目的：设计人工锌指蛋白（zinc finger protein，ZFP）特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白（hepatitis B virus X protein，HBX）基因启动子，观察zFP在体外对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）转录的抑制。方法：将pcDNA3．1-ZFP转染...目的：设计人工锌指蛋白（zinc finger protein，ZFP）特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白（hepatitis B virus X protein，HBX）基因启动子，观察zFP在体外对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）转录的抑制。方法：将pcDNA3．1-ZFP转染入HepG2．2．15细胞24h后，用Western blot检测HBX蛋白的含量：用ELISA和real—time PCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原（hepatitis B eantigen，HBeAg）和HBV DNA含量，用RT—PCR检测胞内HBV mRNA水平。结果：ZFP可抑制HepG2．2．15细胞中HBX的表达；相比空质粒组，ZFP组细胞培养上清液中HBV DNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51．7％（t=23．079，P=0．000，95％CI=44．98％-58．52％）、33．8％（t=3．887，P=-0．003，95％CI=12．12％～55．48％）；细胞内HBVmRNA也明显减少（t=3．616，P=0．022）。结论：人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2．2．15细胞中有效抑制HBV转录。展开更多
文摘目的：设计人工锌指蛋白（zinc finger protein，ZFP）特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白（hepatitis B virus X protein，HBX）基因启动子，观察zFP在体外对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）转录的抑制。方法：将pcDNA3．1-ZFP转染入HepG2．2．15细胞24h后，用Western blot检测HBX蛋白的含量：用ELISA和real—time PCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原（hepatitis B eantigen，HBeAg）和HBV DNA含量，用RT—PCR检测胞内HBV mRNA水平。结果：ZFP可抑制HepG2．2．15细胞中HBX的表达；相比空质粒组，ZFP组细胞培养上清液中HBV DNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51．7％（t=23．079，P=0．000，95％CI=44．98％-58．52％）、33．8％（t=3．887，P=-0．003，95％CI=12．12％～55．48％）；细胞内HBVmRNA也明显减少（t=3．616，P=0．022）。结论：人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2．2．15细胞中有效抑制HBV转录。
