乙型肝炎患者HBV X蛋白特异性CTL表位变异分析

目的比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎与慢性重型乙型肝炎HBVX蛋白特异性CTL表位变异差异,探讨乙型肝炎重症化和慢性化的可能机理。方法对393例乙型肝炎患者的血清样本进行HLA-A2分型;用巢式PCR扩增血清HBV前S/S基因与X基因并对PCR产物进行序列测定;根据HBV前S/S基因序列,用VirusBlast软件鉴定患者感染的HBV基因型;用Vector NTI软件对目前已知的6个HLA-A2限制性X蛋白特异性CTL表位序列分析,对患者各个表位变异的差异进行卡方检验。结果190例(48.35%)患者HLA-A2阳性,其中急性乙型肝炎(AHB)67例,慢性乙型肝炎(CHB)52例,慢性重型乙型肝炎(CSHB)71例。CTL表位变异分析结果如下:对三组所有患者进行比较时,X92-100表位变异发生频数三组患者比较有非常显著性差异(P<0.01);对三组中HBV C基因型患者进行比较时,X92-100和X115-123表位变异发生频数三组患者比较有显著性差异(P<0.05);对三组中HBV B基因型患者进行比较时,各表位变异发生频数三组患者比较无显著差异。结论某些HBVX蛋白特异性CTL表位在AHB、CHB和CSHB患者间变异有明显差异且受病毒基因型影响,CTL表位变异可能与乙型肝炎的重症化和慢性化机制相关。

黄芩总黄酮对人骨关节炎软骨细胞增殖凋亡及COL10A1/SOX9信号通路的影响

目的:探讨黄芩总黄酮对人骨关节炎(OA)软骨细胞增殖凋亡及X型胶原蛋白α1链(COL10A1)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)信号通路的影响。方法:从5例行膝关节置换术的OA患者的关节软骨分离软骨细胞,用甲苯胺蓝染色进行鉴定。实验分为对照组、黄芩总黄酮低、中、高剂量组(25,50,100 mg·L-1)和塞来昔布组(9 mg·L-1)。噻唑蓝(MTT)法测定人OA软骨细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,免疫印迹法检测人OA软骨细胞中COL10A1、SOX9、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:人OA软骨细胞附着于培养皿后呈多边形或长条形,甲苯胺蓝染色可见OA软骨细胞胞浆以蓝紫色为主,异染颗粒散布于细胞间或细胞周围;与对照组比较,黄芩总黄酮低、中、高剂量组和塞来昔布组人OA软骨细胞增殖率、COL10A1、SOX9、Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax水平升高,凋亡率、ERK1/2和Bax蛋白水平降低(P<0.05);随着黄芩总黄酮浓度的增加,黄芩总黄酮各剂量组人OA软骨细胞增殖率、COL10A1、SOX9、Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax水平逐渐升高,凋亡率、ERK1/2和Bax蛋白水平逐渐降低(P<0.05);黄芩总黄酮高剂量组与塞来昔布组作用相似,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芩总黄酮可能通过激活COL10A1/SOX9信号通路,抑制人OA软骨细胞凋亡,促进OA软骨细胞增殖。

HBx介导HBV相关原发性肝癌的研究进展

原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种恶性程度极高的肿瘤,具有生长速度快、易转移、复发和广泛的耐药性等特征^[1]。慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是HCC发生发展的一个主要的危险因素,感染者发生HCC的危险性是无感染者的200多倍。