五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响

目的明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、阳性药雷公藤多苷片(40 mg/kg)组,每组10只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎大鼠模型。致炎后第12天灌胃给药,连续12 d。实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA的表达,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果与模型组相比,五味温通除痹胶囊(1.60、3.20 g/kg)不仅可减轻佐剂性关节炎大鼠关节病理损伤程度,还可显著升高Beclin-1、LC3-ⅡmRNA和蛋白的表达水平。结论五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与促进细胞自噬,减少滑膜细胞的过度增殖,从而减轻关节软骨损伤有关。

五味温通除痹胶囊促进佐剂性关节炎大鼠滑膜组织细胞自噬活性及机制

目的观察五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素白蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路关键基因表达的影响,探讨其防治类风湿性关节炎的可能机制。方法SD大鼠,随机分为正常组、模型组、(0.80、1.60、3.20)g/kg五味温通除痹胶囊治疗组、40mg/kg雷公藤多甙片治疗组,每组10只。除正常组外,采用Freund完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎后第12天灌胃给药,每天1次,连续12d。实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理组织学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中PI3K、AKT、mTOR、p70s6、beclin1mRNA的水平,免疫荧光组织化学染色和Westernblot法检测滑膜组织中PI3K、AKT、磷酸化的AKT(p-AKT)、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6、beclin1蛋白的表达。结果与模型组相比,(1.60、3.20)g/kg五味温通除痹胶囊治疗组不仅可减轻AA大鼠踝关节病理组织学损伤程度,还可降低PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6的水平,提高beclin1的水平。结论五味温通除痹胶囊可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,上调AA大鼠滑膜细胞自噬活性,减轻关节软骨损伤。

五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对AS患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达的影响

目的:观察五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对督寒型强直性脊柱炎(AS)患者的临床疗效及对外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达的影响。方法:将78例督寒型AS患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,治疗组给予五味温通除痹胶囊口服并联合中药熏蒸治疗;对照组给予柳氮磺胺吡啶口服,2组疗程均为8周。对2组中医证候评分、总体疗效评价、中医证候疗效评价及CD4^+CD25^+Treg等实验室指标进行观察。结果:治疗组第4、8周有效率明显高于对照组,中医证候显效率及总有效率高于对照组;与对照组比较,治疗组患者治疗后中医证候积分、总体以及腰背痛VAS评分、BASDAI、BASFI功能评分、ASDAS评分均显著降低。结论:五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸能显著上调督寒型AS外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达,有效改善AS患者临床症状。

五味温通除痹胶囊的UPLC指纹图谱研究

目的 建立五味温通除痹胶囊的指纹图谱评价体系,完善该制剂的质量控制标准。方法 以淫羊藿苷、黄芩苷、桂皮醛为指标成分,采用UPLC法建立10个不同批次五味温通除痹胶囊指纹图谱,使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”软件对相似度进行评价。结果 五味温通除痹胶囊的UPLC指纹图谱共有18个共有特征峰;对淫羊藿、黄芩、桂枝等部分共有峰进行归属;10批五味温通除痹胶囊样品的相似度均大于0.99。结论 所建指纹图谱较好的反映了五味温通除痹胶囊的整体特征,为完善该制剂的全面质量控制提供研究基础。

正交试验结合UPLC法优选五味温通除痹胶囊醇提工艺

目的:优选出五味温通除痹胶囊最佳的醇提工艺。方法:采用正交试验法结合超高效液相色谱(UPLC),以黄芩苷、淫羊藿苷的含量和干浸膏得率为综合指标进行评判,通过正交试验设计L9(34),考察乙醇浓度、乙醇体积、提取时间和提取次数4个因素对五味温通除痹胶囊醇提工艺的影响。结果:五味温通除痹胶囊最佳醇提工艺为70%乙醇,12倍乙醇,提取3次,每次1 h。结论:本法简便、重复性好,为五味温通除痹胶囊的醇提工艺确定提供了依据。

超高效液相色谱法测定五味温通除痹胶囊淫羊藿苷含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)测定五味温通除痹胶囊中淫羊藿苷含量的方法。方法:采用UPLC法测定五味温通除痹胶囊的君药淫羊藿中淫羊藿苷的含量,色谱条件:Acquity BEH C18柱(100mm×2.1mm,1.7μm);检测波长:270nm;流动相:乙腈-水(27:73);流速:0.2m L·min^(-1);进样量:1.0μL;柱温:22℃。结果:淫羊藿苷保留时间为5.4min,淫羊藿苷于0.016-0.160mg间呈良好线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为98.36%,RSD=2.07%(n=6);精密度良好,RSD<2%;重复性良好,RSD<2%;限定五味温通除痹胶囊淫羊藿苷含量不得低于0.00mg/g。结论:此方法的结果准确,重复性良好,可以作为五味温通除痹胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。

UPLC法测定五味温通除痹胶囊中黄芩苷的含量

目的:建立五味温通除痹胶囊中黄芩苷的含量测定方法。方法:采用超高液相色谱法,以Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,乙腈-0.1%磷酸(25∶75)为流动相;流速:0.25 mL/min;柱温:30℃;检测波长280 nm。结果:黄芩苷在0.095 5 mg^0.955 mg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.21%,RSD=1.16%。结论:该法准确可靠、重复性好,可用于该制剂中黄芩苷的含量测定。

新风胶囊联合五味温通除痹胶囊改善类风湿关节炎寒湿痹阻证患者感受的关联规则分析研究

目的:运用关联规则技术分析新风胶囊(XFC)联合五味温通除痹胶囊(WWT)对类风湿关节炎(RA)寒湿证患者感受(SPP)及免疫炎症和凝血纤溶指标的影响。方法:收集2020年9月-2021年3月风湿科住院RA寒湿证患者120例,填写患者感受量表:RA患者症状积分、RA寒湿证证候积分、疾病活动指数28评分(DAS28)、视觉模拟量表(VAS)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、简明健康状况调查问卷表(SF-36)。使用关联规则分析等方法观察XFC+WWT对SPP及免疫炎症及凝血纤溶指标的影响。结果:①常模组相比,120例RA寒湿组患者SPP的SAS、SDS、VAS、DAS28、脾虚湿盛证积分和寒湿证积分升高(P<0.05),SF-36量表中的健康状况 (GH)、生理职能 (RP)、生理机能 (PF)、社会功能 (SF)、情感职能 (RE)、精神健康 (MH)、精力 (VT)降低(P<0.05)。相关性分析显示,寒湿证积分与血小板(PLT)、D-二聚体(D-D)呈正相关,脾虚湿盛证积分与红细胞沉降率(ESR)呈正相关,RA症状积分与类风湿因子(RF)呈负相关,SAS与补体C4呈正相关、与抗环瓜氨酸肽抗体(CCP-AB)呈负相关,SDS与ESR呈正相关,VAS与补体C4呈负相关,RP与D-D呈正相关,GH与RF呈负相关,PF与CCP-AB呈正相关,SF-36量表中的躯体疼痛(BP)与补体C3呈负相关,MH与免疫球蛋白G(IgG)呈负相关,SF与凝血酶原时间(PT)呈正相关,PF与PLT正相关(P<0.05)。②与治疗前相比,RA寒湿痹阻证患者治疗后寒湿证积分、脾虚湿盛证积分、SAS、SDS、VAS、ESR、CRP、补体C3、补体C4、PLT、纤维蛋白原(FBG)和D-D显著降低(P<0.05),RP、PF、SF、BP、RE、MH和凝血酶时间(TT)显著升高(P<0.05)。③关联规则结果显示,XFC+WWT与SPP、免疫炎症及凝血纤溶指标的改善的支持度均大于45%,置信度均大于60%,提升度均大于1,有强关联性。结论:RA寒湿痹阻证患者SPP存在异常,且与免疫炎症及凝血纤溶指标具有相关性,XFC联合WWT能改善RA寒湿证患者的免疫炎症及纤溶凝血指标指标,显著改善RA寒湿痹阻患者的SPP,提高生活质量,其机制有待进一步研究。

五味温通除痹胶囊治疗痹病寒湿痹阻证探讨

五味温通除痹胶囊是刘健教授在继承新安医家治痹经验,立足病证结合、方证对应的基础上,创制的具有健脾温阳,散寒止痛功效的复方制剂。由茯苓、淫羊藿、片姜黄、桂枝、黄芩组成,临床用于治疗痹病寒湿痹阻证。研究表明,五味温通除痹胶囊能有效改善痹病寒湿痹阻证患者的临床症状和患者感受,延缓病情发展,降低终点事件的发生,并能改善患者免疫炎症水平。