内质网分子伴侣糖调节蛋白94在非酒精性脂肪肝中的表达及意义

目的:检测非酒精性脂肪肝患者肝组织中糖调节蛋白94的表达情况,探讨非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fattyliver disease,NAFLD)的发病机制.方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法检测脂肪肝组和正常对照组肝组织中糖调节蛋白94基因和蛋白表达,HE染色观察肝脏脂肪变性、炎性活动和坏死,并进行相关分析.结果:非酒精性脂肪肝组脂肪变性、炎症评分及坏死评分较正常对照组明显增加,差异具有统计学意义(3.89±0.32 vs 0.20±0.4;3.67±0.49 vs 0;0.44±0.51 vs 0,P<0.01或0.05).与正常组比较,脂肪肝患者肝组织糖调节蛋白94mRNA和蛋白表达明显增强(0.86±0.02 vs 0.37±0.03;0.34±0.01 vs 0.31±0.01,均P<0.01).糖调节蛋白94mRNA和蛋白表达与脂肪变性、炎症评分及坏死评分明显呈正相关(P<0.01).结论:非酒精脂肪肝引起的肝脏损害可能与糖调节蛋白94表达有关.

Wzz酶对O抗原糖链聚合度的调控

革兰氏阴性细菌表面的O抗原在信号识别、黏附、免疫逃避等过程中发挥着重要作用。根据翻转酶的不同,O抗原的合成可划分为3种机制,其中依赖于Wzy的合成途径(Wzy-dependent)较为普遍。该机制中,wzz基因参与调节O抗原多糖的聚合度。O抗原糖链能够影响致病菌的抗原性并不同程度的刺激免疫系统。基于Wzz的蛋白晶体结构,对wzz基因进行分子改造可以使菌株合成不同大小的O抗原糖链。利用病原菌的O抗原与特定载体蛋白结合而成的糖缀合物疫苗,既具有很好的靶向性,又有较强的免疫原性。因此了解Wzz(调节糖链长短的蛋白)的功能、结构及作用机制对今后糖缀合物疫苗的开发与生产具有重要意义。

高糖通过ERK_(1/2)途径调节足细胞产生明胶酶B

目的 探讨高糖持续刺激对足细胞培养上清液明胶酶活性、Ⅳ型胶原的影响及可能的信号途径。方法 小鼠足细胞系分为正常糖组、高糖组和甘露醇高渗对照组。应用明胶酶谱法观察三组细胞培养液上清明胶酶活性的动态变化,Western印迹分析法检测细胞培养液上清中Ⅳ型胶原α5链蛋白水平及足细胞ERK信号途径活化的变化。RT-PCR方法检测MMP-9 mRNA的表达。结果正常糖组和甘露醇高渗对照组培养液上清MMP-2和MMP-9活性在10天实验时间内无明显变化。高糖组细胞培养液上清MMP-2的活性没有明显变化;MMP-9活性于第2天开始升高,第3天达高峰为正常糖组的144.2±18.7%(P=0.006),第5天下降,第7天回到基础水平为正常糖组的76.6%±16.4%(P=0.218),直至第10天。足细胞培养上清中有较高基础水平的Ⅳ型胶原α5链蛋白;高糖组细胞培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白表达第2天开始下降,第3天达最低水平41.9%±25.5%(P=0.047),第5天回升到基础水平持续至第7天。上清MMP-9的活性与Ⅳ型胶原α5链蛋白的表达量呈负相关(r=-0.577,P=0.006)。正常糖组和甘露醇高渗对照组细胞培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白无变化。高糖刺激足细胞2天MMP-9 mRNA水平增加为正常糖组的199.8%±40.2%(P=0.003),刺激5天时为正常糖组的90.9±8.8%(P=0.411)。高糖刺激足细胞30 min可以活化ERK1/2,6 h达高峰,持续至24 h,48 h降至基础水平;在足细胞上未能检测到p38和JNK活化。ERK活化特异抑制剂PD98059预处理细胞后,能阻断高糖引起的MMP-9的活性和MMP-9 mRNA增加及Ⅳ型胶原α5链蛋白的下降。结论 ERK信号传导途径介导了高糖刺激足细胞MMP-9生成及相应的Ⅳ型胶原α5链蛋白动态反向改变。

子宫内膜癌术后感染影响因素及外周血Th17/Treg和CA125与YKL-40水平变化

目的 探究子宫内膜癌术后感染影响因素及外周血辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、糖链抗原125(CA125)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)水平诊断术后感染的临床价值。方法 选取2019年5月-2021年3月中国医科大学附属盛京医院收治的128例子宫内膜癌手术患者为研究对象,根据其术后是否发生感染分为感染组25例,非感染组103例。分析子宫内膜癌术后感染影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价外周血Th17/Treg、CA125、YKL-40水平对子宫内膜癌术后感染的诊断价值。结果 多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期、手术方式、接受化疗为子宫内膜癌术后感染影响因素(P<0.05);术后1 d,两组患者外周血Th17/Treg、CA125、YKL-40水平均明显升高,且感染组高于非感染组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,术后1 d外周血Th17/Treg、CA125、YKL-40水平联合诊断子宫内膜癌术后感染的曲线下面积(AUC)为0.869,预测效能较高。结论 临床分期、手术方式、接受化疗为子宫内膜癌术后感染影响因素,且子宫内膜癌术后感染患者术后1 d外周血Th17/Treg、CA125、YKL-40水平明显升高,临床检测其水平,有助于早期及时采取针对措施,改善患者预后。