猪miR-192靶向调控Wnt7a基因表达的研究

【目的】鉴定猪miR-192与Wnt家族成员7A(Wnt7a)基因之间的靶向关系,为进一步构建miR-192介导的胚胎通讯提供依据。【方法】使用miRNA pull-down鉴定miR-192和Wnt7a基因间的互作关系;利用生物信息学软件RNAhybrid 2.2预测miR-192和Wnt7a基因3′-UTR的结合位点,构建含有miR-192结合位点的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型基因片段,克隆至双荧光素酶报告基因质粒,通过NotⅠ、XhoⅠ酶切和测序进行鉴定;鉴定成功的质粒分别与miR-192 mimics和mimics NC共转染猪子宫内膜上皮细胞,检测双荧光素酶活性;将miR-192 mimics、mimics NC、miR-192 inhibitor、inhibitor NC分别与构建的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒共转染至猪子宫内膜上皮细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测Wnt7a基因mRNA和蛋白的表达水平。【结果】pull-down结果显示,miR-192 mimics组与其阴性对照组相比,Wnt7a基因相对表达量极显著升高(P<0.01),miR-192 input组相对于其阴性对照组极显著降低(P<0.01);RNAhybrid 2.2软件预测到miR-192种子区与Wnt7a基因3′-UTR存在结合位点(UGACCUA);转染Wnt7a野生型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组相比双荧光素酶活性显著降低(P<0.05),转染Wnt7a突变型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组之间双荧光素酶活性无显著差异(P>0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,miR-192 mimics组Wnt7a基因mRNA相对表达量显著低于其阴性对照组(P<0.05),miR-192 inhibitor组显著高于其阴性对照组(P<0.05)。Western blotting结果表明,过表达miR-192极显著抑制了Wnt7a蛋白的表达(P<0.01),抑制miR-192后Wnt7a蛋白的表达量极显著上升(P<0.01)。【结论】miR-192能够与Wnt7a基因3′-UTR发生靶向作用并抑制其表达。研究结果可为今后深入研究miR-192在妊娠着床过程中的调控机制提供理论依据。

敲低Wnt7a抑制卡介苗诱导的小鼠肺泡上皮细胞自噬

目的探究无翅基因7a(Wnt7a)对牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)感染的肺泡上皮细胞自噬水平的调控作用。方法使用干扰Wnt7a慢病毒及BCG单独作用或共处理TC-1小鼠肺泡上皮细胞,设置小干涉RNA对照(si-NC)组、si-NC联合BCG组、Wnt7a小干涉RNA(si-Wnt7a)组和si-Wnt7a联合BCG组。Western blot法检测Wnt7a、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62及自噬相关基因5(ATG5)蛋白表达水平,利用免疫荧光细胞化学染色检测LC3的分布以确定细胞自噬情况。结果与si-NC组相比,BCG感染的TC-1细胞Wnt7a、LC3和ATG5蛋白表达均升高、LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著增加;与BCG组感染的TC-1细胞相比,si-Wnt7a联合BCG组Wnt7a、LC3、P62及ATG5蛋白表达均显著降低,LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著降低。结论敲低Wnt7a抑制BCG诱导的肺泡上皮细胞自噬。

Wnt7a-Akt/mTORa信号通路在肾衰营养胶囊改善慢性肾衰竭大鼠骨骼肌萎缩中的作用

目的探讨Wnt7a-Akt/m TOR信号通路在肾衰营养胶囊改善慢性肾衰竭(CRF)大鼠骨骼肌萎缩中的作用及机制。方法采用切除5/6肾的方法制作CRF模型,予4%酪蛋白饲料喂养制作CRF营养不良大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、中药组和开同组。采用组织病理学检测TA横截面积并计算肌纤维面积分布;采用同位素14+C-苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成;采用Western blot检测Wnt7a-Akt/m TOR信号通路中的蛋白表达。结果肾衰营养胶囊增加了CRF大鼠体质量和骨骼肌质量的作用,形态学表现为TA横截面积增加,促进蛋白质合成增加以及骨骼肌组织Wnt7a-Akt/m TOR信号通路中蛋白表达上调。结论肾衰营养胶囊具有改善CRF模型大鼠骨骼肌萎缩的作用,其机制可能上调骨骼肌Wnt7a-Akt/m TOR信号通路和促进骨骼肌蛋白质合成相关。

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响

目的观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。将50只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷小、中、大剂量组(30 mg/kg、90mg/kg、270 mg/kg)。利用蛋白免疫印迹法检测Wnt7a和APC表达变化。结果造模7 d,模型组大鼠皮层Wnt7a的表达比假手术组显著升高,APC表达显著下降;与模型组相比,莫诺苷大剂量组Wnt7a表达明显升高;莫诺苷小、中、大剂量组APC的表达显著降低。结论莫诺苷可以促进缺血性脑损伤后Wnt7a表达,抑制APC表达,从而激活Wnt信号通路。

Wnt7a基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及向神经元样细胞分化的影响

目的研究Wnt7a基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元样细胞分化的影响。方法构建Wnt7a腺病毒,利用病毒感染MSCs,MTT法检测Wnt7a基因腺病毒感染前后MSCs增殖情况,Western blot检测细胞质和细胞核中β-catenin及CyclinD1表达的变化,比较诱导后向神经元样细胞的分化率。结果与对照组细胞相比,Wnt7a腺病毒感染组细胞增殖能力明显增强(P<0.05);细胞质和细胞核中β-catenin蛋白表达量均明显增加(P<0.05);CyclinD1的蛋白表达量也明显增加(P<0.05);诱导后向神经元样细胞分化率明显提高。结论 Wnt7a蛋白表达上调,可能通过提高β-catenin和CyclinD1表达来促进MSCs细胞增殖,Wnt7a蛋白同时促进MSCs向神经元样细胞的诱导分化。

Pax6和Wnt7a在小鼠角膜中的表达分析

目的观察Pax6和Wnt7a在小鼠角膜中的表达及分布情况,探讨Pax6和Wnt7a在角膜中的关系。方法对小鼠与人、家兔、恒河猿的Pax6和Wnt7a氨基酸序列同源性进行生物信息学分析;石蜡切片法观察小鼠眼球壁的形态结构;免疫组织化学技术和流式细胞术分别检测Pax6和Wnt7a在小鼠角膜中的分布和表达。结果小鼠和人、家兔、恒河猿的Pax6和Wnt7a蛋白氨基酸序列同源性都超过90%,其中小鼠和人的同源性最高。HE染色显示了正常小鼠的眼球壁结构。Pax6的免疫阳性表达在小鼠角膜全层的细胞质和细胞膜上,阳性表达率约为77.84%;Wnt7a的免疫阳性主要表达在小鼠角膜全层的细胞膜上,阳性表达率约为63.51%。结论Pax6和Wnt7a均在小鼠角膜中高表达,可能参与角膜的形成。

肾衰营养胶囊改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路的作用探析

目的分析肾衰营养胶囊改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路的作用。方法选取2018年1月~6月饲养大鼠80只为研究对象,随机摸球法分为正常组、模型组、开同组和中药组。检测Myogenin以及MyoD表达,以及Wnt7a/PCP信号通路内蛋白表达。结果相比于正常组,模型组大鼠湿重、和干重均更低;开同组和中药组治疗后干重、湿重均有显著提升;模型组细胞内Myogenin阳性细胞核数多于正常组;中药组和开同组Myogenin阳性细胞核显著多于模型组,中药组和开同组MyoD光密度值低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾衰营养胶囊可有效改善CRF大鼠骨骼肌萎缩中Wnt7a/PCP信号通路。

Wnt7a抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的探讨Wnt7a在胃癌发生发展中的作用及机制,为胃癌的临床治疗提供潜在靶点。方法实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)及Western blot技术检测胃癌组织中Wnt7a mRNA及蛋白水平的表达变化,通过免疫组织化学法检测癌胃癌组织中Wnt7a的表达和分布情况,以癌旁正常组织作为对照;观察Wnt7a的差异表达与胃癌临床病理参数及预后的关系;Wnt7a过表达质粒转染胃癌细胞系SGC7901,通过MTS实验和EDU实验检测细胞的活性和增殖状态,流式细胞仪检测细胞的凋亡状态,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移状态。结果 qRT-PCR及Western blot结果显示,与癌旁正常组织相比,Wnt7a在m RNA及蛋白水平表达下调,免疫组织化学结果显示Wnt7a阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要分布于细胞胞质,在胃癌组织的阳性率明显低于正常胃组织;与高表达Wnt7a患者相比,Wnt7a低表达患者胃癌的肿瘤体积相对较大,TNM分期较高,淋巴结转移率较高,预后较差;在SGC7901细胞中过表达Wnt7a能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,对细胞的凋亡能力无明显影响。结论在胃癌的发生发展中,Wnt7a发挥了抑癌基因的作用,抑制细胞增殖、侵袭和迁移。

Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌中的表达及意义

目的探讨Wnt7a及其受体Frizzled(Fzd) 5在大肠癌中的表达及关系,揭示大肠癌发生发展的可能机制。方法收集大肠癌标本80例,以癌旁正常组织作为对照。qRT-PCR技术检测Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌及癌旁正常组织中mRNA水平的变化。Western印迹方法检测Wnt7a及其受体Fzd5在蛋白水平的变化,免疫组化检测Wnt7a及其受体Fzd5的表达变化及分布特点,同时观察Wnt7a及其受体Fzd5与大肠癌临床病理参数的关系。结果与癌旁正常组织比较,大肠癌组织中Wnt7a及其受体Fzd5在mRNA及蛋白水平均明显增高(P<0. 05);免疫组化及Western印迹结果显示,Wnt7a及其受体Fzd5均在细胞质表达,且大肠癌组织的表达强度明显高于癌旁正常组织(P<0. 05)。相关性分析表明,Wnt7a与受体Fzd5的表达均与大肠癌的体积、Duke分级及是否伴有淋巴结转移具有明显的相关性(P<0. 05),且Wnt7a与受体Fzd5两者之间呈正相关。结论 Wnt7a可能通过与受体Fzd5的结合激活Wnt信号,参与了大肠癌的发生与发展。

Wnt7a、CyclinD1、β-catenin在结直肠腺癌组织中的表达及意义

目的初步探讨Wnt7a、CyclinD1、β-catenin蛋白在结直肠腺癌发生、发展、浸润及转移过程中的作用,为结直肠腺癌的诊断、治疗及预后提供临床参考指标。方法采用回顾性研究的方法,选取2013年6月至2017年3月于首都医科大学附属北京天坛医院行根治手术切除并经病理科确诊为结直肠腺癌的标本80例作为观察组。对照组选取正常结直肠黏膜组织20例和结直肠腺瘤组织40例。采用免疫组化方法检测Wnt7a、CyclinD1及β-catenin的蛋白表达情况。结果(1)Wnt7a、CyclinD1和β-catenin在正常结直肠黏膜、结直肠腺瘤、结直肠腺癌组织中的阳性率逐渐升高。(2)Wnt7a、β-catenin和CyclinD1与结直肠腺癌分化程度、淋巴结转移情况、Duke分期密切相关,三者可作为评估结直肠腺癌恶性程度、转移情况的参考指标。(3)Wnt7a、β-catenin、CyclinD1三者之间的表达存在相关性,提示三者均对结直肠腺癌的发生、发展具有重要影响。结论Wnt7a、CyclinD1和β-catenin与结直肠腺癌的发生、发展、恶性程度、转移及预后有关。

Wnt7a蛋白在IFN-γ促神经干细胞增殖中的影响

目的研究γ干扰素(IFN-γ)对神经干细胞的增殖和自我更新能力的影响;Wnt7a蛋白在IFN-γ促神经干细胞增殖和增强自我更新能力的机制。方法从胎鼠端脑获取原代神经干细胞进行原代培养,分别添加一定浓度IFN-γ溶液和PBS溶液,分为IFN-γ处理组和PBS对照组,计算神经球体面积,细胞免疫荧光检测神经干细胞Brd U增值能力,蛋白免疫印迹检测神经干细胞IFN-γ信号通路蛋白p STAT1和Wnt7a信号通路蛋白。结果形态学显示IFN-γ增加神经球面积和Brd U+细胞数目,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);蛋白免疫印迹结果显示IFN-γ促进了p STAT1和Wnt7a蛋白增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 IFN-γ增强了神经干细胞的自我更新能力和增殖能力,并且激活了Wnt7a信号通路。

Wnt7a在兔腓肠肌急性钝挫伤后修复过程中的作用

目的探讨大耳兔骨骼肌急性钝挫伤后Wnt7a表达水平的变化与损伤修复的关系。方法选择日本大耳兔40只,随机选取5只作为对照组,其余建立急性钝挫伤模型后分为7组,各组分别在钝挫伤后1d、2d、3d、4d、5d、7d、14d取材。HE染色观察钝挫伤后腓肠肌形态学变化,RT-PCR检测Wnt7a mRNA的表达水平。结果钝挫伤后1d组可观察到肌外膜完整性被破坏,出现大量的红细胞和少量的炎性细胞;钝挫伤后2d、3d组有大量的炎性细胞浸润;钝挫伤后4d组红细胞及炎性细胞减少、巨噬细胞增多、肌纤维坏死;钝挫伤后5d组出现成纤维细胞;钝挫伤后7d组出现部分新生肌细胞以及大量成纤维样细胞,并有结缔组织填充,炎性细胞浸润减轻;钝挫伤后14d组可见肌丝扭曲,肌纤维明显恢复,纤维化增加,损伤部位初步愈合。钝挫伤后自然恢复过程中,与对照组相比,钝挫伤后1d、2d组的Wnt7a mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05);钝挫伤后3d、4d、5d、7d组Wnt7a mRNA表达水平逐渐升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),在钝挫伤后7d时表达最高,随后开始下降。结论Wnt7a可能参与骨骼肌损伤的早期修复过程,推测损伤修复的速度很可能与Wnt7a的表达水平密切相关,Wnt7a在骨骼肌损伤修复中发挥重要作用。

miR-34a通过靶向作用于WNT7A增强乳腺癌细胞对紫杉醇的化疗敏感性

目的:研究微小RNA34a(miR-34a)对乳腺癌MCF-7细胞化疗敏感性的影响及其作用机制,为乳腺癌化疗耐药提供理论依据。方法:CCK-8法检测miR-34a对紫杉醇处理MCF-7细胞的IC_(50)和细胞增殖的影响,乳腺球形成实验检测两者联用对乳腺癌细胞自我更新能力的影响,Western blot法检测乳腺癌干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)的表达,双荧光素酶实验对miR-34靶基因WNT7A进行验证。结果:miR-34a过表达能增加乳腺癌MCF-7细胞对紫杉醇的化疗敏感性(P<0.05)。miR-34a可提高紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的抑制作用(P <0.01)。miR-34a联用紫杉醇可明显抑制乳腺球的大小和形成效率(P<0.01),同时显著抑制乳腺癌干细胞标记物ALDH1蛋白的表达(P<0.01)。双荧光素酶实验证明miR-34a与WNT7A有相互靶向作用。结论:miR-34a通过靶向作用于WNT7A增强乳腺癌细胞的化疗敏感性。

高侵袭性膀胱癌细胞中的Wnt7a和MMP-10表达及相关性分析

目的探讨Wnt7a和MMP-10在高侵袭性膀胱癌细胞中的表达作用及两者之间的相关性。方法通过qRT-PCR和Western blot检测高侵袭膀胱癌细胞(5637 HUBC)和对照低侵袭性膀胱癌细胞(5637 NUBC)中Wnt7a和MMP-10的表达情况,通过Wnt7a siRNA转染HUBC细胞,检测转染后Wnt7a和MMP-10的表达情况,通过Millicell小室检测转染后5637 HUBC细胞的侵袭能力,收集膀胱癌(BC)组织标本和癌旁组织,通过qRT-PCR和Western blot检测两者表达情况,Pearson相关分析两者相关性。结果与对照5637 NUBC相比,5637 HUBC细胞中Wnt7a和MMP-10的mRNA表达水平增加,并且Wnt7a和MMP-10的蛋白质表达水平也增加(P均<0.01);转染两种不同的siRNA(siWnt7a-1和siWnt7a-2)和对照siRNA(siCTL)后,Wnt7a的mRNA表达降低,Wnt7a和MMP-10蛋白水平在功能丧失实验后均降低,经过Transwell实验发现,与对照组比较,敲除Wnt7a后,5637 HUBC的侵袭能力减低;BC组织和正常癌旁组织Wnt7a和MMP-10的表达差异明显(P<0.01),Wnt7a和MMP-10表达呈正相关(r=0.584,P=0.002)。结论Wnt7a及其下游基因MMP-10在BC细胞侵袭性方面发挥重要作用,Wnt7a及其相关的MMP-10基因位点有希望成为BC细胞侵袭和转移的药物靶点。

苯并(a)芘通过干扰Wnt7a影响小鼠胚胎着床

目的:苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,Ba P)被证实是对生殖有不良影响的雌激素类似物,研究发现苯并(a)芘影响胚胎着床,本研究检测Ba P对早孕小鼠子宫中Wnt信号通路的影响,以探讨其干扰胚胎着床的机制。方法:将成年雌雄昆明鼠进行交配,次日见阴栓记为妊娠第1天(D1)。将孕鼠随机分为玉米油对照组(n=45)和Ba P处理组(n=45),玉米油对照组从妊娠第1天开始给予玉米油灌胃,Ba P处理组则给予0.2 mg/(kg·d)的Ba P进行灌胃,直至妊娠的第4、5、6天(D4、D5、D6)分别处死,收取子宫材料,计数着床点数目,采用荧光定量PCR,免疫组化法,Western blot分别检测所收集子宫内膜材料中Wnt信号通路相关基因表达情况。结果:苯并(a)芘染毒后,引起胚胎着床数下降,差异具有统计学意义(P=0.000);荧光定量PCR显示Wnt7a m RNA水平在Ba P组较对照组表达下降,差异具有统计学意义(P=0.000);而β-catenin m RNA在Ba P组水平升高,差异具有统计学意义(P=0.002、P=0.003、P=0.011);Western blot和免疫组化也均显示Ba P染毒后Wnt7a的表达下降,β-catenin的表达有所上升。结论:苯并(a)芘可能通过干扰Wnt7a、β-catenin的表达影响小鼠胚胎着床。

Wnt7a对肝癌细胞凋亡、迁移及侵袭的影响

目的:检测Wnt7a在肝癌中的表达,分析Wnt7a对肝癌细胞活性、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨Wnt7a在肝癌中的作用。方法:分别采用免疫组织化学染色和Western blot检测组织和细胞系中Wnt7a的表达情况; Hep3B细胞经人重组Wnt7a蛋白(rW nt7a)处理后,MTT法检测细胞活性改变,流式细胞仪检测细胞凋亡变化,Transwell分析细胞迁移及侵袭能力变化。结果:相对于癌旁组织,肿瘤组织低表达Wnt7a蛋白;经rW nt7a处理后,Hep3B细胞活性降低、细胞凋亡增多且迁移与侵袭能力下降。结论:Wnt7a蛋白能抑制Hep3B细胞生长、迁移与侵袭能力,可能在肝癌中发挥抑癌作用。

Wnt7a和孕酮受体在人工受精奶牛受孕前后表达规律研究

旨在筛选奶牛早期妊娠诊断标志因子,提高奶牛养殖经济效益。在北京某牛场选10头荷斯坦奶牛,在输精后第1、4、7、10、13、16、19天取血,通过荧光定量PCR和western blotting方法分析Wnt7a和PR的表达趋势和变化规律。通过直检对10头荷斯坦奶牛进行怀孕检测,其中有7头受孕3头未受孕。通过检测受孕和未孕的奶牛血液中Wnt7a基因和PR基因的表达量,发现Wnt7a基因在受孕奶牛血液中的表达量均高于未孕奶牛,特别是输精后第7天受孕奶牛的表达量显著增高,Wnt7a的蛋白质水平表达呈现出类似趋势;PR基因在全部10头奶牛中呈现出从输精后第一天表达开始降低,并一直维持一个很低的表达状态。Wnt7a具有作为奶牛早期妊娠诊断标志因子的潜质,其优势在于将检测窗口提前到输精后的第7天;PR不具有作为标志因子的优势。通过探究影响早期妊娠的相关因子变化规律,可以为孕检的时间窗口提前到早期妊娠阶段提供理论依据。

Wnt7a在红藻氨酸致痫大鼠颞叶癫痫形成过程中的变化

目的探讨Wnt7a mRNA和蛋白在红藻氨酸(KA)致痫大鼠颞叶癫痫形成过程中的时间变化过程,明确Wnt7a是否参与颞叶癫痫海马神经发生。方法利用生后30天的雄性SD大鼠(哈尔滨医科大学附属第二医院动物室提供),经皮下注射KA制成颞叶癫痫动物模型后,应用Real-time PCR和Western blot技术检测KA后不同时期(急性期、自发性反复癫痫形成初期和慢性癫痫稳定形成期)实验组和生理盐水(NS)对照组(每组动物各六只)大鼠海马组织中Wnt7amRNA和蛋白的表达。结果 KA致痫后在颞叶癫痫形成过程中,各时期KA组动物海马组织Wnt7a mRNA的表达同相应时期NS组相比,在急性期显著下降(NS组:1.000±0.000,KA组:0.304±0.113,P<0.001),在自发性反复癫痫形成初期增高且差异有统计学意义(NS组:1.000±0.000,KA组:3.369±1.455,P=0.010),在慢性癫痫稳定形成期增高且差异有统计学意义(NS组:1.000±0.000,KA组:5.845±3.524,P=0.020)。KA组各时期的动物海马组织Wnt7a mRNA的表达相比较,癫痫形成初期及慢性期均较急性期显著增高(P<0.05),慢性期较癫痫形成初期增高但差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠海马组织中Wnt7a蛋白的表达无论在时间上还是在组别间差异均无统计学意义。结论 Wnt7a可能调控KA点燃颞叶癫痫大鼠的海马神经发生,参与颞叶癫痫的形成。

Wnt7a与恶性肿瘤的关系及研究进展

Wnt7a是Wnt信号家族成员中的一种分泌糖蛋白,位于染色体3p25上,极易缺失,主要在胎盘、肾脏、睾丸、子宫、胎肺及人脑中表达,参与人体的胚胎发育及细胞分化。越来越多的研究发现,Wnt7a在很多肿瘤细胞中也有表达,并起着举足轻重的作用。作为一个新的肿瘤治疗靶点或者肿瘤生长通路中重要的因子,Wnt7a开始受到越来越多科学家的注意。

非小细胞肺癌患者外周血中WNT7A甲基化检测的诊断价值

目的探索WNT7A甲基化和NSCLC临床病理因素的关系。方法选取120例NSCLC患者为NSCLC组,另外选择120位健康者为对照组,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法检测两组的WNT7A启动子甲基化率,并分析WNT7A甲基化和NSCLC临床病理因素的关系。结果NSCLC组患者的外周血中WNT7A甲基化率显著高于对照组(P<0.05),WNT7A基因甲基化率与患者的性别、病理类型、年龄、吸烟史等无显著相关性(P>0.05),而与肿瘤大小、远处转移、TNM分期、胸腔积液显著相关(P<0.05)。有胸腔积液、肿瘤直径>5cm的NSCLC患者外周血中WNT7A基因甲基化检出率显著高于无胸腔积液、肿瘤直径≤5 cm患者(均P<0.05);TNM分期为Ⅲ~Ⅳ的NSCLC患者外周血中WNT7A基因甲基化检出率显著高于分期为Ⅰ~Ⅱ的NSCLC患者(P<0.05)。结论WNT7A基因甲基化在NSCLC患者中检出率较高,可作为NSCLC有效的诊断依据。