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X病毒来袭 防控是关键
1
作者 李青凤 李亚品 宋文静 《解放军健康》 2024年第2期22-22,共1页
随着国际交流日益频繁,新型病毒传播速度随之加快,人类面临更多未知病毒挑战。随着X病毒持续引发关注,世卫组织总干事谭德赛向世界发出警告:大流行病X疾病暴发,只是时间问题。对此,我们应时刻提高警惕,保持科学理性态度,既要高度重视病... 随着国际交流日益频繁,新型病毒传播速度随之加快,人类面临更多未知病毒挑战。随着X病毒持续引发关注,世卫组织总干事谭德赛向世界发出警告:大流行病X疾病暴发,只是时间问题。对此,我们应时刻提高警惕,保持科学理性态度,既要高度重视病毒潜在风险,又不要为之过度恐慌,关键要了解掌握X病毒的特点规律,切实加强相关防范工作。 展开更多
关键词 流行病 世卫组织 传播速度 x病毒 未知病毒 疾病暴发 新型病毒 国际交流
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兼抗黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒弱毒疫苗的创制
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作者 刘春菊 杜传印 +5 位作者 魏军 刘宏 李斐 方敏 于成明 原雪峰 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2023年第1期44-50,共7页
黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯X病毒(PVX)在烟草中普遍存在、危害严重,对烟草产业健康发展有重大影响。为预防田间烟草上黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒,需要构建能够同时预防CMV和PVX的弱毒疫苗。本研究首先构建了CMV RNA2的2b蛋白提前终止突... 黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯X病毒(PVX)在烟草中普遍存在、危害严重,对烟草产业健康发展有重大影响。为预防田间烟草上黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒,需要构建能够同时预防CMV和PVX的弱毒疫苗。本研究首先构建了CMV RNA2的2b蛋白提前终止突变体pCB301-CMVFny-R2-2bPT,在此突变体中插入200 bp的PVX保守序列(5890-6089)获得突变体质粒pCB301-CMVFny-R2-2bPT-PVX5890-6089。该突变体质粒与含野生型CMVFny RNA1和CMVFny RNA3的质粒等量混合后通过农杆菌浸润方法分别接种中烟100、红花大金元和林烟草,接种后烟草症状与野生型CMVFny-RNA1+RNA2+RNA3混合接种烟草症状相比显示弱侵染性。疫苗遗传稳定性检测证实疫苗载体中插入的PVX 200 bp保守片段稳定存在,CMV和PVX强毒株系攻毒试验表明该弱毒疫苗在中烟100上对CMV和PVX同时具备交叉保护作用。 展开更多
关键词 交叉保护 黄瓜花叶病毒 马铃薯x病毒 弱毒疫苗
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利用马铃薯X病毒表达载体在植物中表达非洲猪瘟病毒p30蛋白
3
作者 武晓云 范馨月 +6 位作者 栾雅梦 柴孟竹 姜雪 杨英帅 王宇婷 郭亚婷 程晓非 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期21-27,78,共8页
由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的非洲猪瘟疫病(ASF)具有极高发病率和致死率,是我国一类动物疫病,对我国养猪产业造成重大威胁和巨大经济损失。p30蛋白是ASFV最主要结构蛋白之一,具有强烈免疫原性,是ASFV疫苗研发... 由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的非洲猪瘟疫病(ASF)具有极高发病率和致死率,是我国一类动物疫病,对我国养猪产业造成重大威胁和巨大经济损失。p30蛋白是ASFV最主要结构蛋白之一,具有强烈免疫原性,是ASFV疫苗研发重要靶标。利用马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)侵染性克隆,构建表达p30蛋白重组PVX载体,通过农杆菌浸润法验证在模式植物本氏烟中表达p30蛋白可行性。结果表明,重组PVX载体接种本氏烟后5 d,植株系统叶片出现花叶症状;接种11 d后,植株系统叶片明显坏死。RT-PCR和Western blot检测表明p30蛋白在本氏烟中成功表达。研究结果为进一步规模化生产植物源p30蛋白奠定坚实基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 马铃薯x病毒 植物表达
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马铃薯X病毒CP基因的原核表达及特异性抗血清的制备 被引量:17
4
作者 吴兴泉 陈士华 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《郑州工程学院学报》 CAS 北大核心 2003年第2期25-28,共4页
依据马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)外壳蛋白(CP)基因序列(711bp)设计合成了两对引物,通过RT-PCR扩增得到长0.7bp的目的片段.将目的片段转入大肠杆菌,酶切鉴定证明得到了含有目的片段的重组子,测定序列结果与其他PVX分离物CP基因序列比... 依据马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)外壳蛋白(CP)基因序列(711bp)设计合成了两对引物,通过RT-PCR扩增得到长0.7bp的目的片段.将目的片段转入大肠杆菌,酶切鉴定证明得到了含有目的片段的重组子,测定序列结果与其他PVX分离物CP基因序列比较,发现其核苷酸同源性最高可达99%左右,证明此病毒为PVX.构建了含PVXCP基因的融合蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中得到表达,SDS-PAGE测定该融合蛋白GST-XCP的相对分子质量为52000.Westemblot分析结果显示,GST-XCP与PVX抗血清有很强的免疫反应,表明GST-XCP有天然状态下病毒核衣壳蛋白的抗原性.制备了GST-XCP抗血清,并利用此抗血清建立了PVX的间接ELISA检测方法,检测灵敏度为1mg鲜重的病株叶片. 展开更多
关键词 马铃薯 x病毒 外壳蛋白基因序列 抗血清 原核表达 病毒 病毒检测
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马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因和外壳蛋白基因介导的抗病性研究 被引量:9
5
作者 刘晓玲 宋云枝 +3 位作者 刘红梅 温孚江 朱常香 白庆荣 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期827-832,共6页
以马铃薯X病毒(potatovirusX,PVX)的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)方法分别扩增出长度为681bp的非翻译马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因(PVX p25)和长度为714bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX CP)。并分别构建植物表达... 以马铃薯X病毒(potatovirusX,PVX)的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)方法分别扩增出长度为681bp的非翻译马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因(PVX p25)和长度为714bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX CP)。并分别构建植物表达载体pROKⅡp25和pROKⅡCP。利用农杆菌介导方法转化烟草NC89。经卡那霉素筛选、PCR检测,共获得转非翻译PVX p25的转基因植株78株,转非翻译PVX CP的转基因植株83株。抗病性试验表明,转非翻译PVX p25的78株中有31株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为39.7%;转非翻译PVX CP的83株中有11株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为13.3%。分子生物学检测和抗病性分析表明,抗病性均为RNA介导的病毒抗性。研究结果初步证明,转非翻译PVX p25可以更有效地获得抗PVX转基因植株。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 运动蛋白 外壳蛋白 RNA介导的病毒抗性
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表达马铃薯X病毒和Y病毒双价外壳蛋白基因马铃薯植株的抗病性 被引量:12
6
作者 张鹤龄 宋艳茹 +6 位作者 彭学贤 李天然 孟清 崔晓江 侯林林 张莉枝 马庆虎 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期360-366,共7页
表达马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)双价外壳蛋白(CP)基因的马铃薯虎头和克新4号,用机械摩擦同时接种PCX和PVY后,通过症状观察,植株中PVX和PVY的ELISA检测结果表明,转基因虎头和克新4号的... 表达马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)双价外壳蛋白(CP)基因的马铃薯虎头和克新4号,用机械摩擦同时接种PCX和PVY后,通过症状观察,植株中PVX和PVY的ELISA检测结果表明,转基因虎头和克新4号的多数株系的平均病毒含量均明显低于未转基因的对照植株。不同时期病毒测定结果表明,许多株系病毒积累缓慢,延迟麦病。说明转PVX、PVY双价CP基因的马铃薯,对PVX和PVY复合侵染发生不同程度的抗性和保护作用。接种PVX和PVY后,在转基因株系中出现感病植株,但同时也出现高抗PVX或PVY,以及同时高抗PVX、PVY的转基因单株,进一步对这些抗性单株的无性系进行抗病毒鉴定,可望选育出高抗PVX和PVY两种病毒复合侵染的转基因马铃薯。 展开更多
关键词 转基因马铃薯 马铃薯 x病毒 Y病毒 外壳蛋白
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马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:29
7
作者 魏梅生 刘洪义 +1 位作者 李桂芬 陈燕芳 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期139-141,共3页
采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒的兔多克隆抗体。用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好病毒检测线和羊抗兔抗体质控线,制成免疫层析检测试纸条。马铃薯X病毒试纸条检测烟草病汁液可稀释10000倍(重量/体... 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒的兔多克隆抗体。用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好病毒检测线和羊抗兔抗体质控线,制成免疫层析检测试纸条。马铃薯X病毒试纸条检测烟草病汁液可稀释10000倍(重量/体积)马铃薯Y病毒试纸条检测烟草病汁液可稀释1000倍。10min内即可出检测结果。两种试纸条相互测试,未出现交叉反应。用健康和缓冲液对照测试,两种试纸条结果都为阴性。田间采集的马铃薯叶片用试纸条检测的结果和酶联结果相吻合。在密封、干燥、低温的条件下保存,有利于维持试纸条的稳定性。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 马铃薯Y病毒 胶体金免疫层析法 免疫试纸条
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马铃薯X病毒的分子鉴定与检测技术 被引量:13
8
作者 吴兴泉 陈士华 谢联辉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第2期72-75,共4页
为建立快速、灵敏、特异的马铃薯X病毒(PVX)分子鉴定与检测技术,利用反转录—聚合酶链式反应(RT—PCR)技术扩增得到了PVXcp基因,并进行序列测定,同时采用RT—PCR方法和核酸斑点杂交(NASH)方法对PVX进行了分子检测。结果表明:利用PVXcp... 为建立快速、灵敏、特异的马铃薯X病毒(PVX)分子鉴定与检测技术,利用反转录—聚合酶链式反应(RT—PCR)技术扩增得到了PVXcp基因,并进行序列测定,同时采用RT—PCR方法和核酸斑点杂交(NASH)方法对PVX进行了分子检测。结果表明:利用PVXcp基因序列及蛋白氨基酸序列分析可准确鉴定PVX,并可分析各分离物间的分子差异。利用PVX特异性引物和DIG标记的PVXcp基因采用RT-PCR技术和NASH技术可对PVX进行准确的检测,其特异性及灵敏度均优于传统方法。 展开更多
关键词 马铃薯 x病毒 分子鉴定 分子检测
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瞬时表达比较马铃薯X病毒CP基因3种结构对RNA沉默的诱导效果 被引量:5
9
作者 竺晓平 刘金亮 +3 位作者 田延平 于晓庆 李向东 刘红梅 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-4,共4页
RNA沉默是植物抵御病毒侵染的一种防卫机制,病原来源的抗性(pathogen-derived resistance,PDR)被认为是通过RNA沉默起作用的.转化的核酸片段在基因组中的位置、长短和不同排列结构等均影响RNA沉默的效率.用全长马铃薯X病毒(PVX)CP基因... RNA沉默是植物抵御病毒侵染的一种防卫机制,病原来源的抗性(pathogen-derived resistance,PDR)被认为是通过RNA沉默起作用的.转化的核酸片段在基因组中的位置、长短和不同排列结构等均影响RNA沉默的效率.用全长马铃薯X病毒(PVX)CP基因构建非翻译的正义、反义和反向重复结构转基因的植物表达载体,通过农杆菌渗入法瞬时表达测试了这些转基因对RNA介导抗性的诱导效率和有效性.结果表明,反向重复的PVXCP是更为有效的RNA沉默诱导因子,同时也证明让目的基因在受试植物中瞬时表达,在转化植物之前能比较快速地检测转基因的表达情况以及表达产物的功能,从而节约时间和资源,并减少盲目性. 展开更多
关键词 RNA沉默 马铃薯x病毒(PVx) 外壳蛋白(CP)基因 农杆菌渗入 抗性
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马铃薯X病毒的RT-PCR检测 被引量:14
10
作者 孙琦 张春庆 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期687-689,共3页
通过对“一步法”RNA提取方法的改进,简化了提取程序,并保证了RNA的质量。根据马铃薯X病毒(PVX)基因序列设计合成了一对特异性引物,运用反转录PCR(RT-PCR)对PVX-RNA进行扩增,成功得到了与预期大小相一致的308 bp片段,而对照未得到任何产... 通过对“一步法”RNA提取方法的改进,简化了提取程序,并保证了RNA的质量。根据马铃薯X病毒(PVX)基因序列设计合成了一对特异性引物,运用反转录PCR(RT-PCR)对PVX-RNA进行扩增,成功得到了与预期大小相一致的308 bp片段,而对照未得到任何产物,同时对反转录酶AMV用量做了不同的处理,得出AMV仅用1u仍能得到较好扩增的效果。从而建立了经济简便的PVX的RT-PCR检测体系,为PVX的防治、脱毒苗的检测提供有效手段。 展开更多
关键词 马铃薯 x病毒 RT-PCR检测 反转录PCR
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马铃薯X病毒完整基因组上微卫星分布 被引量:5
11
作者 杨纪青 袁磊 杨凤 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1064-1071,共8页
本文利用自编计算机程序提取并展示马铃薯X病毒完整基因组(NC_011620.1)上微卫星分布特性。借助MATLAB软件和借用最优完全子图算法,分析NCBI数据库中该基因组(NC_011620.1)微卫星分布特性。结果表明,计算出所有各种N-碱基组(N取1至6)在... 本文利用自编计算机程序提取并展示马铃薯X病毒完整基因组(NC_011620.1)上微卫星分布特性。借助MATLAB软件和借用最优完全子图算法,分析NCBI数据库中该基因组(NC_011620.1)微卫星分布特性。结果表明,计算出所有各种N-碱基组(N取1至6)在完整基因组序列上重复出现次数和出现位置,展示它们的分布规律(指数函数),马铃薯X病毒完整基因组(NC_011620.1)上各种N-碱基组最大的重复出现次数随N按指数函数数减少;且呈现出重复出现次数由少到多排序,重复出现次数随序号增加;本文使用的方法,可以系统地应用到其它病毒完整基因组序列微卫星分布特性分析,从而为有效利用微卫星分布特性研究完整基因组的结构和功能、遗传和变异规律提供完整的数据支撑。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 完整基因组 微卫星 分布特性 最优完全子图算法
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马铃薯X病毒的分子生物学方法检测探究 被引量:2
12
作者 张艳萍 厚毅清 +2 位作者 裴怀弟 王红梅 陈玉梁 《种子》 CSCD 北大核心 2011年第12期75-77,共3页
根据马铃薯X病毒的基因序列,合成了1对特异性引物,从感染PVX的马铃薯病叶组织中提取出总RNA,进行cDNA合成和PCR扩增,得到一条长度约为101 bp的特异性PCR扩增产物。为马铃薯PVX的检测用分子生物学手段提供了一套快速、简便的RNA提取、PC... 根据马铃薯X病毒的基因序列,合成了1对特异性引物,从感染PVX的马铃薯病叶组织中提取出总RNA,进行cDNA合成和PCR扩增,得到一条长度约为101 bp的特异性PCR扩增产物。为马铃薯PVX的检测用分子生物学手段提供了一套快速、简便的RNA提取、PCR扩增的基础参数。 展开更多
关键词 马铃薯 x病毒 RNA PCR
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马铃薯X病毒载体介导的人成纤维细胞生长因子21(hFGF21)在烟草中的表达 被引量:4
13
作者 付宏岐 薛萍 +1 位作者 杨莉芳 庞实锋 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第4期45-51,共7页
【目的】利用马铃薯X病毒(PVX)表达载体(pgR107),在本氏烟草中表达人成纤维细胞生长因子21(Fibroblast growth factor 21,FGF21),旨在寻求一种低成本、方便、安全,且保持hFGF21蛋白生物活性的方法。【方法】将包含组氨酸(His)标签序列的... 【目的】利用马铃薯X病毒(PVX)表达载体(pgR107),在本氏烟草中表达人成纤维细胞生长因子21(Fibroblast growth factor 21,FGF21),旨在寻求一种低成本、方便、安全,且保持hFGF21蛋白生物活性的方法。【方法】将包含组氨酸(His)标签序列的hFGF21-smGFP融合基因和hFGF21基因克隆进PVX表达载体,构建重组表达质粒pgR107-His-hFGF21-smGFP和pgR107-His-hFGF21。采用冻融法将质粒pgR107-His-hFGF21-smGFP、pgR107-smGFP和pgR107-His-hFGF21转入根瘤农杆菌GV3101中,通过农杆菌介导注射侵染接种本氏烟的叶片,采用SDS-PAGE、Western blotting和ELISA检测hFGF21-smGFP和hFGF21蛋白的表达情况。烟草叶片表达的融合蛋白经Ni-NTA柱纯化后,再用重组牛肠激酶(rbEK)裂解,获得纯度较高的重组hFGF21活性蛋白。hFGF21调节葡萄糖吸收活性用微量化的GOD-POD法检测。【结果】成功构建了植物病毒双元表达载体pgR107-His-hFGF21-smGFP和pgR107-His-hFGF21。表型观察发现,侵染第7天,烟草外源蛋白积累最高,smGFP和hFGF21-smGFP蛋白的积累主要在细胞质中。SDS-PAGE、Western blotting和ELISA分析表明,hFGF21重组蛋白可在烟草中有效表达,表达量高达500μg/g(鲜叶质量)。生物活性检测结果表明,纯化的hFGF21蛋白可以促进3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的吸收。【结论】利用PVX病毒载体,在本氏烟草中表达的重组hFGF21蛋白具备生物活性。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子21(FGF21) 融合蛋白 烟草 马铃薯x病毒
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马铃薯X病毒分子生物学研究进展及其作为表达载体的应用 被引量:11
14
作者 曲静 郭兴启 +2 位作者 慈晓燕 亓栋 温孚江 《中国病毒学》 CSCD 2003年第1期87-92,共6页
马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)又称马铃薯潜隐病毒(Potato latent virus)或马铃薯轻花叶病毒(Potato mild mosaic virus),是马铃薯X病毒属(Potexvirus)的模式成员,遍布于全世界马铃薯种植区.受侵染叶片呈花叶症状,田间常与其他病毒... 马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)又称马铃薯潜隐病毒(Potato latent virus)或马铃薯轻花叶病毒(Potato mild mosaic virus),是马铃薯X病毒属(Potexvirus)的模式成员,遍布于全世界马铃薯种植区.受侵染叶片呈花叶症状,田间常与其他病毒混合感染导致马铃薯的毁灭性减产. 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 分子生物学 基因表达载体
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重组马铃薯X病毒载体介导的烟草γ-微管蛋白基因沉默 被引量:3
15
作者 王琦 赵爽 +6 位作者 王璐 王晓丹 杨坤 温国蕾 庄木 王晓武 李艳红 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期375-386,共12页
用重组马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)载体将γ-微管蛋白反义基因导入烟草(Nicotiana tabacum var.Samsun NN),得到了γ-微管蛋白基因沉默的烟草植株。它与侵染PVX空载体的正对照相比有明显的差异:不同形态的叶片分层交替生长;到生殖... 用重组马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)载体将γ-微管蛋白反义基因导入烟草(Nicotiana tabacum var.Samsun NN),得到了γ-微管蛋白基因沉默的烟草植株。它与侵染PVX空载体的正对照相比有明显的差异:不同形态的叶片分层交替生长;到生殖期所有的花苞都提前脱落;小孢子不能发育到四分体阶段。沉默的形态反应主要起始于顶端幼嫩组织。在沉默过程中除存在基因沉默及恢复现象外还出现靶基因水平的陡然升高,甚至有时会明显反超过正常对照水平。 展开更多
关键词 Γ-微管蛋白 马铃薯x病毒载体 基因沉默 植株表型
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脱毒马铃薯X病毒再侵染及运转速度研究 被引量:4
16
作者 王培伦 马伟青 +3 位作者 杨元军 张卫华 黄传红 孙慧生 《山东农业科学》 1999年第6期36-37,共2页
将马铃薯X病毒(PVX) 分别接种于脱毒马铃薯不同大小植株刚展开的心叶上,7 天、17 天及28 天后取样检测植株各部位病毒含量,结果表明,接种7 天后病毒开始运转,17 天后所有被检测的植株匍匐茎或块茎中都发现了病毒,且其含量较高,其次是心... 将马铃薯X病毒(PVX) 分别接种于脱毒马铃薯不同大小植株刚展开的心叶上,7 天、17 天及28 天后取样检测植株各部位病毒含量,结果表明,接种7 天后病毒开始运转,17 天后所有被检测的植株匍匐茎或块茎中都发现了病毒,且其含量较高,其次是心叶( 包括生长点) 和接种叶片。病毒含量的高低与接种时植株的大小密切相关,植株越小,匍匐茎、块茎和心叶中病毒含量越高。由此可见,病毒在植株体内的运转部位,主要是生长速度快的匍匐茎、块茎和心叶及生长点。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 接种 运转速度 脱毒 PVx
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陕北地区马铃薯X病毒CP基因的RT-PCR检测及其序列分析 被引量:2
17
作者 冯光惠 杜虎平 +1 位作者 李夏隆 亢福仁 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第9期91-96,共6页
【目的】分析陕北8个县(区)马铃薯X病毒外壳蛋白(CP)基因序列的一致性和变异性,明确病毒变异程度,为脱毒马铃薯的推广提供参考。【方法】以陕北8个县(区)种植2~3代疑似携带病毒的马铃薯叶片为材料,首先用Trizol法提取8个采样点马铃薯叶... 【目的】分析陕北8个县(区)马铃薯X病毒外壳蛋白(CP)基因序列的一致性和变异性,明确病毒变异程度,为脱毒马铃薯的推广提供参考。【方法】以陕北8个县(区)种植2~3代疑似携带病毒的马铃薯叶片为材料,首先用Trizol法提取8个采样点马铃薯叶片总RNA,以已公布的马铃薯X病毒CP基因序列设计特异引物,通过RT-PCR扩增目的DNA片段,用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物;然后对CP基因进行克隆并测序,使用DNAstar软件分析陕北马铃薯X病毒CP基因序列的一致性,并与国内外其他地区12个马铃薯X病毒进行比较,采用邻接法构建系统进化树。【结果】从陕北8个县(区)马铃薯叶片中均扩增到与预期大小一致的长度为620bp目的片段,可知这些马铃薯均感染了X病毒。不同CP基因序列之间存在微小变异,8个县(区)样品间CP基因的序列一致性在95.2%~99.4%,与国内外其他地区12个样品CP基因的序列一致性在92.9%~98.5%。系统进化树显示,将X病毒可分为4个类群,而陕北8县(区)马铃薯X病毒归属于其中的2个类群。【结论】马铃薯X病毒在陕北地区普遍存在,RT-PCR方法可快速、准确地检测到马铃薯X病毒,X病毒CP基因存在一定程度的变异。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 外壳蛋白基因 RT-PCR 序列分析
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应用RT-PCR法快速检测马铃薯X病毒 被引量:5
18
作者 高昌勇 尚宏芹 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2004年第10期69-71,共3页
根据马铃薯X病毒的外壳蛋白基因序列 ,设计合成了 1对寡核苷酸引物 ,从感染PVX的马铃薯病叶组织中提取出病毒的RNA ,进行cDNA合成和PCR扩增 ,得到一条长度约为0 .72kb的特异性PCR扩增产物 ,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。在基因水... 根据马铃薯X病毒的外壳蛋白基因序列 ,设计合成了 1对寡核苷酸引物 ,从感染PVX的马铃薯病叶组织中提取出病毒的RNA ,进行cDNA合成和PCR扩增 ,得到一条长度约为0 .72kb的特异性PCR扩增产物 ,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。在基因水平上为PVX的检测提供了一种快速、灵敏、简便的新方法 ,为PVX的防治提供了有效手段。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 RT—PCR 病毒检测
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马铃薯X病毒云南分离物单克隆抗体的制备及其检测应用 被引量:3
19
作者 吴建祥 周雪平 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期608-612,共5页
用马铃薯X病毒(Potato virusX,PVX)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗PVX单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞2B12和4E7,并分别制备它们的单抗腹水.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10-6以上... 用马铃薯X病毒(Potato virusX,PVX)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗PVX单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞2B12和4E7,并分别制备它们的单抗腹水.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10-6以上,2B12和4E7的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链.利用这些单克隆抗体建立了抗原包被的间接ELISA(ACP-ELISA)检测PVX的方法.病叶经1∶600倍稀释、提纯PVX病毒浓度为2 ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.2 ng)时,该方法仍能检测到病毒.利用ACP-ELISA方法测定了田间样品,发现PVX在马铃薯上发病很普遍. 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 单克隆抗体 ACP—ELISA
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马铃薯X病毒外壳蛋白基因片段的瞬时表达诱导对PVX的高抗性(英文) 被引量:1
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作者 黄永会 陶刚 +4 位作者 朱英 Mariena Ketudat-Cairns 邱礽 刘永翔 刘作易 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第2期117-121,共5页
为获得抗马铃薯X病毒(PVX)的植株,从疑似感染马铃薯X病毒的马铃薯叶片中提取出PVXcp cDNA,将其保守片段插入到RNAi质粒pHellsgate12中以构建编码发夹结构RNA的载体,通过Agroinfiltration的方法在本氏烟植株中瞬时表达。结果表明:病毒侵... 为获得抗马铃薯X病毒(PVX)的植株,从疑似感染马铃薯X病毒的马铃薯叶片中提取出PVXcp cDNA,将其保守片段插入到RNAi质粒pHellsgate12中以构建编码发夹结构RNA的载体,通过Agroinfiltration的方法在本氏烟植株中瞬时表达。结果表明:病毒侵染10d后,15株引入该载体的本氏烟植株对PVX均具有抗性,此载体可用于产生对马铃薯X病毒具有高抗性的转基因植物。 展开更多
关键词 马铃薯x病毒 瞬时表达 发夹结构RNA 外壳蛋白
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