究进展

卵巢癌是病死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤,其发生发展过程涉及多种信号通路的异常调控。Wnt信号通路是一种高度保守的分子信号通路,在胚胎发育、组织稳态以及肿瘤发生发展等生理及病理过程中发挥重要作用。Wnt信号通路包括经典的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路以及不依赖β-catenin转录活性的非经典Wnt通路,后者主要包括Wnt/平面细胞极性(Wnt/planar cell polarity,Wnt/PCP)通路和Wnt/Ca^(2+)通路。以往研究主要集中于经典Wnt通路与肿瘤进展的关系,但近年来非经典Wnt通路逐渐受到重视,相关研究丰富了其在组织发育及肿瘤发生等生理及病理过程中的认知。现有研究提示,非经典Wnt通路在卵巢癌中受到异常调控,并与卵巢癌的分期及预后密切相关。非经典Wnt通路在卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭等多种生物学过程发挥重要作用,且该通路的变化与卵巢癌化学治疗(化疗)耐药也具有一定相关性。该文从上述多个角度对非经典Wnt通路在卵巢癌中的作用进行综述,并讨论基于非经典Wnt通路的卵巢癌靶向治疗研究进展,为开发新型靶向药物提供新的思路。

经典Wnt信号通路与子宫肌瘤

随着中国女性育龄期的延迟,健康查体和医学超声技术的进步,越来越多育龄期女性被发现患有子宫肌瘤。既往有症状的子宫肌瘤最主要的治疗方法是手术治疗,但子宫切除术和子宫肌瘤剔除术均会对育龄期女性生活质量产生不同程度的影响。因此,探讨子宫肌瘤发病机制,寻求新的治疗方法,对于罹患子宫肌瘤女性的诊治具有重要意义。经典Wnt信号通路是调节子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的关键途径,参与子宫肌瘤的发生、发展。因此,探讨经典Wnt信号通路在子宫肌瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。

ARHGAP21通过失活WNT信号通路抑制非小细胞肺癌中的上皮间质转化

目的探究Rho GTPase激活蛋白21(ARHGAP21)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、转移的影响并探讨其作用机制。方法通过TCGA、CPTAC数据库和临床资料确定ARHGAP21在NSCLC中的表达与患者预后的关系;通过免疫印迹(Western blot)和免疫组化验证ARHGAP21在NSCLC的基础表达;通过慢病毒稳转构建敲低ARHGAP21的NSCLC细胞系;通过Transwell实验和划痕愈合实验检测敲低ARHGAP21对肺癌细胞体外迁移能力的影响;通过裸鼠肺转移肿瘤模型的构建检测敲低ARHGAP21对肿瘤细胞体内转移能力的影响;通过生物信息学分析预测ARHGAP21的可能作用机制;通过Western blot实验验证其相关机制。结果ARHGAP21的低表达与不良预后相关(P<0.05);与正常组织相比,ARHGAP21在肺癌组织中表达下调(P<0.001);Transwell和划痕愈合实验结果显示敲低ARHGAP21促进了肺癌细胞迁移能力(P<0.001)。裸鼠尾静脉肺转移模型结果显示与阴性对照组相比,敲低ARHGAP21组肺部肿瘤转移结节数量更多(P<0.05)且具有更高表达水平的N-钙粘蛋白和波形蛋白。生物信息学分析表明,APC、GSK3β、Axin和ARHGAP21之间存在高度相关性(P<0.001)。Western blot结果显示敲低ARHGAP21能够降低β-catenin的泛素化,上调N-钙黏蛋白并激活WNT信号通路。结论ARHGAP21的下调能够显著促进NSCLC的迁移、转移能力,这可能与ARHGAP21基因下调后激活WNT信号通路,影响APC、GSK3β、Axin的表达从而降低β-catenin的泛素化有关。

Wnt/β-catenin信号通路相关长链非编码RNA与中枢神经系统疾病

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200 nt,不具有编码蛋白质能力的转录本。研究发现,中枢神经系统疾病中一些lncRNAs可通过下游相关信号通路,如Wnt信号通路影响疾病的发生、发展。而Wnt信号通路可通过影响中枢神经系统中不同的结构在多种中枢神经系统疾病中发挥相应作用。典型Wnt信号通路即Wnt/β-catenin信号通路,与其相关的多种lncRNAs可参与包括神经退行性疾病、胶质瘤、中枢神经系统损伤、癫痫、神经精神疾病等多种中枢神经系统疾病的病理生理过程中,lncRNA与Wnt/β-catenin信号通路的相互作用或许可以作为中枢神经系统疾病的新的治疗靶点,本文就Wnt/β-catenin信号通路相关长链非编码RNA在中枢神经系统疾病进展中的作用进行综述。

长链非编码RNA CARMN对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨长链非编码RNA心脏中胚层增强子相关非编码RNA(CARMN)在乳腺癌细胞增殖和迁移侵袭过程中的作用及其对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法通过UALCAN分析CARMN在乳腺癌组织的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测CARMN在正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)和乳腺癌细胞(MCF-7)的表达。将MCF-7细胞分为NC组(无转染处理)、OE-CARMN组(转染pcDNA3.1-CARMN以过表达CARMN)和si-CARMN组(转染si-CARMN以干扰CARMN表达)。利用CCK-8法、细胞集落形成实验、划痕愈合实验和Transwell小室实验检测MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭情况;qPCR和Western blot检测无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-catenin和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达。结果CARMN在乳腺癌组织和MCF-10A细胞中均表达下调(P<0.05)。OE-CARMN组MCF-7细胞活力、细胞集落数、划痕愈合率和侵袭细胞数量均低于NC组(P<0.05),而si-CARMN组MCF-7细胞活力、细胞集落数、划痕愈合率和侵袭细胞数量均高于NC组(P<0.05)。另外,OE-CARMN组Wnt1、β-catenin和MMP-9表达低于NC组(P<0.05),而si-CARMN组Wnt1、β-catenin和MMP-9表达高于NC组(P<0.05)。结论CARMN可能调控Wnt/β-catenin信号通路活性,在乳腺癌进展中发挥抑癌作用,有望成为乳腺癌的治疗靶点。

LncRNA DLEU2对宫颈癌细胞生物学行为、miR-21和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)对宫颈癌细胞生物学行为的影响,并基于miR-21和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨其作用机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、DLEU2干扰组、DLEU2干扰空载组、DLEU2过表达组、DLEU2过表达空载组。除对照组外,给予其他组细胞转染相应的质粒。转染24 h后,检测各组的细胞增殖活性、细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白表达水平、细胞周期及细胞周期相关因子的mRNA表达水平、细胞侵袭数量及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白表达水平、miR-21表达水平、Wnt/β-catenin的蛋白及mRNA表达水平。结果 (1)与对照组相比,DLEU2过表达组的细胞增殖活性降低、细胞凋亡率增加、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平下调、Bcl-2相关性蛋白X和Caspase-3蛋白表达水平上调(P<0.05)。(2)与对照组相比,DLEU2过表达组的G_(1)期和S期细胞比例降低、G_(2)期细胞比例升高、细胞周期相关因子的mRNA表达水平下调(P<0.05)。(3)与对照组相比,DLEU2过表达组的细胞侵袭数减少,神经型钙黏蛋白表达水平下调,上皮型钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05)。(4)与对照组相比,DLEU2过表达组的miR-21表达水平及Wnt3a、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平均下调。(5)DLEU2干扰组的上述指标变化均与DLEU2过表达组相反(P<0.05),而两个空载组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DLEU2可能通过调控miR-21及抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,从而影响宫颈癌细胞的存活、死亡、EMT和侵袭等生物学行为。

雌激素微环境下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究

目的:探讨雌激素作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells hPDLSCs)成骨分化的调控。方法:将第3代hPDLSCs分为空白组、对照组、雌激素组、抑制剂组,成骨诱导7d检测ALP活性,Real-time PCR检测各组Wnt信号通路基因及成骨基因表达水平。结果:ALP检测结果示对照组较空白组ALP活性增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组ALP活性增加(P<0.05),但雌激素组和抑制剂组ALP活性差异无统计学意义(P>0.05)。Real-time PCR检测结果显示对照组较空白组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05);抑制剂组较雌激素组β-catenin表达下降(P<0.05),而CaMKⅡ、NLK表达增加(P<0.05),但两组成骨基因RUNX2、OCN表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雌激素可能通过增强非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路的活化促进hPDLSCs的成骨分化。

补中益气汤联合顺铂通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善A549/DDP细胞耐药性的分子机制

目的:探究补中益气汤联合顺铂通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善A549/DDP细胞耐药性的分子机制。方法:培养A549/DDP细胞并制备补中益气汤含药血清。采用siRNA沉默GSK-3β表达,检测各组A549/DDP细胞中GSK-3β蛋白的相对表达量;Western blot检测沉默GSK-3β后各组A549/DDP细胞β-catenin和Survivin表达;MTT法检测GSK-3β受抑对各组A549/DDP细胞顺铂IC_(50)的影响;采用Annexin V/PI染色法检测GSK-3β受抑对各组A549/DDP细胞凋亡的影响。结果:相较于空白对照组,siGSK-3β-592组对蛋白表达的抑制率达70%(P<0.05);RNAi技术沉默GSK-3β后,A549/DDP细胞中β-catenin和Survivin蛋白表达明显增加(P<0.05),单独顺铂治疗组与单独补中益气汤治疗组均可使β-catenin和Survivin蛋白表达明显下调(P<0.05),补中益气汤联合顺铂治疗组则可使β-catenin和Survivin蛋白表达下调更显著(P<0.05);RNAi技术沉默GSK-3β后,A549/DDP细胞顺铂IC_(50)显著升高(P<0.05),而补中益气汤仍可显著降低A549/DDP细胞的顺铂IC_(50)(P<0.05);GSK-3β表达受抑后,A549/DDP细胞的顺铂诱导凋亡率明显受抑制(P<0.05),而补中益气汤仍可明显提高A549/DDP细胞的顺铂诱导凋亡率(P<0.05)。结论:上调A549/DDP细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性时,补中益气汤联合顺铂仍对A549/DDP细胞的顺铂耐药性有明显改善作用。

BMP2信号通路与经典Wnt信号通路及相互交联对成骨分化的调控

在以间充质干细胞为代表的具有成骨分化潜能的细胞中,多条信号传导通路及其构成的动态调控网络参与调控其成骨分化过程。其中BMP2和经典Wnt信号通路在此过程中的作用日益受到关注。国内外研究表明,BMP2和经典Wnt信号通路在调控靶细胞成骨分化过程中伴有彼此通路中的关键分子的表达水平和功能活性的改变,并在一定条件下表现出对成骨分化特异性标志物的协同和拮抗调控。成骨增殖分化过程是一个动态过程,在成骨分化的不同阶段,分子通路的作用不同,相互之间的调节也动态变化的,研究BMP2和经典Wnt信号通路在成骨分化过程中的相互调节作用,对于指导治疗骨质疏松和骨折有重要的作用,本文就BMP2和经典Wnt信号通路对靶细胞成骨分化的调控作用以及在此过程中两条信号通路之间的交联作一简要综述。

Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌组织的表达及意义

目的研究Wnt/β-catenin信号通路中关键分子Wnt1、β-catenin及Sox-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨其与患者临床特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测NSCLC组织和正常肺组织中Wnt1、β-catenin及Sox-2蛋白的阳性表达率,并分析其与患者临床特征的关系,采用Kaplan-Meier法分析β-catenin表达与NSCLC患者中位生存期的关系。结果 NSCLC组织中Wnt1、β-catenin及Sox-2蛋白阳性表达率明显高于正常肺组织(P<0.05),Wnt1、Sox-2的表达与淋巴结转移和TNM分期相关,β-catenin的表达与病理类型及组织分化程度相关,β-catenin阳性表达患者中位生存期低于阴性表达患者(P<0.05)。结论Wnt/β-catenin信号通路中关键分子Wnt1、β-catenin及Sox-2在NSCLC组织中的阳性表达率较正常肺组织高,并且其表达水平与患者临床分期和预后有关联。