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lncRNA FER1L4调控Wnt/β-catenin信号通路对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 郭春芝 卢玉梅 +1 位作者 郝丽 王睿 《中国现代普通外科进展》 CAS 2024年第3期182-185,共4页
目的:探讨lncRNA FER1L4调控Wnt/β-catenin信号通路对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:检测人甲状腺滤泡上皮正常细胞和甲状腺癌细胞中FER1L4的表达水平。将SW579细胞分为control组、si-NC组、si-FER1L4组、LiCl+si-FER1L4组;... 目的:探讨lncRNA FER1L4调控Wnt/β-catenin信号通路对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:检测人甲状腺滤泡上皮正常细胞和甲状腺癌细胞中FER1L4的表达水平。将SW579细胞分为control组、si-NC组、si-FER1L4组、LiCl+si-FER1L4组;检测各转染组细胞FER1L4的表达水平,细胞增殖,细胞凋亡率,细胞迁移和侵袭;检测细胞Cleaved caspase3、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平。结果:SW579细胞中FER1L4表达水平最显著;干扰FER1L4后,其细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率和Cleaved caspase3表达显著升高(P<0.05);与si-FER1L4组相比,LiCl+si-FER1L4组细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达显著升高,细胞凋亡率和Cleaved caspase3表达显著降低(P<0.05)。结论:干扰FER1L4的表达可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制甲状腺癌恶性发展。 展开更多
关键词 lncRNA FER1L4 wnt/β-cate nin信号通路 甲状腺肿瘤
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桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠Wnt4/β-catenin信号通路中p-GSK-3β的影响
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作者 朱为坤 张喜奎 +3 位作者 林雅银 陈全文 林艳蓝 李灵辉 《光明中医》 2023年第17期3352-3355,共4页
目的探讨慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化(RIF)过程中,桃核承气汤对Wnt4/β-catenin信号通路p-GSK-3β的影响。方法100只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、治疗组,各25只,模型组和治疗组行5/6肾切除术,假手术组仅做双肾... 目的探讨慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化(RIF)过程中,桃核承气汤对Wnt4/β-catenin信号通路p-GSK-3β的影响。方法100只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、治疗组,各25只,模型组和治疗组行5/6肾切除术,假手术组仅做双肾被膜剥离术,正常组不做处理。造模成功后,治疗组予桃核承气汤灌胃,其余3组予等量生理盐水灌胃,给药时间共为8周。Western Blot法检测肾组织中Wnt4/β-catenin信号通路的相关蛋白含量,光镜观察肾组织。结果Wnt4、p-GSK-3β、β-catenin蛋白含量,治疗组比模型组显著降低(P<0.05);光镜观察,模型组的肾小球结构固缩,肾间质纤维增生严重,治疗组明显减轻。结论桃核承气汤对CRF的作用机制,可能与降低Wnt4、p-GSK-3β、β-catenin蛋白含量从而调节Wnt4/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 慢性肾衰竭 桃核承气汤 wnt4/β-catenin信号通路
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转录因子TEAD4调控WNK1表达介导Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌增殖和迁移 被引量:1
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作者 钱治宇 辛向红 +2 位作者 杨曦晨 孙立辉 李良 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2720-2726,共7页
目的探究转录因子TEA结构域转录因子(TEAD)4通过调控赖氨酸缺乏激酶(WNK)1表达介导Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路促进结肠癌的增殖和迁移。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TEAD4在正常人结肠上皮细胞NCM-460和人结... 目的探究转录因子TEA结构域转录因子(TEAD)4通过调控赖氨酸缺乏激酶(WNK)1表达介导Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路促进结肠癌的增殖和迁移。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TEAD4在正常人结肠上皮细胞NCM-460和人结肠癌细胞系SW620、SW480、LOVO、HCT 116中的表达情况。构建低表达TEAD4和WNK1的SW620和LOVO细胞,并通过平板克隆实验和细胞划痕实验评估TEAD4和WNK1对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响。通过生物分析找到TEAD4与WNK1启动子之间的结合位点序列,运用染色质免疫沉淀技术(ChIP)-qPCR验证TEAD4与WNK1启动子的结合情况。在沉默TEAD4的细胞中进一步过表达WNK1检测细胞增殖、迁移和Wnt/β-catenin信号通路的变化。结果TEAD4在结肠癌细胞中显著高表达(P<0.05)。敲低TEAD4显著抑制结肠癌细胞的增殖和迁移(P<0.01)。沉默TEAD4能显著抑制WNK1的表达(P<0.01)。通过抑制Wnt/β-catenin信号通路显著减弱结肠癌细胞的增殖和迁移(P<0.01)。在沉默TEAD4的细胞中进一步过表达WNK1,部分回调细胞的增殖、迁移能力,显著激活Wnt/β-catenin信号通路(P<0.05)。结论转录因子TEAD4促进WNK1表达,激活Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌的增殖和迁移。 展开更多
关键词 结肠癌 TEA结构域转录因子(TEAD)4 赖氨酸缺乏激酶(WNK)1 wnt/Β-catenin信号通路 增殖 迁移
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过表达KLF4通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞EMT和细胞周期的实验研究
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作者 符悦 李春鸣 +3 位作者 梁娜 罗庆庆 吴丝 周航皓 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第6期991-996,共6页
目的:探讨过表达KLF4通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞上皮-间质转化和细胞周期的作用机制。方法:将课题组前期已成功转染过表达KLF4的BGC-823细胞分为KLF4过表达载体组(BGC823-OE组)、空病毒载体组(BGC823-NC组)和未经处理的BGC... 目的:探讨过表达KLF4通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞上皮-间质转化和细胞周期的作用机制。方法:将课题组前期已成功转染过表达KLF4的BGC-823细胞分为KLF4过表达载体组(BGC823-OE组)、空病毒载体组(BGC823-NC组)和未经处理的BGC-823细胞组(BGC823-Ctrl组)。Western blot和qRT-PCR检测KLF4、EMT和Wnt信号通路相关蛋白和mRNA在三组细胞中的表达水平。CCK-8实验、划痕实验、Transwell迁移实验、平板克隆实验和流式细胞术观察各组细胞的增殖能力、迁移能力、克隆形成能力和细胞周期变化情况。结果:Western blot和qRT-PCR实验结果显示BGC823-OE组KLF4蛋白和mRNA表达水平明显升高。上皮-间质转化的上皮标志物E-cadherin蛋白和mRNA表达水平升高,间质标志物N-cadherin蛋白和mRNA表达水平降低。Wnt信号通路下游靶基因β-catenin和Cyclin D1的蛋白和mRNA表达水平降低。CCK-8增殖实验结果显示BGC823-OE组的增殖能力下降。划痕实验和Transwell迁移实验结果显示BGC823-OE组的迁移能力下降。平板克隆结果显示BGC823-OE组的克隆能力下降。流式细胞术结果显示BGC823-OE组G_(0)/G_(1)期比例增高,S期比例降低。结论:过表达KLF4可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞EMT及阻滞胃癌细胞的细胞周期。 展开更多
关键词 胃癌 KLF4 上皮-间质转化 wnt/Β-catenin信号通路
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Wnt/β-catenin信号通路在白藜芦醇抗急性T淋巴细胞白血病中的作用机制研究 被引量:2
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作者 史敏 李伊瑶 +4 位作者 亢培颖 王少华 王文静 张媛媛 李永军 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第1期50-57,共8页
目的:通过细胞水平和动物模型探讨Wnt/β-catenin信号通路在白藜芦醇体内外抗急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)中的作用及其可能机制。方法:细胞实验(人淋巴细胞白血病Molt-4和Jurkat细胞)分为空白对照... 目的:通过细胞水平和动物模型探讨Wnt/β-catenin信号通路在白藜芦醇体内外抗急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)中的作用及其可能机制。方法:细胞实验(人淋巴细胞白血病Molt-4和Jurkat细胞)分为空白对照组(Control组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和白藜芦醇处理组(Res组),动物实验分为正常对照组(Control组)、T-ALL模型组(T-ALL组)和白藜芦醇处理组(Res组)。采用CCK-8法检测白藜芦醇对Molt-4和Jurkat细胞增殖能力的影响,选取适合的给药浓度进行后续实验;尾静脉注射ICN1-GFP^(+)T-ALL细胞建立T-ALL小鼠模型;采用流式细胞术检测小鼠外周血中ICN1-GFP^(+)T-ALL细胞百分比,监测T-ALL小鼠造模后的一般情况;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测细胞和小鼠脾脏组织中c-Myc和Cyclin D1 mRNA的表达水平;应用蛋白免疫印迹法(Western Blot法)分别检测细胞和小鼠脾脏组织中β-catenin、TCF-1、LEF-1、c-Myc和Cyclin D1的蛋白表达水平。结果:白藜芦醇明显抑制Molt-4和Jurkat细胞增殖能力(P<0.01),抑制作用随白藜芦醇浓度增加逐渐增强(P<0.01);经白藜芦醇处理后,Molt-4和Jurkat细胞中c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),β-catenin、TCF-1、LEF-1及其靶蛋白c-Myc和Cyclin D1表达水平均显著降低(P<0.05);T-ALL小鼠脾脏组织中c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达水平显著增高(P<0.01),β-catenin、TCF-1、LEF-1及靶蛋白c-Myc和Cyclin D1表达水平显著升高(P<0.01);经白藜芦醇处理后,小鼠外周血中GFP^(+)白血病细胞比例明显下降(P<0.01),c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),各蛋白表达水平明显下调(P<0.01)。结论:在T-ALL细胞株和动物模型中,白藜芦醇可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、TCF-1和LEF-1的表达进而抑制靶蛋白c-Myc和Cyclin D1水平,发挥抗急性T淋巴细胞白血病作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 急性T淋巴细胞白血病 MOLT-4细胞 JURKAT细胞 T-ALL小鼠模型 wnt/Β-catenin信号通路
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Wnt/β-catenin通路调控铁死亡在肝癌中的研究进展
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作者 陈锦浩 曹智 +1 位作者 陈家诚 郑进方 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第14期1104-1110,共7页
铁死亡被认为是一种铁依赖性、非凋亡形式的调节性细胞死亡,主要由活性氧产生和铁稳态失衡导致严重脂质过氧化而引发的,它可诱导相关因子可通过不同途径直接或间接影响谷胱甘肽过氧化物酶,导致抗氧化能力下降和细胞中脂质活性氧积累,最... 铁死亡被认为是一种铁依赖性、非凋亡形式的调节性细胞死亡,主要由活性氧产生和铁稳态失衡导致严重脂质过氧化而引发的,它可诱导相关因子可通过不同途径直接或间接影响谷胱甘肽过氧化物酶,导致抗氧化能力下降和细胞中脂质活性氧积累,最终导致氧化细胞死亡。同时,铁死亡受到了多种途径调控,如铁代谢、线粒体活性、氧化还原稳态以及与疾病相关信号通路等。据研究报道,铁死亡代谢途径失调可影响肝癌的发生、发展。目前铁死亡导致疾病的分子机制知之甚少,但铁死亡相关基因和通路与肝癌进展有关。研究发现,Wnt/βcatenin信号通路异常激活与肝癌的复发、侵袭、转移以及免疫逃逸有关,且与铁死亡之间存在密切的联系。该通路可通过调控铁死亡的发生从而进一步加重肝癌的恶化。目前该领域在肝癌中已取得一定的实质性进展。因此,在本综述中通过概述铁死亡的分子机制及其在肝癌中的作用,探讨其影响肝癌进展的过程,同时,具体分析Wnt/βcatenin信号通路调控铁死亡的发生过程,为未来肝癌的治疗提供可靠的科学理论依据。 展开更多
关键词 wnt/βcatenin信号通路 铁死亡 肝癌 侵袭 转移 免疫逃逸
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芹菜素对U937细胞增殖凋亡及SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量:4
7
作者 刘江华 戴碧涛 +2 位作者 张妮 梁绍燕 于洁 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1341-1346,共6页
目的探讨芹菜素对人U937细胞株增殖和凋亡,以及对该细胞株SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因c-Myc和CCND1表达的影响。方法以不同浓度芹菜素处理对数生长期的U937细胞,倒置显微镜观察细胞形态;CCK-8法检测细胞的增殖活力;流... 目的探讨芹菜素对人U937细胞株增殖和凋亡,以及对该细胞株SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因c-Myc和CCND1表达的影响。方法以不同浓度芹菜素处理对数生长期的U937细胞,倒置显微镜观察细胞形态;CCK-8法检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;实时荧光定量PCR检测SALL4、c-Myc、和CCND1 mRNA表达水平;Western blot检测SALL4、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组相比,芹菜素处理组细胞碎片增多;细胞增殖受抑制,呈时间和剂量依赖性(P<0.05);G2/M期细胞比例增加(P<0.05);凋亡率增加(P<0.05)。芹菜素处理36 h后,U937细胞的SALL4、c-Myc、和CCND1 mRNA表达下调,SALL4和Bcl-2蛋白表达降低,Caspase-3蛋白表达增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素对U937细胞有抑制增殖诱导凋亡的作用,其机制可能与下调SALL4和Bcl-2,活化Caspase-3,阻断Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 芹菜素 U937细胞 增殖 凋亡 SALL4基因 wnt/Β-catenin信号通路
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塞来昔布通过Wnt/β-catenin信号通路对人结肠癌细胞SW480的影响 被引量:5
8
作者 杨春勇 金若天 梁庆模 《中国医药导报》 CAS 2016年第21期54-57,共4页
目的观察非甾体类抗炎药塞来昔布对体外培养的人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,并研究其与Wnt/β-catenin信号通路的关系,探讨塞来昔布抑制结肠肿瘤生长的分子机制。方法应用MTT法测定不同浓度塞来昔布(0、20、40、60、80、100μmol... 目的观察非甾体类抗炎药塞来昔布对体外培养的人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,并研究其与Wnt/β-catenin信号通路的关系,探讨塞来昔布抑制结肠肿瘤生长的分子机制。方法应用MTT法测定不同浓度塞来昔布(0、20、40、60、80、100μmol/L)对SW480细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析不同浓度塞来昔布(0、20、40、80μmol/L)处理48 h后对SW480细胞凋亡的影响;应用Western blot法分析不同浓度塞来昔布(0、20、40、80μmol/L)处理48 h后SW480细胞中β-catenin蛋白和磷酸化的β-catenin蛋白的表达水平。结果 MTT结果显示,塞来昔布对结肠癌细胞的增殖抑制有浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05);流式细胞术分析显示,随着塞来昔布浓度的增加,结肠癌细胞的凋亡率明显增加(P<0.05);Western blot法检测结果显示,随着塞来昔布浓度的增加,β-catenin蛋白表达显著下降(P<0.05),而磷酸化的β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论塞来昔布可以抑制结肠癌SW480细胞的Wnt/β-catenin信号通路,这可能是其抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的重要机制。 展开更多
关键词 塞来昔布 结肠癌 wnt信号通路 β—catenin
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过表达FOXO4调控Wnt/β-catenin信号通路促进喉癌细胞凋亡的研究 被引量:7
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作者 陈旭东 唐世雄 张建华 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2017年第11期569-574,共6页
目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组... 目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 细胞凋亡 细胞增殖 头框转录因子O家族4 wnt Β-catenin信号通路
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熊果酸通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用 被引量:12
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作者 李洁 孙雅楠 +1 位作者 解光越 李斯 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1810-1814,共5页
目的探讨熊果酸(XGS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及熊果酸组(XGS),每组10只;其中XGS组大鼠接受熊果酸(100 mg/kg)治疗12周;待... 目的探讨熊果酸(XGS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及熊果酸组(XGS),每组10只;其中XGS组大鼠接受熊果酸(100 mg/kg)治疗12周;待治疗检测股骨骨量、骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC)、骨代谢指标以及BMP-2、Smad4、Wnt 1和β-catenin表达。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和双能X线结果显示XGS组的大鼠骨小梁微观参数、骨密度和骨矿物质含量得到明显改善。XGS组大鼠BMD、BMC、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P<0.05)。血清检测结果和生物力学检测结果显示XGS组的最大载荷和弹性模量均高于OVX组(P<0.05);XGS组大鼠血清ALP、OPD和OCN水平较OVX组明显降低,组间差异有统计学意义(P<0.05)。WB检测显示,和OVX组比较,XGS组BMP-2、Smad4、Wnt1和β-catenin表达水平明显上调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论熊果酸可以通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失保护作用。 展开更多
关键词 熊果酸 绝经后骨质疏松症 骨代谢指标 骨密度 BMP-2/Smad4/wnt/β-catenin信号通路
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Toll样受体4激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖 被引量:2
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作者 陈文明 龙仙萍 +1 位作者 赵然尊 石蓓 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期666-668,共3页
目的探讨Toll样受体(TLR)4激活后调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其相关机制。方法体外培养BMSCs,应用流式细胞术鉴定BMSCs,用脂多糖(LPS)剌激BMSCs,应用CCK-8法检测BMSCs的增殖能力;采用Western印迹检... 目的探讨Toll样受体(TLR)4激活后调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其相关机制。方法体外培养BMSCs,应用流式细胞术鉴定BMSCs,用脂多糖(LPS)剌激BMSCs,应用CCK-8法检测BMSCs的增殖能力;采用Western印迹检测大鼠BMSCs中TLR4蛋白表达;实验分为对照组、LPS组、TLR4阻断剂+LPS组、Wnt通路经典抑制剂(DKK-1)+LPS组。应用实时荧光定量PCR法检测BMSCs中β-catenin、c-myc及细胞周期蛋白(cyclin)D1 mRNA表达,应用Western印迹检测蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组BMSCs的细胞增殖能力明显增强,TLR4呈高表达(均P<0.01);LPS组β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,加入TLR4阻断剂后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著下调(P<0.05,P<0.01),加入DDK-1后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著降低(均P<0.01)。结论 TLR4促进BMSCs的增殖,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 TOLL样受体4 增殖 wnt/Β-catenin信号通路
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HOXA4调控Wnt/β-catenin信号通路对裸鼠移植胶质瘤的抑制作用 被引量:2
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作者 周海霞 侯力键 +3 位作者 王正明 田宇 韩亮 李密馥 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期474-478,I0001,共6页
目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体... 目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体阴性对照U251细胞系(si-NC)。取对数生长期U251、si-NC和si-HOXA4细胞接种于BALB/c裸鼠颈背部皮下,建立荷瘤裸鼠模型,命名为对照组、si-NC组和si-HOXA4组。观察各组裸鼠成瘤情况并绘制肿瘤生长曲线;培养21d处死裸鼠后剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积和质量;qRT-PCR法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、CTNNB1和Gsk3βmRNA相对表达量;免疫组织化学(IHC)法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、β-catenin、Gsk3β、CyclinD1和P53蛋白表达水平。结果:si-HOXA4组裸鼠肿瘤体积和质量小于si-NC组和对照组(P<0.05);si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中HOXA4mRNA相对表达量和HOXA4蛋白表达水平低于其他2组(P<0.05);与si-NC组和对照组比较,si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中CTNNB1mRNA相对表达量降低(P<0.05),β-catenin和CyclinD1蛋白表达水平亦降低(P<0.05),但Gsk3β和P53蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:抑制人胶质瘤U251细胞HOXA4表达可在体内通过Wnt/β-catenin信号通路调控CyclinD1和P53蛋白的表达,从而抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长。 展开更多
关键词 胶质瘤 同源异型盒基因A4 wnt/Β-catenin 信号通路 裸鼠 细胞周期蛋白D1 P53蛋白
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肿瘤免疫中Wnt/β-catenin信号通路的研究进展
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作者 张欢欢 张蕾 +2 位作者 崔洁 梁尹攀 伊淑莹 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2023年第9期716-720,共5页
Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的通路,可以起到调节细胞的增殖、分化、凋亡,干细胞的自我更新,组织稳态和创伤愈合的作用。几乎所有肿瘤的发生发展均与Wnt通路的失调有关。Wnt/β-catenin信号转导的异常激活,可以通过对免疫细... Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的通路,可以起到调节细胞的增殖、分化、凋亡,干细胞的自我更新,组织稳态和创伤愈合的作用。几乎所有肿瘤的发生发展均与Wnt通路的失调有关。Wnt/β-catenin信号转导的异常激活,可以通过对免疫细胞的直接或间接作用,促进免疫排斥,进而阻碍T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。本文对Wnt/β-catenin信号影响肿瘤进展和免疫监视的过程,以及靶向该信号通路治疗癌症的策略作一综述。 展开更多
关键词 wnt/β‐catenin信号通路 肿瘤免疫 靶向治疗
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DNA损伤诱导转录因子4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HT-22细胞增殖并促进其凋亡 被引量:5
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作者 王宇飞 孙雨晴 +7 位作者 张凯丽 宋美燕 李佳琪 张娟 王磊 吴雪梅 赵虹 刘志贞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期927-936,共10页
神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种由细胞增殖凋亡紊乱引起的先天缺陷性疾病。本室前期利用RNA-Seq技术,发现小鼠神经管畸形胚胎脑组织中DNA损伤诱导转录因子-4(DNA damage-inducible transcript 4,Ddit4)表达水平增加,但其... 神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种由细胞增殖凋亡紊乱引起的先天缺陷性疾病。本室前期利用RNA-Seq技术,发现小鼠神经管畸形胚胎脑组织中DNA损伤诱导转录因子-4(DNA damage-inducible transcript 4,Ddit4)表达水平增加,但其在神经管畸形中的作用尚不清楚。本文拟探索Ddit4过表达对海马神经元HT-22细胞增殖和凋亡的影响及相关机制,从而为后续研究Ddit4在小鼠神经管畸形中的作用奠定基础。本研究首先根据小鼠Ddit4序列构建真核表达载体pEX-3-Ddit4,限制性酶切分析和测序结果表明pEX-3-Ddit4构建成功。qRT-PCR和Western印迹检测显示转染pEX-3-Ddit4后,HT-22细胞中DDIT4的表达水平明显增加(P<0.01)。CCK-8和Western印迹结果显示,Ddit4过表达导致HT-22细胞增殖下降(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,转染pEX-3-Ddit4后,G0/G1期细胞比例增加、S期比例下降(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western印迹检测发现,转染pEX-3-Ddit4能够显著上调切割胱天蛋白酶3(cleaved caspase3)水平(P<0.05),表明Ddit4过表达促进HT-22细胞凋亡。细胞免疫荧光及Western印迹结果显示,过表达Ddit4显著降低细胞β-联蛋白(β-catenin)、T细胞因子4、细胞周期蛋白D1和C-myc的表达水平(P<0.05),核内β-联蛋白减少,提示Ddit4过表达抑制了Wnt/β-catenin信号通路。过表达Ddit4的同时加入Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl处理细胞可逆转上述现象,表明Ddit4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路对HT-22细胞发挥抗增殖和促凋亡作用。 展开更多
关键词 DNA损伤诱导转录因子-4 真核表达载体 HT-22细胞 wnt/Β-catenin信号通路
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ITGB4BP对Wnt/β-catenin信号通路活性的下调作用 被引量:3
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作者 赖庆梧 彭旭 +5 位作者 谭江琳 张小容 胡小红 张毅 罗高兴 吴军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期1945-1948,共4页
目的探讨β4整合素结合蛋白ITGB4BP对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将对照组空载体pCMV-3B质粒和实验组pCMV-ITGB4BP质粒分别转染至HEK293细胞中,用Western blot和激光共聚焦技术检测细胞中β-catenin含量的变化,用含TCF/LEF启动... 目的探讨β4整合素结合蛋白ITGB4BP对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将对照组空载体pCMV-3B质粒和实验组pCMV-ITGB4BP质粒分别转染至HEK293细胞中,用Western blot和激光共聚焦技术检测细胞中β-catenin含量的变化,用含TCF/LEF启动子的荧光素酶TOPFlash质粒和内参pRL-TK质粒共转染对照组和实验组的HEK293细胞,用荧光素酶活性分析法检测ITGB4BP转染后HEK293细胞TCF/LEF活性的变化。设不转染质粒组为正常组,对照组和实验组均分别设未加LiCl组和加LiCl组。结果 Western blot检测结果:与正常组或对照组比较,实验组细胞β-catenin表达显著减少(P<0.05)。加LiCl之后,β-catenin的表达显著增强(P<0.05),与未加有LiCl的正常组或对照组比较,加LiCl的实验组细胞内β-catenin仍有较高的表达,但差异无显著性。激光共聚焦技术观察:实验组β-catenin(绿色荧光)表达较对照组降低。加LiCl之后,β-catenin(绿色荧光)表达增强,与未加LiCl的对照组相比,加LiCl的实验组仍有较强的荧光强度。荧光素酶活性分析法检测:实验组的荧光素酶活性较对照组显著降低(P<0.05)。LiCl作用之后,Wnt/β-catenin信号通路活性明显增强(P<0.05),与未加LiCl的对照组相比,加LiCl的实验组仍有较强的荧光素酶活性(P<0.05)。结论ITGB4BP可以下调Wnt/β-catenin信号通路的活性。 展开更多
关键词 β4整合素结合蛋白 wnt/Β-catenin信号通路 氯化锂
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加味六味地黄汤对UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路介导调控FGF-23的影响 被引量:9
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作者 黄仁发 梁群卿 +5 位作者 邓鸣 刘学耀 杨义龙 黄家晟 陈鹏辉 吴金玉 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第4期285-289,共5页
目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达的影响。方法:健康成年SD大鼠120只,随机分为4组:假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组,各组组内分为1周、2周、4周3个时间点。假手术组和模型组... 目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达的影响。方法:健康成年SD大鼠120只,随机分为4组:假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组,各组组内分为1周、2周、4周3个时间点。假手术组和模型组予以生理盐水(2 ml/只/d)灌胃;中药组予以加味六味地黄汤组灌胃(2 ml/d);缬沙坦组在造模后给予缬沙坦(30 mg·kg^-1·d^-1)灌胃。HE染色和Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化和Western blot观察大鼠肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达。结果:假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现肾间质纤维化,中药组和缬沙坦组大鼠小管间质病变减轻。与假手术组相同时间点相比较,大鼠模型组肾功能(BUN、Scr)、小管间质半定量评分、Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组大鼠相同时间点相比较,加味六味地黄汤和缬沙坦均能改善肾脏病理,显著降低BUN和Scr水平、小管间质半定量评分,下调肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路活化,并可能介导了FGF-23的转录,而加味六味地黄汤可能通过阻断Wnt4/β-catenin信号通路的活化,下调FGF-23的表达,发挥抗肾间质纤维化作用。 展开更多
关键词 单侧输尿管梗阻 肾间质纤维化 加味六味地黄汤 wnt4/β-catenin信号通路 纤维生长因子23
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4-1BBL通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进人胃癌细胞的增殖和迁移 被引量:2
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作者 李小梅 韩婧 邢晓芳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期55-65,共11页
4-1BB和4-1BB配体(4-1BBL),又被称为CD137和CD137配体,分别属于肿瘤坏死因子(TNF)受体和配体家族的成员。4-1BBL与4-1BB相互作用可以激活T细胞免疫应答。因此,4-1BBL一直在抗肿瘤免疫应答中发挥经典的免疫共刺激分子作用。近期研究发现,... 4-1BB和4-1BB配体(4-1BBL),又被称为CD137和CD137配体,分别属于肿瘤坏死因子(TNF)受体和配体家族的成员。4-1BBL与4-1BB相互作用可以激活T细胞免疫应答。因此,4-1BBL一直在抗肿瘤免疫应答中发挥经典的免疫共刺激分子作用。近期研究发现,4-1BBL在肿瘤细胞中另有其他的生物学功能,但4-1BBL在胃癌进展过程中的功能尚不明确。本文探讨了4-1BBL在人胃癌细胞中的生物学功能和分子作用机制。首先,通过检索TCGA和Kaplan Meier plotter数据库发现,4-1BBL在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.001),且4-1BBL的高表达与胃癌的不良预后正相关(P<0.05)。细胞生物学的结果显示,敲除4-1BBL明显抑制胃癌细胞的增殖(P<0.05)、侵袭和迁移(P<0.05),促进胃癌细胞的凋亡(P<0.05);另外,蛋白质免疫印迹结果表明,敲除4-1BBL可使β-联蛋白、c-Myc和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白质表达水平下降,抑制Wnt/β-catenin信号通路。相反,过表达4-1BBL则显著促进胃癌细胞增殖(P<0.05)、侵袭和迁移(P<0.05),减少胃癌细胞的凋亡(P<0.05);且过表达4-1BBL促进β-联蛋白(β-catenin)、c-Myc和细胞周期蛋白D1的蛋白质表达,激活Wnt/β-catenin信号通路。综上所述,4-1BBL可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进人胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 4-1BB配体 胃癌 增殖 迁移 wnt/Β-catenin信号通路
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Wnt/β-catenin信号通路参与化疗药物诱导的转基因斑马鱼abcb4基因的表达和耐药 被引量:2
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作者 陈露 向文碧 +4 位作者 莫晶 孙琮杰 周艳华 吴西军 何志旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期134-139,共6页
目的探讨斑马鱼耐药基因ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)与Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法取野生型斑马鱼和转基因斑马鱼均设置空白对照组、阿霉素处理组、长春碱处理组、吉非替尼处理组、阿霉素联合吉非替尼处理组、长春... 目的探讨斑马鱼耐药基因ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)与Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法取野生型斑马鱼和转基因斑马鱼均设置空白对照组、阿霉素处理组、长春碱处理组、吉非替尼处理组、阿霉素联合吉非替尼处理组、长春碱联合吉非替尼处理组。每组100枚胚胎分别进行药物处理至第5天,每组取第5天斑马鱼幼鱼50枚进行实验。采用罗丹明123实验检测野生型斑马鱼耐药程度,酶标仪检测转基因的斑马鱼荧光强度,活细胞工作站检测荧光分布位置。Western blot法检测转基因的斑马鱼β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、 ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的蛋白水平。结果罗丹明123实验证实经阿霉素和长春碱药物暴露后的斑马鱼体内产生耐药, EGFP荧光强度检测结果表明经阿霉素和长春碱药物暴露后的转基因斑马鱼荧光强度高,经阿霉素和长春碱药物暴露后的转基因斑马鱼体内β-catenin的累积升高伴随着EGFP和ABCB4蛋白的增加。结论斑马鱼体内Wnt/β-catenin信号通路参与斑马鱼abcb4基因的激活与耐药。 展开更多
关键词 斑马鱼 wnt/Β-catenin信号通路 ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4) 耐药
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microRNA-145在宫颈癌中的表达及其对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用 被引量:7
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作者 王香青 马振军 +1 位作者 包洪云 孔方方 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期117-121,共5页
目的:探讨microRNA-145在宫颈癌中表达的临床意义及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:收集2002年1月至2004年12月解放军464医院62例宫颈癌患者的组织标本,采用实时荧光定量PCR方法检测microRNA-145表达并将其分为高表达组和... 目的:探讨microRNA-145在宫颈癌中表达的临床意义及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:收集2002年1月至2004年12月解放军464医院62例宫颈癌患者的组织标本,采用实时荧光定量PCR方法检测microRNA-145表达并将其分为高表达组和低表达组,分析其与临床病理参数的关系。将microRNA-145表达质粒和无义对照质粒分别转染入宫颈癌HeLa中,分为过表达microRNA-145组和对照组,采用细胞免疫荧光染色法分析细胞中β-catenin表达定位的变化,双荧光素酶报告系统检测细胞中TCF/LEF转录活性及与Cateninδ-1的直接作用,采用Western blot法检测microRNA-145对Cateninδ-1、C-MYC和CyclinD1表达的影响。结果:microRNA-145低表达组患者的总生存期为(41.28±2.00)个月,高表达组为(46.06±0.95)个月,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05),低表达组患者预后较差。过表达microRNA-145组HeLa细胞中的β-catenin主要分布于胞浆,对照组主要位于细胞核和胞浆;过表达microRNA-145组细胞中TCF/LEF转录活性受到抑制,伴随着Cateninδ-1、C-MYC和CyclinD1表达下调,microRNA-145与Cateninδ-1可直接结合发挥作用。结论:microRNA-145可通过与Cateninδ-1直接作用,抑制Wnt/β-catenin信号通路转导,从而发挥抑制宫颈癌演进的生物学功能。 展开更多
关键词 microRNA-145 宫颈癌 wnt/Β-catenin信号通路 Β-catenin TCF/LEF cateninδ-1
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ELF4通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞的增殖和侵袭 被引量:4
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作者 刘伟 朱季军 +4 位作者 王艳 刘云云 王玉欣 王晓松 王晓燕 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期33-37,共5页
目的研究E74样受体4(ELF4)对胃癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其可能的分子机制。方法运用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测人正常胃黏膜上皮细胞GES-1以及胃癌细胞NCI-N87、BGC823、AGS及MKN45中ELF4、β-连环蛋白(β-catenin)、细... 目的研究E74样受体4(ELF4)对胃癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其可能的分子机制。方法运用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测人正常胃黏膜上皮细胞GES-1以及胃癌细胞NCI-N87、BGC823、AGS及MKN45中ELF4、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达水平。采用脂质体转染法将shELF4及shNC质粒转染人胃癌细胞(MKN45细胞),运用Wnt通路的激动剂氯化锂(LiCl)处理ELF4表达敲降的胃癌MKN45细胞。CCK-8及Transwell实验检测敲降ELF4对实验组细胞增殖及侵袭的影响。结果与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中ELF4 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高。敲降ELF4后,MKN45细胞中ELF4表达明显降低,与对照组相比细胞增殖和侵袭能力显著抑制,且抑制作用在加入LiCl后被抵消。在shELF4组中,β-catenin、Cyclin D1、MMP7 mRNA及蛋白表达水平较shNC组显著降低,而在加入LiCl后其表达被逆转。结论ELF4可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路,促进人胃癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胃肿瘤 ELF4 wnt信号通路 增殖 侵袭
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