去泛素化酶X染色体连锁的泛素特异肽酶9的研究进展

X染色体连锁的泛素特异肽酶9(ubiquitin-specifitin peptidase 9 x-Linked,USP9X)是去泛素化酶中的一种。泛素化与去泛素化是重要的蛋白质翻译后修饰,去泛素化酶能从特异性底物上移除泛素异肽酶类从而逆转泛素化进程。USP9X在许多生物进程(包括胚胎发育、细胞黏着与极化、凋亡、转录调控等)中都有着重要的作用。迄今为止,已发现USP9X在多种类型的恶性肿瘤中都存在着表达异常,而且与肿瘤的分期及预后相关,甚至还可能参与了肿瘤化疗的耐药,是近年来研究的热点。因此,针对USP9X的靶点治疗将会为难治性肿瘤开辟出一条新的路径,对其更进一步研究有着深远意义。

下调USP9X表达对胃癌AGS细胞凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨下调X染色体连锁的泛素特异性肽酶9(USP9X)表达对胃癌细胞凋亡和侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:将USP9X小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA转染胃癌AGS细胞,将细胞分为3组:未处理的AGS组、对照siRNA组和USP9X siRNA组。采用real-time PCR和Western blot检测不同处理组的胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术和Boyden小室分别检测不同处理组胃癌AGS细胞的凋亡和侵袭能力;Western blot检测凋亡和侵袭相关蛋白的表达水平。结果:USP9X siRNA显著下调胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达水平。USP9X表达下调显著诱导胃癌细胞凋亡,并降低胃癌细胞的侵袭能力。USP9X表达下调显著降低Mcl-1和MMP-2的表达,但明显上调Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论:USP9X可能是胃癌细胞凋亡和侵袭的关键调控因子。

USP9X基因表达下调对胃癌AGS细胞株增殖和细胞周期的影响

目的探讨X染色体连锁的泛素特异性肽酶9(USP9X)在胃癌中的表达,分析其表达下调对胃癌细胞增殖和周期的影响。方法利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测胃癌组织和胃癌AGS细胞及正常胃黏膜组织和细胞中USP9X mRNA和蛋白的表达。将USP9X siRNA转染胃癌AGS细胞株,分析转染前后胃癌AGS细胞株中USP9X蛋白的差异表达。进而采用流式细胞术和CCK-8检测转染前后AGS细胞的细胞周期和细胞增殖的变化。结果胃癌组织和细胞中的USP9X mRNA和蛋白表达显著高于正常对照。USP9X siRNA能够显著下调胃癌AGS细胞中的USP9X蛋白表达。USP9X基因的表达下调使AGS细胞周期静止在G0/G1期,并显著抑制胃癌AGS细胞的增殖能力(均P<0.05)。结论USP9X可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用,并可能成为胃癌细胞增殖和周期的关键调控因子。

USP9X与MCL-1在鼻咽癌中表达及预后分析

目的探讨X染色体连锁的泛素特异肽酶9(USP9X)与髓细胞白血病基因(MCL)-1在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌预后的相关性。方法选取鼻咽癌患者100例,提取其癌变组织作为观察组,再提取100份健康体检人群的鼻咽组织作为对照组,采用免疫组化Envision法检测两组USP9X与MCL-1的表达情况。观察不同的肿瘤分期、蔓延程度及有无淋巴结转移鼻咽癌患者USP9X与MCL-1的表达情况。对USP9X与MCL-1阳性的鼻咽癌患者进行放化疗,并提取其癌细胞进行细胞培养,采用Western印迹进行蛋白定量分析,观察USP9X与MCL-1阳性的鼻咽癌患者放化疗前后USP9X与MCL-1的表达情况。结果观察组USP9X阳性的患者有72例,对照组仅有2例,两组差异有统计学意义(χ^(2)=6.937,P=0.001);观察组MCL-1阳性的患者有75例,对照组仅有1例,两组差异有统计学意义(χ^(2)=7.634,P=0.001);USP9X及MCL-1与肿瘤分期、蔓延程度及淋巴转移有关,且病情越重,USP9X与MCL-1表达越明显(P<0.05);USP9X与MCL-1阳性的鼻咽癌患者放化疗后表达明显下降(P<0.05),放化疗后蛋白表达量也明显下降(P<0.05)。结论USP9X与MCL-1在鼻咽癌中呈高表达,且在放化疗后表达显著降低,可作为临床评价鼻咽癌预后的诊断标准之一。