五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响

目的:探讨五虎汤加味对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘小鼠气道炎症及黏蛋白(Muc)5AC、转录激活因子3(STAT3)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达的影响。方法:70只雄性6~8周龄BALB/c小鼠,每组10只,随机分为正常组、哮喘组(卵清蛋白,OVA)、RSV感染哮喘组(OVA+RSV)、五虎汤加味组(高、中、低剂量分别为4.08、2.04、1.02 g·kg^(-1)·d^(-1))、地塞米松组(0.1 g·kg^(-1)·d^(-1))。OVA致敏及雾化激发哮喘模型,经RSV滴鼻连续3次感染(1.0×10^(6) PFU·mL^(-1),50μL),构建RSV感染哮喘模型;五虎汤加味组予五虎汤加味灌胃;地塞米松组给予地塞米松注射液腹腔注射;正常组予等量生理盐水灌胃。末次激发24 h,在2.5%戊巴比妥钠麻醉下,留取肺组织进行苏木素-伊红(HE)、苦味酸-酸性品红(VG)染色观察气道炎症反应,免疫组织化学检测Muc5AC蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化(p)-STAT3、STAT3、p-NF-κB、NF-κB、NLRP3蛋白表达情况。结果:与正常组比较,OVA组小鼠气道炎性细胞浸润,组织充血水肿,胶原纤维沉积;OVA+RSV组小鼠气道炎性细胞浸润,组织充血水肿较OVA组更显著;与OVA+RSV组比较,五虎汤加味组能显著改善气道周围炎性细胞浸润,组织充血水肿,胶原纤维沉积明显减轻,其中高剂量组作用更加明显。免疫组化结果显示,与正常组比较,OVA组和OVA+RSV组Muc5AC蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与OVA+RSV组比较,五虎汤加味组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平,其中高剂量组作用更加明显(P<0.05);与五虎汤加味高剂量组比较,地塞米松组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平(P<0.05)。在蛋白表达水平,与正常组比较,OVA组、OVA+RSV组p-STAT3、p-NF-κB、NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与OVA+RSV组比较,五虎汤加味组可显著降低p-STAT3、p-NF-κB、NLRP3蛋白表达水平(P<0.01);与五虎汤加味高剂量组比较,地塞米松组可显著升高p-STAT3、p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.01)。结论:五虎汤加味可以明显减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症,降低Muc5AC、p-STAT3、p-NF-κB、NLRP3蛋白的表达,提示五虎汤加味减轻RSV感染哮喘气道炎症可能与调控STAT3/NF-κB信号通路抑制NLRP3蛋白表达相关。

五虎汤合清金降火汤加减治疗小儿社区获得性肺炎痰热闭肺证及其机制

目的:观察五虎汤合清金降火汤加减治疗小儿社区获得性肺炎(CAP)痰热闭肺证的临床疗效及对炎症因子的影响。方法:将140例CAP患儿随机按数字表法分为对照组69例和观察组71例。两组患儿给予抗感染、退热、祛痰、平喘及呼吸支持等治疗。对照组口服羚羊清肺颗粒,1 g/次,3次/d;观察组内服五虎汤合清金降火汤加减,1剂/d。两组疗程均为连续治疗7 d。监测体温,记录退热起效时间和完全退热时间和治疗后7 d的完全退热率;记录咳嗽、咯痰缓解时间及消失时间,记录肺部湿啰音消失时间;记录治疗失败情况;进行治疗前后痰热闭肺证评分;检测治疗前后血清超敏C反应蛋白(hs-CRP),降钙素原(PCT),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:采用秩和检验分析两组患儿的临床疾病疗效,观察组优于对照组(Z=2.106,P<0.05);采用秩和检验分析两组患儿中医证候疗效,观察组优于对照组(Z=2.119,P<0.05);观察组患儿的退热起效和完全退热时间均短于对照组(P<0.01);观察组患儿咳嗽、咯痰缓解时间及消失时间和肺部湿啰音消失时间均短于对照组(P<0.01);观察组治疗后7 d的完全退热率96.92%(63/65),高于对照组的82.81%(53/64)(χ^2=7.085,P<0.01);观察组患儿治疗失败率为9.23%(6/65),低于对照组的23.44%(15/64)(χ^2=4.775,P<0.05);观察组痰热闭肺证各主要症状、体征评分、次要症状评分和总积分均低于对照组(P<0.01);观察组hs-CRP,PCT,TNF-α和IL-6水平均明显低于对照组(P<0.01)。结论:在常规抗感染等综合治疗的基础上,给予五虎汤合清金降火汤加减内服治疗CAP(痰热闭肺证)患儿,可进一步控制临床症状,具有起效快、症状消退快、病程短的优点,并可减轻炎症反应,控制疾病进展,完全退热率,提高临床疾病疗效和中医证候的疗效。

五虎汤加减联合阿奇霉素序贯疗法治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎疗效及对抗炎、促炎因子及呼吸功能的影响

目的：探讨五虎汤加减联合阿奇霉素序贯疗法治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎（mycoplasmal pneumoniae pneumonia,MPP）临床疗效及安全性。方法：以河南中医药大学第二附属医院在2015年3月—2016年12月收治的135例MPP患儿作为研究对象,随机数字表法分为治疗组（67例）、对照组（68例）。对照组MPP患儿应用阿奇霉素序贯疗法进行治疗,治疗组联合五虎汤加减进行治疗,清水煎煮,每日1剂,连续治疗14 d后,对比两组患儿临床疗效及治疗前后抗炎、促炎因子及呼吸功能的变化情况。结果：治疗组患者总有效率为94.03%,对照组为85.29%,治疗组高于对照组（P〈0.05）;与治疗前比较,治疗后,两组患儿血清中白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）水平明显升高,且治疗组明显高于对照组（P〈0.05）,白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）,白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）水平明显降低,且治疗组低于对照组（P〈0.05）;与本组治疗前比较,治疗后两组患儿血清中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α,白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）与白细胞介素-8（interleukin-8,IL-8）水平均明显降低,且治疗组低于对照组（P〈0.05）;与本组治疗前比较,治疗后两组患儿动脉氧分压（arterial oxygen partial pressure,Pa O2）,氧合指数（Pa O2/Fi O2）水平明显升高,且治疗组高于对照组（P〈0.05）,呼吸频率（respiratory rate,RR）明显降低,且治疗组低于对照组（P〈0.05）;两组不良反应比较差异无统计学意义。结论：五虎汤加减联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型MPP患儿疗效显著,可明显改善患儿抗炎/促炎因子失衡情况与呼吸功能,安全性较好。

五虎汤抑制STAT3蛋白调控树突细胞自噬治疗RSV诱发哮喘小鼠

目的:探讨五虎汤对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘小鼠模型的治疗作用机制、肺组织信号传导及转录激活因子3(STAT3)蛋白表达的影响。方法:100只SPF级雌性BALB/c小鼠,用RSV复合鸡卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发哮喘,造模成功后随机分为正常组、模型组、阳性药组(地塞米松,1.82 mg·kg^(-1)),STAT3抑制剂组(STATTIC,3.75 mg·kg^(-1)),STAT3诱导剂组(colivelin,1.0 mg·kg^(-1))及五虎汤低、中、高剂量组(1.6,3.2,6.4 g·kg^(-1)),并给予相应药物干预2周。使用动物呼吸机检测小鼠气道反应性值;采用苏木素-伊红(HE),过碘酸希夫(PAS)及马松(Masson)染色分别观察小鼠肺组织病理学改变、杯状细胞分泌黏液和气道胶原沉积情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-17(IL-17)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定转化生长因子-β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA在肺组织中的表达;透射电镜检查肺组织自噬体;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织树突细胞(DC)中自噬相关蛋白5(ATG5),Sequestosome 1(SQSTM1)蛋白表达及肺组织中STAT3,磷酸化(p)-STAT3蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠气道反应性增高(P<0.01),肺组织周围炎性细胞浸润,杯状上皮细胞过度化生和气道胶原广泛沉积,血清中IL-6和IL-17含量显著升高,IL-10含量显著降低(P<0.01),肺组织中TGF-β1,α-SMA mRNA表达增加(P<0.01),肺组织自噬体数量增加,肺组织DC中ATG5蛋白表达上升,SQSTM1表达降低(P<0.01),肺组织中STAT3,p-STAT蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,五虎汤和STATTIC均可明显降低哮喘小鼠气道高反应性(P<0.05,P<0.01),有效缓解RSV诱发哮喘小鼠肺组织病理情况,降低血清中IL-6和IL-17表达含量(P<0.01),升高哮喘保护细胞因子IL-10含量(P<0.01),降低肺组织中TGF-β1,α-SMA mRNA水平(P<0.01),进一步增加自噬小体数量,显著增强肺组织DC中ATG5水平及下调SQSTM1水平(P<0.05,P<0.01),并可下调肺组织中STAT3及p-STAT3水平(P<0.01)。结论:五虎汤可能通过抑制STAT3蛋白,上调肺组织DC自噬水平,从而有效改善RSV诱发哮喘小鼠气道炎症、气道重塑,降低气道高反应性。

五虎汤加味治疗儿童哮喘急性发作期痰热阻肺证的临床随机对照观察

目的:探讨五虎汤加味治疗儿童哮喘急性发作期的临床疗效。方法:将130例急性发作期哮喘儿童,随机分为观察组和对照组,每组65例,观察组给予五虎汤加味治疗,对照组给予盐酸丙卡特罗治疗,疗程1周,比较治疗前后患儿的主要症状(喘息、咳嗽、气促、胸闷)评分情况;次要症状(精神、流涕、口干、舌质、舌苔、大便等)评分情况,肺功能改善情况;免疫球蛋白(Ig)E表达、嗜酸性粒细胞(EOS)计数变化情况,血清白细胞介素(IL)因子(IL-5,IL-6,IL-8,IL-1β)水平变化。结果:该研究最终对126例患儿的数据进行统计分析。与本组治疗前比较,治疗后观察组和对照组主要症状(喘息、咳嗽、气促、胸闷),次要症状(精神、流涕、口干、舌质、舌苔、大便)评分、血清IL水平和IgE表达,EOS计数明显降低(P<0.05),肺功能指标明显升高(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组咳嗽症状与次要症状评分明显降低(P<0.05);IL-1β表达水平降低程度不及对照组(P<0.05)。肺功能指标,IgE表达,EOS计数改善情况与对照组等同。结论:五虎汤加味治疗儿童哮喘急性发作期痰热阻肺证能明显减轻哮喘患儿的临床症状,改善肺功能,降低IgE,IL-5,IL-6,IL-8,IL-1β表达水平和EOS计数,总体临床疗效优于或等同盐酸丙卡特罗。

加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎疗效及对T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型zJ,JL支原体肺炎的临床疗效，及对T淋巴细胞亚群的影响。方法：研究对象为2015年1月-2017年2月河南中医药大学第二附属医院收治的150例痰热闭肺型小儿支原体肺炎患儿，采取随机数字表将其分成两组，每组75例。两组患儿均给予阿奇霉素治疗，观察组联合给予加味五虎汤治疗，比较两组临床疗效以及治疗前后T淋巴细胞亚群、炎性细胞因子变化情况。结果：经14d治疗后，观察组总有效率达98．67％，对照组总有效率为88．00％，观察组优于对照组（P〈0．01）。观察组患儿干湿哕音、咳嗽消失时间以及退热时间较对照组患儿均有缩短（P〈0．01）。经14d治疗后，两组CD4＋水平，CD4＋／CD8＋均有明显上升（P〈0．01），与对照组治疗后比较，观察组CD4＋水平，CD4＋／CD8＋升高更显著（P〈0．01）；观察组CD8＋水平有显著下降（P〈0．01），对照组无明显变化。两组患儿在治疗14d后血清白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-8（IL-8），肿瘤坏死因子（TNF）-α水平相对于治疗前有明显降低，但与对照组治疗后比较，观察组上述血清炎性因子水平降低更显著（P〈0．01）。两组治疗过程中均未发生明显的药物不良反应，且观察组不良反应发生率显著低于对照组（P〈0．01）。结论：加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎能有效减轻患儿机体内炎症反应，提高免疫功能，疗效确切。