Wnt7a基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及向神经元样细胞分化的影响

目的研究Wnt7a基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元样细胞分化的影响。方法构建Wnt7a腺病毒,利用病毒感染MSCs,MTT法检测Wnt7a基因腺病毒感染前后MSCs增殖情况,Western blot检测细胞质和细胞核中β-catenin及CyclinD1表达的变化,比较诱导后向神经元样细胞的分化率。结果与对照组细胞相比,Wnt7a腺病毒感染组细胞增殖能力明显增强(P<0.05);细胞质和细胞核中β-catenin蛋白表达量均明显增加(P<0.05);CyclinD1的蛋白表达量也明显增加(P<0.05);诱导后向神经元样细胞分化率明显提高。结论 Wnt7a蛋白表达上调,可能通过提高β-catenin和CyclinD1表达来促进MSCs细胞增殖,Wnt7a蛋白同时促进MSCs向神经元样细胞的诱导分化。

Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌中的表达及意义

目的探讨Wnt7a及其受体Frizzled(Fzd) 5在大肠癌中的表达及关系,揭示大肠癌发生发展的可能机制。方法收集大肠癌标本80例,以癌旁正常组织作为对照。qRT-PCR技术检测Wnt7a及其受体Fzd5在大肠癌及癌旁正常组织中mRNA水平的变化。Western印迹方法检测Wnt7a及其受体Fzd5在蛋白水平的变化,免疫组化检测Wnt7a及其受体Fzd5的表达变化及分布特点,同时观察Wnt7a及其受体Fzd5与大肠癌临床病理参数的关系。结果与癌旁正常组织比较,大肠癌组织中Wnt7a及其受体Fzd5在mRNA及蛋白水平均明显增高(P<0. 05);免疫组化及Western印迹结果显示,Wnt7a及其受体Fzd5均在细胞质表达,且大肠癌组织的表达强度明显高于癌旁正常组织(P<0. 05)。相关性分析表明,Wnt7a与受体Fzd5的表达均与大肠癌的体积、Duke分级及是否伴有淋巴结转移具有明显的相关性(P<0. 05),且Wnt7a与受体Fzd5两者之间呈正相关。结论 Wnt7a可能通过与受体Fzd5的结合激活Wnt信号,参与了大肠癌的发生与发展。

Wnt7a蛋白在IFN-γ促神经干细胞增殖中的影响

目的研究γ干扰素(IFN-γ)对神经干细胞的增殖和自我更新能力的影响;Wnt7a蛋白在IFN-γ促神经干细胞增殖和增强自我更新能力的机制。方法从胎鼠端脑获取原代神经干细胞进行原代培养,分别添加一定浓度IFN-γ溶液和PBS溶液,分为IFN-γ处理组和PBS对照组,计算神经球体面积,细胞免疫荧光检测神经干细胞Brd U增值能力,蛋白免疫印迹检测神经干细胞IFN-γ信号通路蛋白p STAT1和Wnt7a信号通路蛋白。结果形态学显示IFN-γ增加神经球面积和Brd U+细胞数目,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);蛋白免疫印迹结果显示IFN-γ促进了p STAT1和Wnt7a蛋白增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 IFN-γ增强了神经干细胞的自我更新能力和增殖能力,并且激活了Wnt7a信号通路。