Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构...Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构建正常或突变NgBR启动子,通过双荧光素酶报告基因系统检测LXR激动剂对启动子活性的影响;采用CRISPR-CAS9方法建立LXRα或LXRβ基因敲除的HepG2细胞系,通过Western Blot检测相关基因的表达变化;向ApoE-/-小鼠腹腔注射LXR激动剂T0901317,分析小鼠肝脏中NgBR的表达变化。结果发现,LXR激动剂能够通过激活LXR促进NgBR蛋白的表达,该诱导作用是以LXRE依赖的方式进行的,并且LXR的表达发挥着重要作用。在体内实验中,也证明了LXR激动剂T0901317上调NgBR蛋白表达。结果表明,NgBR是LXR的靶蛋白,LXR通过结合NgBR启动子LXRE序列促进其转录和翻译。展开更多
孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是一种调控生物体异源性/内源性物质代谢的核受体。环境污染物可介由PXR改变人体代谢稳态进而增加多种代谢性疾病风险,但目前尚缺乏一种灵敏、稳定的检测化学品PXR结合活性的体外实验方法。本研究基...孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是一种调控生物体异源性/内源性物质代谢的核受体。环境污染物可介由PXR改变人体代谢稳态进而增加多种代谢性疾病风险,但目前尚缺乏一种灵敏、稳定的检测化学品PXR结合活性的体外实验方法。本研究基于重组基因技术构建了带有海肾荧光素酶基因的pBIND-hPXR表达质粒,将其与插入上游激活序列的荧光素酶报告基因质粒GAL4-UAS-Luc共转染至HEK 293T细胞,最终成功建立了一种可筛查化学品人孕烷X受体激动/拮抗作用的双荧光素酶报告基因检测方法,该方法具有灵敏度高、适用范围广和重复性好的特点。进一步检测了9种典型有机磷酸酯(organophosphate esters,OPEs)阻燃剂的hPXR激活效应,结果表明芳基类OPEs的激活活性强于氯代和烷基类OPEs,其中磷酸三甲苯酯(TCP)的20%最大效应浓度(基于阳性对照)及最大激活效应值和已知的hPXR强激动剂利福平相当。此外,首次发现2-乙基己基二苯基磷酸酯(EHDPP)在略高于人体血液最高检出浓度(80 nmol·L^(-1))的染毒组(316.2 nmol·L^(-1))即表现出显著的hPXR激活效应。本方法有助于研究化学品对PXR受体信号通路的扰动作用,并为OPEs类化学品的健康风险评估提供科学依据。展开更多
孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族的成员之一,其本质是配体激活型转录因子。PXR高表达于肝脏和肠道,在肾脏和脑等器官也有表达。自发现以来,PXR就被公认为是外源物质和内源物质的感受器,在激活状态下,可以调节药物代...孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族的成员之一,其本质是配体激活型转录因子。PXR高表达于肝脏和肠道,在肾脏和脑等器官也有表达。自发现以来,PXR就被公认为是外源物质和内源物质的感受器,在激活状态下,可以调节药物代谢酶、转运蛋白和其他代谢相关蛋白质的表达,从而起到解毒等作用。由于PXR高表达于肝脏和肠道,所以其在消化系统的功能被大量研究报道。近年来,随着PXR在越来越多的脑区被检测到,其在中枢神经系统中的生理和病生理功能被广泛关注。本文主要就PXR在中枢神经系统的表达谱、在血脑屏障中的功能,以及其与神经疾病和神经毒性的关系,与行为学的相关性等进行综述。上述内容一方面可指导临床合理用药,另一方面可拓展科研工作者新药研发的思路;同时,也为未来PXR在中枢神经系统中功能的进一步研究提供了理论基础和方法思路。展开更多
文摘Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构建正常或突变NgBR启动子,通过双荧光素酶报告基因系统检测LXR激动剂对启动子活性的影响;采用CRISPR-CAS9方法建立LXRα或LXRβ基因敲除的HepG2细胞系,通过Western Blot检测相关基因的表达变化;向ApoE-/-小鼠腹腔注射LXR激动剂T0901317,分析小鼠肝脏中NgBR的表达变化。结果发现,LXR激动剂能够通过激活LXR促进NgBR蛋白的表达,该诱导作用是以LXRE依赖的方式进行的,并且LXR的表达发挥着重要作用。在体内实验中,也证明了LXR激动剂T0901317上调NgBR蛋白表达。结果表明,NgBR是LXR的靶蛋白,LXR通过结合NgBR启动子LXRE序列促进其转录和翻译。
文摘孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族的成员之一,其本质是配体激活型转录因子。PXR高表达于肝脏和肠道,在肾脏和脑等器官也有表达。自发现以来,PXR就被公认为是外源物质和内源物质的感受器,在激活状态下,可以调节药物代谢酶、转运蛋白和其他代谢相关蛋白质的表达,从而起到解毒等作用。由于PXR高表达于肝脏和肠道,所以其在消化系统的功能被大量研究报道。近年来,随着PXR在越来越多的脑区被检测到,其在中枢神经系统中的生理和病生理功能被广泛关注。本文主要就PXR在中枢神经系统的表达谱、在血脑屏障中的功能,以及其与神经疾病和神经毒性的关系,与行为学的相关性等进行综述。上述内容一方面可指导临床合理用药,另一方面可拓展科研工作者新药研发的思路;同时,也为未来PXR在中枢神经系统中功能的进一步研究提供了理论基础和方法思路。