人附红细胞体感染实验诊断方法的建立

目的比较瑞氏-吉姆萨染色、吖啶橙荧光染色以及聚合酶链反应(PCR)对人附红细胞体的检出率,探索最可靠的检测人附红细胞体病的方法。方法选取体检健康人50名,同时从白血病及肾移植患者中分别选取50例,使用瑞氏-吉姆萨染色法以及吖啶橙荧光染色法检测附红体的感染率,同时选取1例2种方法检测结果均为强阳性的标本,根据GenBank中已收录的猪、牛、羊、猫、鼠等5种附红细胞体的16S rRNA基因序列设计一对特异性引物,初步建立人附红体病的分子诊断方法。结果体检健康人群中瑞氏-吉姆萨染色法以及吖啶橙荧光染色法检出率分别为32%和24%,白血病组的检出率分别为94%和62%,肾移植组的检出率分别为88%和68%,同时初步建立了人附红细胞体病的分子诊断方法,但需进一步研究将其完善。结论吖啶橙荧光染色法最适合临床作为人附红细胞体病的临床检测方法。

改良支气管肺泡灌洗液细胞分类计数制片及染色法

目的：改良支气管肺泡灌洗液细胞分类制片及染色方法，并对其临床实用性进行验证。 方法：随机抽取50例门诊及住院患者肺泡灌洗液标本，分别用改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法及传统手工HE染色法染色，由两名具有专业技术能力的检验人员分别进行显微镜下细胞分类计数，评估两种制片方法检测结果的可比性。 结果：两种方法对肺泡灌洗液中吞噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数一致性较好，相关系数（r）均〉0.95。改良法染色的细胞形态完整，细胞核和细胞浆分辨清楚，可见颗粒、空泡等细微结构；而传统法染色后的细胞固缩明显，细胞体积变小，细胞核和细胞浆分辨清晰度下降，颗粒和空泡等细胞结构辨认不清。改良法比传统法省去了滤液离心富集细胞的过程（6 min），并且使用自动化瑞氏吉姆萨染色法（20 min）代替了手工HE染色法（30 min），每份标本至少节省了15－20 min的制片和染色时间。 结论：改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法优于手工HE染色法，更适用于支气管肺泡灌洗液细胞分类计数，尤其是批量检测。

黑褐新糠虾血细胞形态及其与日本新糠虾对溶藻弧菌敏感性的比较

实验采用Giemsa与Wright’s两种染色方法对黑褐新糠虾血细胞进行染色,根据血细胞大小,所含颗粒与否,颗粒多少和核质比将其分型,并对各型血细胞所占比例进行统计。结果表明,通过比较Giemsa染色与Wright’s染色两种方法的染色时间和效果,Wright’s染色更加适合糠虾血细胞。通过染色,将黑褐新糠虾血细胞分为3种类型,它们分别为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞。它们的胞体大小依次增大,核质比依次降低。对此3种类型血细胞比例分别统计后发现,颗粒细胞所占比例最多约(48.38%±0.05%),其次是半颗粒细胞约为(35.22%±0.04%),最少的为透明细胞约为(16.40%±0.01%)。对不同浓度溶藻弧菌的感染试验发现,日本新糠虾在较短的时间内出现死亡,即48 h,而黑褐新糠虾72 h出现死亡,各浓度组中日本新糠虾死亡率均高于黑褐新糠虾。黑褐新糠虾相对日本新糠虾来说,对溶藻弧菌具有较低的敏感性,可能与其血细胞中颗粒和半颗粒比例较高有关。

瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的比较瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精子形态染色的效果,寻找可替代巴氏染色法的简单、有效的精子形态染色方法。方法随机选取21份精液标本,每份标本同时采用瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精液涂片进行染色,分析两种染色方法的结果。结果两种染色方法对精子形态的评估结果无显著性差异(P>0.05);且对正常形态精子和异常形态精子的评估分别具有正相关性,r值为0.984、0.986(P均<0.01)。结论瑞氏-姬姆萨染色法是一种简单有效的精子形态染色方法,可替代巴氏染色法。

精液中白细胞两种鉴别方法的比较与评价

用瑞氏－姬姆萨染色法和免疫细胞化学法对１２６名不育男性进行了精液白细胞检测，白细胞检出率分别为６６．６７％和６９．０５％，两法符合率为９２．１％，两法同时开展可以进一步提高精液中白细胞检测水平。

RH株弓形虫速殖子体外入侵大鼠肠上皮细胞与增殖的动态观察

目的动态观察弓形虫RH株速殖子(简称速殖子)体外入侵大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)及其增殖过程。方法取24孔培养板,设实验组及对照组各3孔,每孔放置经预处理的盖玻片。将常规传代培养的IEC-6细胞接种于各培养孔,于37℃5%CO2培养箱培养24h,吸弃培养液,实验组每孔加入1ml速殖子悬液(含1×106个速殖子),对照组每孔加入1ml无抗生素培养液,共培养。用倒置显微镜连续观察速殖子粘附、入侵IEC-6细胞及其增殖过程,并分别于共培养5～30min、1～48h后取出盖玻片,经吉氏-瑞氏染色后光镜观察其入侵和增殖情况,计算入侵率。结果共培养5min,速殖子即可入侵IEC-6细胞,随着共培养时间的延长入侵的速殖子逐渐增多,1h为1～5个,入侵率为(55.0±6.6)%。2h入侵率高达(81.8±10.2)%,有假包囊形成,速殖子可入侵细胞核并在核内增殖。4h入侵率降为(80.8±9.2)%,假包囊破裂释出成簇排列的速殖子。6h入侵率为(75.1±8.2)%,成簇排列的速殖子显著增多。12h成簇排列的速殖子减少,多数速殖子游离细胞外,完整的IEC-6细胞明显减少。24h只见部分IEC-6细胞和假包囊存在,有大量游离的速殖子。48h见大量游离速殖子,未见贴壁细胞。结论体外培养的弓形虫速殖子可迅速入侵IEC-6细胞,并可在细胞质及细胞核内增殖。增殖周期为6～12h。

诊断桑树黄化型萎缩病的新方法

本文探讨利用瑞氏染色法和旦尼氏染色法诊断桑树黄化型萎缩病的可能性。试验结果表明,用此方法,在病株枝条或主根的横切面上,韧皮部的病原寄生部位被染成兰色或青色,呈阳性反应,健株组织切片的韧皮部则不着色,呈阴性反应。可作为桑黄化型萎缩病病株的实验诊断手段。

瑞-姬氏染液复合染色法诊断卡氏肺孢子虫肺炎的研究

目的 制作颜色鲜明 ,结构清晰 ,易于观察的卡氏肺孢子虫包囊和滋养体染色标本。 方法 采用瑞 -姬氏染液复合染色法。 结果 染色后肺孢子虫包囊中的囊内小体有呈紫红色的细胞核和呈蓝色的细胞质 ,囊壁薄 ,淡蓝色 ,包囊各部分结构清晰可辨。滋养体有紫红色的细胞核和蓝色的细胞质。 结论 瑞

不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法。方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果。结果:四种染色方法对型、型精子顶体的评估结果无显著性差异(P>0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定。结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读。

瑞氏染液混配机的设计

目的设计一种可替代传统人工操作的瑞氏染液混配机。方法瑞氏染液混配机由混配罐、水箱、电机、电控箱和基座等构成。工作模式采用动力电机减速驱动混配罐翻转,借助于混配罐内壁摩擦撞击和研磨材料碰撞,使粉粒状瑞氏色素粉碎分散溶解成均一的极细小的微粒以至混配成瑞氏染液。通过实际配液和染色比较瑞氏染液混配机配液与人工配液的差异。结果瑞氏染液混配机混配的染液色素颗粒微细,质量优良,染色效果好,便于标本片的会诊和图像采集,避免了人工配制造成的染液质量不稳定和甲醇的毒副作用。结论该设计装备结构简单,设计合理,配液效率高,是一种特别适宜配制瑞氏染液的实验室实用新型设备。

一种简单实用的脑脊液细胞学检查染色法及其临床应用

目的探讨一种简单实用的脑脊液细胞学检查染色法及其临床应用的价值。方法应用瑞氏姬姆沙混合染色法对361例脑脊液细胞学进行染色。结果应用瑞氏姬姆沙混合染色法染出的脑脊液细胞清晰度好,即细胞核染色质、胞浆颗粒、核仁等清晰可见,一目了然。结论瑞氏姬姆沙混合染色法具有染色效果好、操作方便简单、节省时间、非常容易掌握等优点,因此适合各级医院推广应用。

5种尿沉渣染色方法的效果比较

目的：探讨5种尿沉渣染色法的最佳染色条件及效果。方法：180例尿沉渣异常标本,分别采用尿沉渣Sternheimer染色法（S染色法）、尿沉渣Sternheimer-Malbin改良染色法（S-M染色法）、Berhe-Muhlberg染色法（B-M染色法）、阿利新兰-中性红染色法（阿-中染色法）及瑞氏-姬姆萨复合染色法（瑞-姬染色法）进行染色,观察5种染色方法最佳效果时的染液与尿液比例及染色时间。结果：尿沉渣S和S-M染色法染液与尿液比例2∶1和1∶1染2~5 min时背景清晰,S染色法有形成分结构清晰易辨别,S-M染色法有形成分结构着色略差,两者比较差别不大（P〉0.05）;B-M染色法、阿-中染色法及瑞-姬染色法染色法有形成分的着色与背景相似,结构模糊,细菌不着色,杂质较多,差异无统计学意义（P〉0.05）,但与S、S-M染色方法比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：尿沉渣S和S-M染色法染色效果佳,尤以S染色法最佳。

血涂片染色方法的改良

目的:探索提高血涂片细胞形态和颜色以及持久性的制作方法。方法:实验从染色冲洗的环节进行改良,采用蒸馏水(纯净水)取代自来水。结果:血涂片用Wright-Giemsa染色、蒸馏水(纯净水)冲洗的方法在光镜下观察细胞结构较清晰,层次分明,不易褪色,保存和使用时间较长。结论:该方法提高了血涂片染色的质量。

8例系统性红斑狼疮患者临床误诊分析

目的探讨系统性红斑狼疮患者临床误诊原因。方法回顾性分析我院2010年8月至2013年5月共误诊系统性红斑狼疮患者8例临床特点及实验室资料,对其误诊结果进行总结。结果 7例通过骨髓形态学检验和1例通过胸腔积液检验到红斑狼疮细胞而确诊。结论骨髓穿刺涂片及积液检验找到红斑狼疮细胞对初诊SLE患者有非常重要的诊断价值,在骨髓检验及体液检验中应引起重视。

3种体液细胞染色方法的效果比较

目的选择简单、快速且能反映体液细胞原有结构特征的染色最佳方法。方法比较临床较为常用的苏木精-伊红(HE)染色法、巴氏染色法及瑞-姬(WG)混合染色法对650份不同体液标本进行细胞染色效果及阳性检出率。结果 WG混合染色法操作简便快速,能使体液细胞结构最大限度地保持原有状态及特征,细胞质、细胞核及核仁之间的色差大,易于区分辨认,阳性诊断符合率为99.7%、灵敏度为79.0%、总有效率达94.0%。结论经对各种体液细胞染色观察分析,WG混合染色法效果优于HE和巴氏染色法,特适用于各级检验单位体液细胞的开展。

瑞氏-姬姆萨染色不同时间和不同浓度对正常成人红细胞形态测量结果的影响

目的探讨不同染色时间和试剂浓度对细胞形态测量结果的影响情况。方法以瑞氏-姬姆萨染色的红细胞为研究对象,采用不同染色时间(10、20、40 min)和A、B液比例(1∶1、1∶2、1∶4)对血涂片进行染色,应用图像分析软件分别测量红细胞的红、绿、蓝三基色和面积、平均直径、周长,并对测量结果进行分析比较。结果不同染色时间和试剂浓度组红细胞红、绿、蓝三基色差异均有统计学意义(P<0.05),其中红、绿、蓝基色值在短时间(10 min)和低浓度(1∶4)组最小,在长时间(40 min)和高浓度(1∶1)组最大(P<0.05)。不同染色时间和试剂浓度组红细胞的面积、平均直径、周长差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论染色时间和试剂浓度对细胞色度学参数影响明显,而对几何形态学参数无明显影响。

制苗用鸡蛋中支原体污染的检测

本研究应用KM_2液体培养基培养法和姬姆萨氏染色法对来源于山西生物制品厂的两批可疑感染支原体的制苗用鸡蛋进行了检测。结果表明:第一批样品阳性检出率为71.4％;第二批样品阳性检出率为85.7％。由此说明,该试验方法作为支原体污染检测的常规方法使用于生产中具有重要的实践意义。

瑞-姬氏混染在Cr(Ⅵ)诱导的HepG2细胞微核试验中的应用

背景与目的：将瑞-姬（Wright-Giemsa）氏混染法用于Cr（Ⅵ）诱导的HepG2细胞微核试验,探讨瑞-姬氏混染配比浓度和不同染色时间对染色效果的影响。材料与方法：以瑞-姬氏混染对HepG2细胞进行染色,采用不同的染液配比和染色时间,观察其对染色效果的影响。结果：3∶1瑞-姬氏混染3-5min可以获得较瑞氏或姬氏单一染色更好的染色效果。结论：瑞-姬氏混合染色法可应用于微核试验中的细胞染色,并可获得良好的染色效果。

阿尔泰蝠蛾幼虫血细胞形态学研究

本研究采用Wright-Giemsa染色方法,利用光学显微镜观察阿尔泰蝠蛾Hepialus altaicola Wang幼虫血细胞。根据鳞翅目昆虫血细胞形态特征对阿尔泰蝠蛾幼虫血细胞进行鉴定,计数并计算各类血细胞所占的比例。发现阿尔泰蝠蛾幼虫血淋巴中存在原血胞、浆血胞、粒血胞、类绛色细胞、珠血胞和囊血胞6种细胞类型,所占比例分别为3.7%,29.9%,55.4%,2.3%,5.8%和2.9%。阿尔泰蝠蛾幼虫血细胞组成及其形态与其他鳞翅目昆虫基本一致,但是与其它种属相比,同种类型的血细胞大小和占比略有不同。粒血胞和浆血胞是阿尔泰蝠蛾幼虫血淋巴中的主要类型,其中粒血胞占比最高。该研究为深入研究阿尔泰蝠蛾血细胞形态和功能提供理论依据和基础数据。

罗非鱼类立克次氏体病的组织病理学观察

本文主要研究感染类立克次氏体(Rickettsia-like organism,RLO)的养殖罗非鱼(Oreochromis aureus♂×Oreochromis niloticus♀)肝、脾、肾、肠、鳃和心脏的组织病理变化。感染类立克次氏体的罗非鱼各器官广布粗糙不圆整的白色小结节,这些结节为肉芽肿坏死灶,分层不典型,与周围健康组织的界限不甚明显;严重病变的组织坏死区域较大,与周围明显增生的细胞形成清晰的巨大"肉瘤"状肿物。经吉姆萨-瑞氏染色后,在病变组织内,尤其是脾肾组织的巨噬细胞胞质内可见蓝紫色球状或颗粒样、成簇分布的类立克次氏体。这些发现可为罗非鱼类立克次氏体病的病理学诊断提供依据。