神经肽Y/Y1受体激活β⁃catenin信号通路介导心肌细胞损伤

目的:研究神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)/Y1受体信号转导在心肌细胞损伤中的作用及机制。方法:C57BL/6J小鼠皮下注射异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)构建心肌损伤模型,腹腔注射Y1受体特异性拮抗剂BIBO3304干预。小鼠随机分为对照组(生理盐水)、ISO组[20 mg/(kg·d)ISO]、BIBO3304+ISO组[0.1 mg/(kg·d)BIBO3304+20 mg/(kg·d)ISO]、BIBO3304组[0.1 mg/(kg·d)BIBO3304],每组10只,连续给药14 d。实时定量PCR和Western blot检测小鼠心肌组织中NPY表达。HE染色和Masson染色观察各组小鼠心肌纤维结构变化和纤维化程度;定量PCR检测小鼠心肌肥大基因心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、β⁃肌球蛋白重链(β⁃myosin heavy chain,β⁃MHC)mRNA表达。采用Y1受体特异性激活剂[Leu31,Pro34]⁃NPY刺激H9C2细胞,检测ANP、β⁃MHC mRNA表达;CCK⁃8检测心肌细胞活力。Western blot检测各组小鼠心肌组织和H9C2细胞中activeβ⁃catenin、磷酸化糖原合成酶激酶⁃3β(phospho⁃glycogen synthesis kinase 3β,p⁃GSK3β)、总糖原合成酶激酶⁃3β(total glyco⁃gen synthesis kinase 3β,t⁃GSK3β)蛋白表达。免疫荧光染色检测心肌细胞β⁃catenin入核情况。利用β⁃catenin特异性抑制剂ICG001处理细胞,检测[Leu31,Pro34]⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力变化。结果:与对照组比较,ISO组小鼠心肌组织NPY mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05),心肌纤维排列紊乱,心肌纤维化程度高,心肌肥大基因表达增加。与ISO组比较,BIBO3304+ISO组小鼠心肌损伤和纤维化得到有效缓解,心肌肥大基因表达下降(P<0.01)。与对照组比较,[Leu31,Pro34]⁃NPY增加H9C2细胞ANP、β⁃MHC mRNA表达,降低心肌细胞活力(P<0.01)。与对照组比较,ISO组小鼠心肌组织activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达明显上调,p⁃GSK3β/t⁃GSK3β增加;与ISO组比较,BIBO3304+ISO组心肌组织activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达降低(P<0.05)。与对照组比较,[Leu31,Pro34]⁃NPY显著增加心肌细胞activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达(P<0.05),促进细胞核β⁃catenin积累。与[Leu31,Pro34]⁃NPY组比较,BIBO3304抑制细胞核β⁃catenin表达,ICG001显著缓解[Leu31,Pro34]⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力下降(P<0.01)。结论:NPY通过Y1受体转导激活β⁃catenin信号通路介导心肌细胞损伤和心肌纤维化。

Wnt/β-catenin通路调控铁死亡在肝癌中的研究进展

铁死亡被认为是一种铁依赖性、非凋亡形式的调节性细胞死亡,主要由活性氧产生和铁稳态失衡导致严重脂质过氧化而引发的,它可诱导相关因子可通过不同途径直接或间接影响谷胱甘肽过氧化物酶,导致抗氧化能力下降和细胞中脂质活性氧积累,最终导致氧化细胞死亡。同时,铁死亡受到了多种途径调控,如铁代谢、线粒体活性、氧化还原稳态以及与疾病相关信号通路等。据研究报道,铁死亡代谢途径失调可影响肝癌的发生、发展。目前铁死亡导致疾病的分子机制知之甚少,但铁死亡相关基因和通路与肝癌进展有关。研究发现,Wnt/βcatenin信号通路异常激活与肝癌的复发、侵袭、转移以及免疫逃逸有关,且与铁死亡之间存在密切的联系。该通路可通过调控铁死亡的发生从而进一步加重肝癌的恶化。目前该领域在肝癌中已取得一定的实质性进展。因此,在本综述中通过概述铁死亡的分子机制及其在肝癌中的作用,探讨其影响肝癌进展的过程,同时,具体分析Wnt/βcatenin信号通路调控铁死亡的发生过程,为未来肝癌的治疗提供可靠的科学理论依据。

Wnt-1或Wnt/beta-catenin信号通路在恶性肿瘤中的研究进展

Wnt-1或Wnt/beta-catenin信号通路最初在鼠乳腺癌病毒诱导的乳腺癌发现的。大量研究发现,该通路异常导致人类各种肿瘤发生、发展,采用siRNA或Wnt-1抗体等手段调控该通路,显示出抗肿瘤效应。提示以Wnt-1或Wnt/beta-catenin为靶向的抗肿瘤治疗,值得进一步研究。

血管分泌因子Rspondin3调控Wntβ-catenin信号通路促进急性肺损伤组织修复的机制研究

目的:探讨血管分泌因子Rspondin3通过wnt/β-catenin信号通路参与急性肺损伤大鼠模型肺的分子机制。方法:40只SPF级SD大鼠建立急性肺损伤模型,将大鼠分为对照组(n=10)、模型组(n=10),阴性对照(Negative control,NC)组(n=10)和Rspondin3组(n=10),模型组、NC组、Rspondin3组建立LPS诱导的大鼠急性肺损伤模型,NC组和Rspondin3建立模型后分别通过尾静脉注射(Negative control,NC)质粒和Rspondin3过表达质粒,对照组和模型组给与等量生理盐水灌,2周后,HE染色检测各组大鼠病肺组织理病变水平,通过Elisa实验检测各组大鼠大鼠肺组织白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1),白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2),白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平的变化,Western blot检测大鼠肺组织wnt-3a及β-环联蛋白(β-catenin)蛋白表达水平,透射电镜技术检测各组大鼠肺组织超微结构变化。结果:与对照组相比,模型组和NC组组织可见明显肺组织损伤,Rspondin3组大鼠肺组织病理损伤程度相对降低,Elisa结果表明,与对照组相比,模型组、NC组和Rspondin3组大鼠肺组织炎症因子IL-1、IL-2和IL-6表达水平升高,与模型组和NC组相比,Rspondin3组大鼠肺组织炎症因子IL-1、IL-2和IL-6表达水平降低,差异具有显著的统计学意义(P<0.01)。Western blot结果表明,与对照组相比,模型组、NC组大鼠Wnt-3a和β-catenin蛋白表达水平降低,与模型组和NC组相比,Rspondin3组大鼠肺组织中Wnt-3a和β-catenin蛋白表达升高降低,差异具有显著的统计学意义(P<0.01)。透射电镜技术表明,与对照组相比,模型组和NC组组织肺组织结构松散,细胞核崩解,细胞结构不完整,细胞空泡化,而Rspondin3组大鼠肺组超微结构表明细胞结构损伤降低,细胞核崩解缓解,细胞结构相对完整,结论:过表达Rspondin3对大鼠急性肺损伤肺组织具有保护作用,其机制可能与激活Wnt-3a/β-catenin信号通路的激活有关。

肿瘤免疫中Wnt/β-catenin信号通路的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的通路,可以起到调节细胞的增殖、分化、凋亡,干细胞的自我更新,组织稳态和创伤愈合的作用。几乎所有肿瘤的发生发展均与Wnt通路的失调有关。Wnt/β-catenin信号转导的异常激活,可以通过对免疫细胞的直接或间接作用,促进免疫排斥,进而阻碍T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。本文对Wnt/β-catenin信号影响肿瘤进展和免疫监视的过程,以及靶向该信号通路治疗癌症的策略作一综述。

Wnt/β-catenin信号通路对人肠癌细胞VEGF表达的调控作用

背景与目的:血管新生是导致大肠癌向其他脏器组织侵袭、转移的重要原因。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是重要的促血管生成因子之一,但其过表达机制尚不清楚。Wnt/β-catenin信号通路在大肠癌发生中存在过度激活,故与大肠癌的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨Wnt/β-catenin信号通路对人肠癌VEGF表达的调控作用,揭示大肠癌血管新生的部分机制。方法:分别采用GSK-3β抑制剂SB-216763激活人肠癌HCT-116细胞Wnt/β-catenin信号通路和β-catenin/tcf抑制剂FH-535抑制Wnt/β-catenin信号通路,蛋白质印迹法(Western blot)法检测β-catenin蛋白表达,ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF表达。结果:GSK-3β抑制剂SB-216763作用人肠癌HCT-116细胞后,β-catenin在细胞总蛋白、细胞质蛋白和核蛋白中的表达均明显升高,12 h达到最大值,分别是对照组的4.3、3.6和3.7倍(P<0.01);同时,激活Wnt/β-catenin信号通路能够上调人肠癌HCT-116细胞VEGF表达水平,并在24 h时差异最显著,是对照组的1.85倍(P<0.01);而抑制Wnt/β-catenin信号通路能够显著下调VEGF表达,是对照组的0.68倍(P<0.01)。结论:Wnt/β-catenin信号通路能够调控人肠癌细胞VEGF表达。

正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后对MMP-2、MMP-7和MMP-9的调控作用

目的观察人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后对其下游基因MMP-2、MMP-7和MMP-9的影响。方法采用GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于正常人滑膜细胞,提取胞核蛋白β-catenin,采用Western blotting检测胞核蛋白β-catenin的表达变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人滑膜细胞上清液中MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达变化。结果 Western blotting结果显示,GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于人滑膜细胞后,β-catenin在胞核蛋白中的表达水平明显升高,并随着GSK-3β选择性抑制剂作用时间的延长,β-catenin的表达逐渐增强,呈时间依赖性,而在其干预的第48小时,胞核蛋白β-catenin的表达变化最明显,是正常组滑膜细胞的5.8696倍,具有统计学意义(P<0.05);酶联免疫吸附法(ELISA)结果显示,与正常组滑膜细胞比较,SB-216763干预的滑膜细胞上清液中MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达分别是正常滑膜细胞的4.6188、3.2443和2.9979倍,具有统计学意义(P<0.05)。结论①SB-216763成功激活人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路;②MMP-2、7、9在人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后其表达显著升高,证明激活Wnt/β-catenin信号通路对MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达有一定的调控作用。③Wnt/β-catenin信号通路在骨性关节炎患者中是激活的,而其对MMP-2、MMP-7和MMP-9的调控可能是导致关节软骨降解,促进骨关节炎形成的作用机制之一。该实验结果有助于从单一通路阐释Wnt/β-catenin信号通路对膝骨关节炎的作用机制。

Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤大鼠肾组织中的表达及意义

目的:探讨Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤大鼠肾组织中的表达。方法:将48只大鼠按照随机数字表法分为正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和缺血再灌注组(IRI组),每组16只;Control组正常喂养,IRI组建立大鼠缺血再灌注损伤模型,Sham组背侧切开后直接将伤口关闭。分别于术后第1天、第3天、第5天、第7天处死4只大鼠,观察三组大鼠肾脏组织病理学改变,并检测三组大鼠血肌酐、尿素氮水平;采用免疫印迹法检测三组大鼠肾脏组织Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白表达,实时定量RT-PCR检测肾脏组织Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA表达。结果:Control组、Sham组各时段肾脏损伤评分、血肌酐比较差异无统计学意义(P>0.05);IRI组术后第1天至第7天肾脏损伤评分、血肌酐、尿素氮先上升后逐渐降低,其中术后第3天肾脏损伤评分、肌酐、尿素氮最高;IRI组术后1、3、5、7 d肾脏损伤评分、血肌酐、尿素氮显著高于Control组、Sham组(P<0.05)。Control组、Sham组各时段Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);IRI group术后Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白逐渐增加,至术后第5天达表达高峰,随后逐渐降低;IRI组术后1、3、5、7 d Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白均显著高于Control组、Sham组(P<0.05);Control组、Sham组各时段Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);IRI group术后Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA显著增加,至术后第3天达表达高峰,随后逐渐降低;IRI组术后1、3、5、7 d Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA均显著高于Control组、Sham组(P<0.05)。结论:Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤组织中表达显著增加,激活的Wnt-β-catenin信号通路参与了肾脏组织的修复过程。

Wnt信号传导通路与Cadherin/Catenin复合体的关联及其在肿瘤发生中的作用

多项研究结果已证实Wnt信号传导通路与多种人类肿瘤的发生发展有密切关系.Wnt信号传导通路的关键成分β-链接素同时也可作为Cadherin/Catenin复合体的组分,在细胞-细胞间黏附和细胞迁徙中起作用.以β-链接素为中心,Wnt信号传导通路与其他的信号通路相互影响,形成网络.本文将重点介绍Wnt信号传导通路与Cadherin/Catenin复合体间相互影响的分子机制,并对其在肿瘤发生过程中的作用进行综述.

Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤干细胞中作用研究进展

Wnt信号通路是调控细胞生长、运动和分化的关键途径,在胚胎和器官发育以及维持干细胞的自我更新方面起重要作用.……

Wnt/β-catenin信号通路在骨重建中的作用研究进展

骨重建包括骨吸收及其耦联的骨形成两方面,在正常情况下,成骨细胞介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收维持动态平衡。Wnt/β-catenin信号通路在骨重建过程中起到重要的作用,与成骨细胞分化、增殖和骨形成密切相关,并通过不同途径影响破骨细胞及骨细胞的功能,现就Wnt/β-catenin信号通路在骨重建过程中的作用作一综述。

塞来昔布通过Wnt/β-catenin信号通路对人结肠癌细胞SW480的影响

目的观察非甾体类抗炎药塞来昔布对体外培养的人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,并研究其与Wnt/β-catenin信号通路的关系,探讨塞来昔布抑制结肠肿瘤生长的分子机制。方法应用MTT法测定不同浓度塞来昔布(0、20、40、60、80、100μmol/L)对SW480细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析不同浓度塞来昔布(0、20、40、80μmol/L)处理48 h后对SW480细胞凋亡的影响;应用Western blot法分析不同浓度塞来昔布(0、20、40、80μmol/L)处理48 h后SW480细胞中β-catenin蛋白和磷酸化的β-catenin蛋白的表达水平。结果 MTT结果显示,塞来昔布对结肠癌细胞的增殖抑制有浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05);流式细胞术分析显示,随着塞来昔布浓度的增加,结肠癌细胞的凋亡率明显增加(P<0.05);Western blot法检测结果显示,随着塞来昔布浓度的增加,β-catenin蛋白表达显著下降(P<0.05),而磷酸化的β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论塞来昔布可以抑制结肠癌SW480细胞的Wnt/β-catenin信号通路,这可能是其抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的重要机制。

胰腺癌Wnt/β-catenin信号通路的研究进展

胰腺癌是一种恶性程度极高的消化道肿瘤,病死率在肿瘤中居第4位,由于胰腺解剖位置的特殊性,大多数胰腺癌确诊时已到晚期,手术切除率低,且对药物治疗不敏感,预后极差,5年生存率不足5%[1]。Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育过程中起着重要作用,但在正常成年体内该通路异常激活可导致肿瘤的发生。已证实Wnt/β-catenin信号通路与胰腺癌的发生发展有着密切的关系,Wnt/β-catenin信号通路激活可促进胰腺癌肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移及抑制肿瘤细胞的凋亡。

β-catenin信号通路与肝癌关系的研究进展

肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,也是世界上最常见的10种恶性肿瘤之一,其特点为起病隐匿、病死率高,其发生发展是一个多因素参与的过程。现阶段对肝癌的治疗方法主要有手术切除治疗、肝动脉插管化疗、介入放射学治疗、免疫治疗、激光治疗、导向治疗、中医药治疗等。肝癌早期不易发现,一旦发现大多为中晚期,此时已失去最佳治疗机会,给患者及家属带来极大痛苦。近年来肝癌的诊断与治疗的研究一直被基础研究人员和临床科研人员所关注。

肺康颗粒对COPD大鼠miRNA-21、TGF-β/Wnt-5a信号通路的影响及机制

目的基于微小核糖核酸(miR)-21调控转录生长因子-β(TGF-β)/无翅和整合位点生长因子5a(Wnt-5a)信号通路,探讨肺康颗粒干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症的机制。方法将90只SD大鼠随机分成6组:空白对照组、模型组、地塞米松组及肺康颗粒低、中、高剂量组。采用烟熏加气管内注入内毒素法建立大鼠COPD模型。第5周开始给予肺康颗粒灌胃干预,连续给药16周。肺功能检测仪检测大鼠用力肺活量(FVC)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、第0.3秒用力呼气容积与用力肺活量的比(FEV0.3/FVC%)。酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞因子转录生长因子-β、白细胞介素(IL)-8、IL-17A含量;qRT-PCR法检测肺组织中miRNA-21、Wnt-5a、TGF-βmRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组、地塞米松组及肺康颗粒各剂量组大鼠FEV0.3、FVC以及FEV0.3/FVC均显著下降(P<0.05);与模型组比较,肺康颗粒各剂量组的TGF-β、IL-8、IL-17A含量明显降低(P<0.01);肺康颗粒各剂量组的miR-21、Wnt-5a mRNA、TGF-β表达明显下调(P<0.01)。结论肺康颗粒可能通过TGF-β/Wnt-5a信号转导通路干预miR-21炎症基因的表达,减轻COPD大鼠的炎症反应。

Wnt/β-catenin信号通路重要分子及其靶基因在原发性肝癌中的作用机制

肝癌是我国及某些亚非地区常见的恶性肿瘤之一，死亡率较高。近年来我国肝癌的发生率有上升趋势，因此了解肝癌的发生发展机制及其治疗刻不容缓。但目前对其发生机制仍不清楚。其中细胞信号转导对其发生、发展、转移起着至关重要的作用。

Wnt信号通路成分Wnt-5a和β-连接蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨Wnt信号通路成分Wnt-5a和β-连接蛋白(β-catenin)在卵巢癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学二步法检测60份卵巢癌组织中Wnt-5a和β-catenin表达;分析其表达与卵巢癌临床病理特征、预后的关系以及两者表达的相关性。结果 Wnt-5a在卵巢癌组织中阳性表达率为61.7%(37/60),其阳性表达与卵巢癌患者年龄、肿瘤大小、组织学类型、病理分级无明显相关性(P均>0.05),与肿瘤转移相关(P<0.05)。β-catenin在卵巢癌组织中阳性表达率为71.7%(43/60),其阳性表达与肿瘤的分期和转移相关(P均<0.05)。Wnt-5a和β-catenin阳性表达患者生存时间明显低于阴性表达患者(P<0.05)。Spearman法分析显示两者表达呈正相关(r=0.344,P=0.011)。在发生转移的患者中Wnt-5a与β-catenin共同阳性表达率高达70%(24/34)。结论 Wnt-5a和β-catenin通过非经典和经典Wnt通路在卵巢癌发展中发挥重要作用,两者高表达可能协同促进肿瘤转移,提示预后不良。

Wnt/β-catenin信号通路在慢性肾炎中的作用及研究进展

Wnt/β-catenin信号通路是生物进化过程中极为保守的通路。其功能涵盖了生物生长发育、疾病、死亡、细胞形态与功能的分化、内环境稳态的维持等。在肾脏方面,Wnt/β-catenin通路亦逐渐成为学者关注的焦点之一。目前研究表明,该通路在肾脏肿瘤的发生和发展[1]、急性肾小管损伤时肾小管的再生与修复[2]以及多囊肾的发病机制[3]中起关键作用。

白芍总苷通过调控Wntβ/catenin信号通路对便秘大鼠胃肠功能的治疗作用及机制研究

目的探讨与研究白芍总苷Wntβ/catenin信号通路对便秘大鼠胃肠功能的治疗作用及机制。方法48只雄性SD大鼠按照随机数字表法平分为3组-模型组、柳氮磺砒啶组与白芍总苷组,所有大鼠均建立了便秘模型。建模成功后模型组、柳氮磺砒啶组与白芍总苷组分别给予0.9%氯化钠溶液、柳氮磺砒啶400 mg/kg、白芍总苷25 mg/kg灌胃,连续治疗21 d。检测3组大鼠2 h大便数量与湿重,疾病活动指数(DAI)评分与结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,血清白细胞介素(IL)-10与IL-17含量,Wntβ/catenin信号通路蛋白表达变化情况。结果治疗21 d后,柳氮磺砒啶组与白芍总苷组大鼠的2 h大便数量与湿重高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),白芍总苷组大鼠高于柳氮磺砒啶组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗21 d后,柳氮磺砒啶组与白芍总苷组大鼠的DAI评分与CMDI评分、血清IL-10与IL-17含量、结肠组织Wnt与β-catenin蛋白相对表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),白芍总苷组大鼠低于柳氮磺砒啶组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白芍总苷在便秘大鼠的应用能抑制Wntβ/catenin信号通路的激活,并抑制炎性因子的表达,从而改善胃肠功能,缓解便秘症状。