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升陷汤调节Wnt3a/β-catenin信号途径介导的细胞衰老改善特发性肺纤维化大鼠肺功能
1
作者
闫亚男
梁玉磊
+1 位作者
王杰鹏
方朝义
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第12期31-38,共8页
目的:观察升陷汤对特发性肺纤维化(IPF)大鼠Wnt3a/β-连环蛋白(β-catenin)途径介导的细胞衰老的作用特点,揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法:32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博...
目的:观察升陷汤对特发性肺纤维化(IPF)大鼠Wnt3a/β-连环蛋白(β-catenin)途径介导的细胞衰老的作用特点,揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法:32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博来霉素(0.005 g·kg^(-1))复制IPF大鼠模型。术后次日灌胃,升陷汤组灌胃升陷汤配方颗粒水溶液(0.78 g·kg^(-1)),吡非尼酮组灌胃吡非尼酮混悬液(0.05 g·kg^(-1)),其余各组灌胃去离子水(10 mL·kg^(-1)),连续28 d。测定大鼠肺功能后取肺组织:苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察大鼠肺组织病理形态学变化,并行Szapiel和Ashcroft评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测端粒长度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测上皮-间质转化(EMT)标记物[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]、端粒酶逆转录酶(TERT)、衰老相关蛋白(p53、p21)、衰老相关分泌表型[白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)]和Wnt信号途径关键蛋白[Wnt3a、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Myc]表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠最大呼吸流量(PEF)和每分钟通气量(MV)显著降低(P<0.01),呼吸频率(f)显著升高(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达显著升高(P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著降低(P<0.01)。与模型组比较,升陷汤组大鼠PEF和MV显著升高(P<0.01),f显著降低(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著升高(P<0.01)。结论:升陷汤对IPF大鼠肺功能具有显著地保护作用,其机制可能是作用于Wnt3a/β-catenin信号途径,调节TERT诱导的细胞衰老以抑制EMT实现。
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关键词
升陷汤
端粒
细胞衰老
特发性肺纤维化
wnt3a信号通路
上皮-间质转化
肺功能
原文传递
二苯乙烯苷抑制氧化应激介导骨质疏松的作用及机制研究
2
作者
李松林
杜俊杰
+4 位作者
陈宇飞
徐舜江
王斌
吴迪
张金康
《空军医学杂志》
2022年第2期125-130,共6页
目的研究二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene-2-o-β-d-glycoside,TSG)对氧化应激导致的骨质疏松的保护作用,并初步探讨相关机制。方法不同浓度TSG预处理MC3T3-E124 h,200μM H_(2)O_(2)处理24 h,实验分组:(1)空白对照组;(2)H_(2)O_(2)...
目的研究二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene-2-o-β-d-glycoside,TSG)对氧化应激导致的骨质疏松的保护作用,并初步探讨相关机制。方法不同浓度TSG预处理MC3T3-E124 h,200μM H_(2)O_(2)处理24 h,实验分组:(1)空白对照组;(2)H_(2)O_(2)处理组;(3)H_(2)O_(2)+TSG1μM处理组;(4)H_(2)O_(2)+TSG10μM处理组;(5)H_(2)O_(2)+NAC1mM处理组,通过CCK-8检测细胞活性;RT-PCR检测细胞中TCF及其下游基因(AXIN2、ALP、OPG)、FoxO3a及其下游基因(GADD45、CAT)的mRNA表达;Western blot检测细胞中β-catenin、FoxO3a蛋白表达情况。30只9周龄BALB/c雌性小鼠,随机分为5组:(1)基础组:标记为C;(2)假手术组+溶剂组:标记为J;(3)去卵巢模型组+溶剂组:标记为MC;(4)去卵巢模型组+TSG(40 mg/ml):标记为T;(5)去卵巢模型组+雌激素:标记为E。术后7 d开始给药,共90 d,每天给药40 mg/kg小鼠体质量,取血清用于检测活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平;HE染色用于小鼠骨组织形态学评价;RT-PCR检测骨组织中FoxO3a、TCF及其下游基因的mRNA表达。结果不同浓度TSG预处理后,细胞活性降低现象得到改善;Western-blot结果提示,H_(2)O_(2)作用可以提高FoxO3a蛋白表达,不同浓度TSG预处理后,FoxO3a蛋白表达下降;去卵巢小鼠血清中ROS水平升高(P<0.01);T组可以明显改善血清中ROS水平(P<0.05);HE染色结果提示,去卵巢小鼠骨量减少,骨小梁数量减少,间距增大,给予TSG处理后,骨小梁数量及间距有不同程度改变。RT-PCR结果提示,在细胞层面及小鼠去卵巢OP模型中,氧化应激可上调FoxO3a及其下游基因的mRNA表达,下调TCF及其下游基因的表达(P<0.01),给予不同浓度TSG预处理后,FoxO3a、TCF及其下游基因的表达得到改善(P<0.05)。结论氧化应激可以导致成骨前体细胞MC3T3-E1死亡增加,导致小鼠骨量减少,TSG可以通过调控WNT/FoxO3a信号通路来抑制氧化应激介导骨质疏松的发生。
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关键词
二苯乙烯苷
氧化应激
骨质疏松
wnt
/FoxO
3
a信号
通路
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题名
升陷汤调节Wnt3a/β-catenin信号途径介导的细胞衰老改善特发性肺纤维化大鼠肺功能
1
作者
闫亚男
梁玉磊
王杰鹏
方朝义
机构
河北中医药大学
河北省中西医结合肺病研究重点实验室
出处
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第12期31-38,共8页
基金
河北省自然科学基金项目(H2023423061)
河北中医学院燕赵医学研究项目(YZZQ2022001)。
文摘
目的:观察升陷汤对特发性肺纤维化(IPF)大鼠Wnt3a/β-连环蛋白(β-catenin)途径介导的细胞衰老的作用特点,揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法:32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博来霉素(0.005 g·kg^(-1))复制IPF大鼠模型。术后次日灌胃,升陷汤组灌胃升陷汤配方颗粒水溶液(0.78 g·kg^(-1)),吡非尼酮组灌胃吡非尼酮混悬液(0.05 g·kg^(-1)),其余各组灌胃去离子水(10 mL·kg^(-1)),连续28 d。测定大鼠肺功能后取肺组织:苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察大鼠肺组织病理形态学变化,并行Szapiel和Ashcroft评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测端粒长度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测上皮-间质转化(EMT)标记物[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]、端粒酶逆转录酶(TERT)、衰老相关蛋白(p53、p21)、衰老相关分泌表型[白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)]和Wnt信号途径关键蛋白[Wnt3a、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Myc]表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠最大呼吸流量(PEF)和每分钟通气量(MV)显著降低(P<0.01),呼吸频率(f)显著升高(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达显著升高(P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著降低(P<0.01)。与模型组比较,升陷汤组大鼠PEF和MV显著升高(P<0.01),f显著降低(P<0.01),Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著升高(P<0.01)。结论:升陷汤对IPF大鼠肺功能具有显著地保护作用,其机制可能是作用于Wnt3a/β-catenin信号途径,调节TERT诱导的细胞衰老以抑制EMT实现。
关键词
升陷汤
端粒
细胞衰老
特发性肺纤维化
wnt3a信号通路
上皮-间质转化
肺功能
Keywords
Shengxiantang
telomere
cell senescence
idiopathic pulmonary fibrosis
wingless/integrated(W nt)
3a
signaling pathway
epithelial-mesenchymal transformation
lung function
分类号
R2-0 [医药卫生—中医学]
R33 [医药卫生—人体生理学]
R289 [医药卫生—方剂学]
R563 [医药卫生—呼吸系统]
原文传递
题名
二苯乙烯苷抑制氧化应激介导骨质疏松的作用及机制研究
2
作者
李松林
杜俊杰
陈宇飞
徐舜江
王斌
吴迪
张金康
机构
空军特色医学中心骨科
解放军
出处
《空军医学杂志》
2022年第2期125-130,共6页
基金
全军后勤科研重大项目(AKJ15J001)
国家自然科学基金青年基金项目(81400859)。
文摘
目的研究二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene-2-o-β-d-glycoside,TSG)对氧化应激导致的骨质疏松的保护作用,并初步探讨相关机制。方法不同浓度TSG预处理MC3T3-E124 h,200μM H_(2)O_(2)处理24 h,实验分组:(1)空白对照组;(2)H_(2)O_(2)处理组;(3)H_(2)O_(2)+TSG1μM处理组;(4)H_(2)O_(2)+TSG10μM处理组;(5)H_(2)O_(2)+NAC1mM处理组,通过CCK-8检测细胞活性;RT-PCR检测细胞中TCF及其下游基因(AXIN2、ALP、OPG)、FoxO3a及其下游基因(GADD45、CAT)的mRNA表达;Western blot检测细胞中β-catenin、FoxO3a蛋白表达情况。30只9周龄BALB/c雌性小鼠,随机分为5组:(1)基础组:标记为C;(2)假手术组+溶剂组:标记为J;(3)去卵巢模型组+溶剂组:标记为MC;(4)去卵巢模型组+TSG(40 mg/ml):标记为T;(5)去卵巢模型组+雌激素:标记为E。术后7 d开始给药,共90 d,每天给药40 mg/kg小鼠体质量,取血清用于检测活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平;HE染色用于小鼠骨组织形态学评价;RT-PCR检测骨组织中FoxO3a、TCF及其下游基因的mRNA表达。结果不同浓度TSG预处理后,细胞活性降低现象得到改善;Western-blot结果提示,H_(2)O_(2)作用可以提高FoxO3a蛋白表达,不同浓度TSG预处理后,FoxO3a蛋白表达下降;去卵巢小鼠血清中ROS水平升高(P<0.01);T组可以明显改善血清中ROS水平(P<0.05);HE染色结果提示,去卵巢小鼠骨量减少,骨小梁数量减少,间距增大,给予TSG处理后,骨小梁数量及间距有不同程度改变。RT-PCR结果提示,在细胞层面及小鼠去卵巢OP模型中,氧化应激可上调FoxO3a及其下游基因的mRNA表达,下调TCF及其下游基因的表达(P<0.01),给予不同浓度TSG预处理后,FoxO3a、TCF及其下游基因的表达得到改善(P<0.05)。结论氧化应激可以导致成骨前体细胞MC3T3-E1死亡增加,导致小鼠骨量减少,TSG可以通过调控WNT/FoxO3a信号通路来抑制氧化应激介导骨质疏松的发生。
关键词
二苯乙烯苷
氧化应激
骨质疏松
wnt
/FoxO
3
a信号
通路
Keywords
tetrahydroxy stilbene-2-o-β-d-glucoside
oxidative stress
osteoporosis
wnt
/FoxO
3a
signaling pathway
分类号
R589.5 [医药卫生—内分泌]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
升陷汤调节Wnt3a/β-catenin信号途径介导的细胞衰老改善特发性肺纤维化大鼠肺功能
闫亚男
梁玉磊
王杰鹏
方朝义
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
2
二苯乙烯苷抑制氧化应激介导骨质疏松的作用及机制研究
李松林
杜俊杰
陈宇飞
徐舜江
王斌
吴迪
张金康
《空军医学杂志》
2022
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