藏药“五味甘露药浴”之新考

中藏医学均是自成系统的医学体系,均具有独特的治疗理念与方法。藏药“五味甘露药浴”方在藏医中应用广泛,其主方、选材的基源和部位、配制剂量以及发酵工艺的收载与记录各异。基于藏医药治疗理念,分析藏医药古籍文献与近现代临床研究现状,探讨藏药“五味甘露药浴”的组方、功效及作用原理,阐释不同配方、剂量以及发酵工艺的“五味甘露药浴”在临床应用中的潜在价值。

基于网络药理学研究藏药五味甘露药浴颗粒治疗RA的分子作用机制

目的:基于网络药理学预测藏药五味甘露药浴颗粒治疗类风湿性关节炎(RA)的有效成分、潜在靶点及相关通路。方法:首先查阅、整理文献,及数据库筛选出五味甘露药浴颗粒中的有效化学成分,构建化合物-靶点网络。用MAS 3.0服务器获取潜在靶点和通路的相关信息,构建出靶点-通路网络。结果:通过文献查询及筛选获取了五味甘露药浴颗粒中的化学成分共99种,涉及到1 424个作用靶标,筛选后得到152个潜在靶点和71条信号通路。结论:五味甘露药浴颗粒通过参与调节免疫、炎症反应、细胞凋亡等过程来发挥抗类风湿性关节炎作用,在治疗RA中起到多成分、多靶点、多途径的协同调控作用。

藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的药效作用研究

目的:观察藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的药效作用。方法:除正常组大鼠外,采用弗氏完全佐剂造模,随机分为模型组、地塞米松组(0. 150 mg/kg)、五味甘露药浴颗粒高剂量组(11. 80 g/L)、中剂量组(5. 90 g/L)、低剂量组(2. 95 g/L),药浴组40℃药水浴30 min/d,模型组和正常组40℃温水浴30 min/d。给药四周,采用致炎后足容积测量、测定大鼠胸腺、脾脏脏器系数、HE染色法观察致炎侧足踝关节滑膜病理改变,评价藏药五味甘露药浴颗粒对AA大鼠的治疗效果。结果:与模型组比较,五味甘露药浴颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组AA大鼠原发性足肿胀度均有减轻,滑膜细胞增生、炎细胞浸润、关节软骨破坏均有不同程度的改善。结论:经藏药浴五味甘露药浴颗粒治疗后,原发性足肿胀有明显下降的趋势,踝关节病理形态有所改善,大鼠的胸腺、脾脏系数有升高的趋势,提示该药可以明显减轻关节炎症程度,增强机体的免疫功能,对类风湿关节具有抗炎消肿的治疗作用。

藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的分子作用机制研究

目的:从细胞层面观察五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠滑膜组织中细胞因子的影响以及对蛋白表达的调控作用,并探讨其中可能的分子机制。方法:除正常对照组外,大鼠采用弗氏完全佐剂(FCA)造模,随机分为模型对照组、地塞米松组(0.150 mg·kg^(-1))、五味甘露药浴颗粒高剂量组(11.80 g·L^(-1))、中剂量组(5.90 g·L^(-1))、低剂量组(2.95 g·L^(-1)),药浴组40℃药浴30 min·d^(-1),模型对照组和正常对照组40℃温水浴30 min·d^(-1)。给药四周后采用酶联反应、免疫组化法检测并分析五味甘露药浴颗粒对滑膜组织中细胞因子及蛋白表达的干预效应。结果:五味甘露药浴颗粒组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、基质金属蛋白酶(MMP-3、TIMP-1)的含量均有不同程度的下降。结论:五味甘露药浴颗粒在类风湿关节炎滑膜病理改变的过程中,通过下调致炎因子(TNF-α、IL-1、IL-6)、上调抗炎因子(IL-10)来激活体内免疫系统,抑制成纤维样滑膜细胞分泌各类细胞因子对滑膜的刺激,来控制关节滑膜炎症,达到抑制RA滑膜细胞增殖、促进细胞凋亡、抗炎、消肿、保护关节骨与软骨的目的。

藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的分子作用机制研究

目的:从细胞层面观察五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠滑膜组织中细胞因子的影响以及对蛋白表达的调控作用,并探讨其中可能的分子机制。方法:除正常对照组外,大鼠采用弗氏完全佐剂(FCA)造模,随机分为模型对照组、地塞米松组(0.150 mg·kg^(-1))、五味甘露药浴颗粒高剂量组(11.80 g·L^(-1))、中剂量组(5.90 g·L^(-1))、低剂量组(2.95 g·L^(-1)),药浴组40℃药浴30 min/d,模型对照组和正常对照组40℃温水浴30 min·d^(-1)。给药四周后采用酶联反应、免疫组化法检测并分析五味甘露药浴颗粒对滑膜组织中细胞因子及蛋白表达的干预效应。结果:五味甘露药浴颗粒组(11.8 g·L^(-1)、5.90 g·L^(-1)、2.95 g·L^(-1))大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、基质金属蛋白酶(MMP-3、TIMP-1)的含量均有不同程度的下降(P<0.05~0.01)。结论:五味甘露药浴颗粒在类风湿关节炎滑膜病理改变的过程中,通过下调致炎因子(TNF-α、IL-1、IL-6)等、上调抗炎因子(IL-10)来激活体内免疫系统,抑制成纤维样滑膜细胞分泌各类细胞因子对滑膜的刺激,来控制关节滑膜炎症,达到抑制RA滑膜细胞增殖、促进细胞凋亡、抗炎、消肿、保护关节骨与软骨的目的。

HPLC法测定藏药五味甘露药浴颗粒中槲皮素、山柰素和盐酸麻黄碱

目的采用RP-HPLC法测定藏药五味甘露药浴颗粒（麻黄、刺柏、大籽蒿、水柏枝、烈香杜鹃）中槲皮素、山柰素和盐酸麻黄碱的量。方法槲皮素、山柰素的测定,采用Zorbax SB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液（20∶80）;检测波长360 nm;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃。盐酸麻黄碱的测定,流动相为乙腈-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）;检测波长为210 nm;体积流量1.0 m L/min。结果槲皮素、山柰素分别在0.019 8~0.990 0μg（r=0.999 8）、0.014 4~0.721 2μg（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.5%、99.3%,RSD分别为1.4%、1.6%（n=6）。盐酸麻黄碱在0.016 592~0.248 9μg（r=0.999 9）范围内线性良好。平均回收率为101.4%,RSD为1.4%（n=6）。结论本方法操作简单、结果准确,重复性好,可用于该药的质量控制。

利用液相和质谱联用技术以及网络药理学分析藏药五味甘露药浴汤散治疗痛风关节炎的有效成分及作用机制

目的:探究五味甘露药浴汤散治疗痛风关节炎(GA)的有效成分和潜在机制。方法:利用超高效液相色谱⁃四极杆⁃静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC⁃Q⁃Exactive⁃Orbitrap⁃MS)鉴定五味甘露药浴汤散的主要化学成分,通过Swiss Target数据库筛选成分靶点,运用GeneCards,OMIM等数据库筛选疾病靶点,采用STRING平台构建PPI网络选取关键靶点,利用DAVID数据库对药物和疾病共有靶点进行GO和KEGG通路富集,讨论五味甘露药浴汤散治疗GA的作用机制。此外,通过Cytoscape 3.9.1软件构建“药物⁃成分⁃靶点⁃疾病”网络,并利用Maestro软件对成分与核心靶点进行分子对接,筛选出有效成分。结果:共鉴定出52个化合物,包括24个黄酮类成分、5个生物碱类成分、10个有机酸类成分、5个酚类成分、5个苯丙素类成分、2个萜类成分以及1个烷烃类成分。网络药理学分析发现五味甘露药浴汤散成分靶点520个,交集靶点141个,筛选出5个核心靶点(SRC,STAT3,PIK3CA,MAPK1,HSP90AA1)。分子对接结果显示木犀草苷等6个成分与5个核心靶点具有较好的结合能力。结论:五味甘露药浴汤散治疗GA的活性成分为木犀草苷、海波拉亭⁃7⁃O⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖苷、海波拉亭⁃7⁃O⁃β⁃D⁃吡喃木糖苷、槲皮素、柚皮素和木犀草素,其机制可能与这些成分作用于SRC,STAT3,PIK3CA等靶点调控PI3K⁃Akt,Ras,MAPK等信号通路有关。

藏族药五味甘露药浴散加减方对佐剂关节炎大鼠药效及血清NF-κB,TNF-α,IL-1,EGF的影响

目的:观察藏族药五味甘露药浴散加减方对佐剂关节炎大鼠的药效及其对大鼠血清核因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1(IL^(-1)),表皮生长因子(EGF)水平的影响。方法:SD健康大鼠60只,随机选取10只作为正常组,除正常组外,采用弗氏完全佐剂关节炎(AA)大鼠模型,随机分为模型组,地塞米松组(0.150 mg·kg^(-1),ig),五味甘露药浴散加减方高、中、低剂量组(104.00,52.00,26.00 g·L^(-1)),药浴组每天40℃药浴30 min,模型组和正常组每天40℃温水浴30 min,给药4周,用致炎后足跖肿胀度,苏木素-伊红(HE)染色法观察致炎侧足踝关节滑膜病理改变评价藏族药五味甘露药浴散加减方对AA大鼠的治疗效果,测定大鼠胸腺、脾脏脏器系数,酶联免疫吸附测定(ELISA)测定血清NF-κB,TNF-α,IL^(-1),EGF水平。结果:与正常组比较,模型组AA大鼠致炎侧足跖肿胀度明显增大,滑膜细胞增厚、巨噬细胞增生和炎细胞浸润,血清中NF-κB,TNF-α,IL^(-1),EGF水平明显升高,脾脏系数、胸腺系数明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和五味甘露药浴散加减方高剂量组能明显减小AA大鼠致炎侧足跖肿胀度,能改善滑膜细胞增厚、巨噬细胞增生和炎细胞浸润,血清中NF-κB,TNF-α,IL^(-1)水平明显降低(P<0.05,P<0.01),五味甘露药浴散加减方中剂量组NF-κB水平也明显降低(P<0.05,P<0.01),五味甘露药浴散加减方各剂量组大鼠血清中EGF水平无明显变化,脾脏系数明显增大(P<0.05),高、中剂量组胸腺系数明显增大(P<0.05)。结论:藏族药五味甘露药浴散加减方能有效的减小佐剂性关节炎大鼠致炎侧足跖肿胀度,改善AA大鼠踝关节滑膜炎病变,高剂量效果最好,其机制可能与降低血清中NF-κB,TNF-α,IL^(-1)的水平、调节脾脏和胸腺的功能有关。

五味甘露药浴颗粒对脑卒中偏瘫患者功能康复的临床研究

目的评价五味甘露药浴颗粒对脑卒中偏瘫功能康复及炎症介质与血液流变学指标的影响。方法选取2020年2月~2021年2月某院诊治符合研究标准的110例脑卒中偏瘫患者,采用随机数字表法分为对照组(53例)和观察组(57例),对照组采用该院脑血管病常规治疗结合早期康复训练,观察组在对照组基础上结合五味甘露药浴颗粒治疗,疗程均为12周;采用国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、Fugl-Meyer运动功能评分表(Fugl-Meyer Assessment Scale,FMA)、修订的Barthel指数法、中医症状积分、焦虑自评量表(SAS)评分以及抑郁自评量表(SDS)于治疗前后各评价一次;检测治疗前后缓释肽(BK)、降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)及血液流变学指标。结果两组患者治疗后NIHSS评分、中医症状积分、SAS评分及SDS评分均降低,且观察组低于对照组;FMA评分和Barthel指数均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组患者BK与SP水平均低于对照组,CGRP水平高于对照组(P<0.05)。观察组患者全血黏度、纤维蛋白原及血小板积聚率均低于对照组(P<0.05)。观察组临床总有效率(87.72%)高于对照组总有效率(77.36%,P<0.05)。结论在西医常规治疗基础上结合五味甘露药浴颗粒治疗可以更好改善脑卒中偏瘫患者神经功能、运动功能及日常生活能力,提高患者生活能力。其作用机制可能与抑制患者神经源性炎症反应,改善血液流变学有关。