长链非编码RNA X非活性特异性转录物(XIST)在心房颤动患者中的表达与临床意义

目的:研究长链非编码RNA X非活性特异性转录物(XIST)在心房颤动(AF)患者中的表达特征与临床意义。方法:选取2021年6月至2022年5月在山东第一医科大学第一附属医院心内科治疗的75例AF患者,并选取同期75例体检窦性心律者作为健康对照者。采集清晨空腹静脉血并分离血清,通过实时荧光定量PCR检测XIST表达水平。采用t和F检验分析XIST表达与年龄、性别、慢性病(糖尿病、高血压及冠心病)患病情况、AF类型(阵发性、持续性及永久性)、AF评分(CHA2DS2-VASc评分)及心功能分级(I、II、III及IV)之间的关系。采用Spearman检验分析XIST表达与左心室射血分数(LVEF)和左心房内径(LAD)的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析XIST表达检测AF的诊断价值。结果:AF患者血清中XIST表达水平低于健康对照者(P < 0.05)。持续性和永久性AF患者血清中XIST表达水平低于阵发性AF患者(P < 0.05)。CHA2DS2-VASc评分 ≥ 2的AF患者血清中XIST表达水平低于CHA2DS2-VASc评分 < 2的AF患者(P < 0.05)。心功能III~IV级AF患者血清中XIST表达水平低于心功能I~II级AF患者(P < 0.05)。XIST表达与LVEF呈正相关(r = 0.48, P < 0.05),而与LAD负相关(r = −0.73, P < 0.05)。XIST表达诊断AF、阵发性AF、持续性AF及永久性AF的曲线下面积分别为0.66、0.69、0.77及0.82 (P < 0.05)。结论:AF患者血清中XIST表达水平下调,与AF类型、CHA2DS2-VASc评分、心功能分级、LVEF及LAD相关。XIST表达对协助AF诊断具有一定的作用。

LUNX基因作为与免疫细胞浸润相关的非小细胞肺癌预后生物标志物

目的:研究肺特异性X蛋白(LUNX)基因是否可作为免疫细胞浸润相关的非小细胞肺癌预后生物标志物。方法:选取衡水市人民医院2020年1月至2023年1月期间收治的280例非小细胞肺癌患者,检测其癌组织、癌旁组织LUNX基因表达量,分析LUNX基因与肿瘤微环境中免疫细胞浸润、预后生存状态的关系。结果:与癌旁组织比较,非小细胞肺癌组织LUNX基因表达量、阳性率升高,且与分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期有关(P<0.05)。GEPIA数据库分析显示LUNX基因在其他组织中仅有少量表达或不表达,在LUAD、LUSC中表达升高(P<0.05)。LUNX基因、LUNX基因拷贝数与免疫细胞浸润水平有关(P<0.05)。生存分析显示,LUNX基因高表达与患者生存预后有关(P<0.05)。结论:LUNX基因在非小细胞肺癌组织中特异性表达,影响非小细胞肺癌免疫细胞浸润水平,导致免疫微环境失衡,是引起患者预后死亡的重要机制。因此,可作为评价免疫细胞浸润的预后生物标志物。

非小细胞肺癌患者区域淋巴结LUNX基因表达及其临床意义

目的:探讨人类肺组织特异性X蛋白(lung-specific X protein,LUNX)的基因诊断在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)微转移中的临床意义。方法:随机收集43例临床非小细胞肺癌患者作为实验组,同时随机收集15例良性肺部病变患者作为对照组。通过反转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测人类LUNX的靶基因的mRNA在实验组和对照组患者淋巴结中的表达,并与患者相对应的临床病理资料进行相关性分析。结果:LUNX mRNA在两组患者的肺组织及肿块中均为阳性表达;实验组43例患者的87枚淋巴结中有33枚(37.93%)有LUNX mRNA表达,对照组15例肺部良性病变患者的26枚淋巴结中有2枚(7.69%)表达LUNX mRNA,两组比较差异有统计学意义(P(0.05)。LUNX mRNA淋巴结表达阳性与肺癌患者病理类型、细胞分化程度、临床分期有密切关系(r=0.660,0.500,0.460;P=0.011,0.017,0.021);而与患者性别、年龄、吸烟史,以及血清肺癌4项肿瘤标志物(CEA,CA125,NSE和CYFRA211)无明显关系(r=0.230,0.235,0.180,0.354;P=0.739,0.714,0.773,0.125)。结论:与传统的病理切片检查判断NSCLC淋巴结微转移相比,RT-PCR检测肺癌患者淋巴结LUNX mRNA的表达有较高的敏感性。LUNX mRNA的表达是检测肺癌微转移的一个有价值的指标,可为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。

非小细胞肺癌患者骨髓CK19和LUNX mRNA的实时荧光定量检测和意义

目的:检测非小细胞肺癌患者CK19mRNA和LUNXmRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的非小细胞肺癌(NSCLC)患者62例,以肺部良性疾病10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)和普通RT-PCR技术,检测肺癌、良性病变肺组织和骨髓的CK19mRNA和LUNXmRNA的表达。结果:肺癌和良性病变肺组织RT-PCR检测结果显示CK19mRNA和LUNXmRNA表达阳性率为100%;62例NSCLC患者骨髓标本FQ-RT-PCR检测结果显示,NSCLC患者中骨髓CK19mRNA表达阳性率45.2%(28/62),明显高于肺良性病变组10%(1/10)(P=0.037),NSCLC组骨髓LUNXmRNA表达阳性率38.7%(24/62)明显高于肺良性病变组0%(0/10)(P=0.017);骨髓CK19mRNA表达阳性率随病理分期升高,接近统计学意义(P=0.06),而与病理类型、肿瘤分化程度无关;骨髓LUNXmRNA表达阳性率随分期升高且有统计学意义(P=0.02),而与病理类型、肿瘤分化程度无关;骨髓CK19mRNA和LUNXmRNA表达明显相关(P<0.001)。结论:CK19mRNA和LUNXmRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。

LUNX与VEGFA基因联合检测对Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移的临床意义

目的探讨人类肺组织特异性X蛋白(LUNX)与血管内皮生长因子A(VEGFA)基因联合检测对I期非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结微转移的临床意义。方法选择入院手术的39例I期NSCLC患者(淋巴结78枚)为实验组,同期入院的10例肺良性肿瘤患者(淋巴结19枚)为对照组,采用RT-PCR检测两组患者淋巴结LUNX、VEGFA m RNA表达,并分析其表达与NSCLC患者临床特征的相关性。结果实验组淋巴结LUNX、VEGFA m RNA阳性表达率为23.08%、19.23%,分别高于对照组的5.26%、0.00%(均P<0.05)。与常规病理检测比较,RT-PCR检测LUNX、VEGFA m RNA表达诊断NSCLC淋巴结微转移阳性率均较高(均P<0.05)。I期NSCLC患者淋巴结LUNX、VEGFA m RNA表达水平与肺癌病理类型、细胞分化程度、TNM分期均呈正相关(r=0.661、0.552和0.527,均P<0.05),与患者性别、年龄、吸烟史等未见相关(r=0.212、0.236和0.183,均P>0.05)。结论 LUNX、VEGF基因联合检测可辅助常规病理检测判断I期NSCLC淋巴结微转移,为临床诊治提供一定的帮助。

Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中LUNX mRNA的表达与微转移相关性研究

目的探讨人肺组织特异性X蛋白(LUNX)用于诊断Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)微转移的可行性及其临床意义。方法选取39例Ⅰ期NSCLC手术患者的肿瘤组织、肺门及纵隔淋巴结78枚作为实验组,另选取10例肺良性疾病的淋巴结19枚作为对照组,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测LUNX mRNA,分析其表达与病理分期等相关性。结果两组淋巴结中LUNX mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05);LUNX mRNA淋巴结表达阳性与肺癌患者病理类型、细胞分化程度及临床分期密切相关(P<0.05)。结论 RT-PCR检测肺癌患者淋巴结LUNX mRNA的表达有较高的敏感性;LUNX mRNA可用作检测早期NSCLC淋巴结微转移的重要标志物,可为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。

长链非编码RNA XIST在系统性红斑狼疮患者外周血CD4+T细胞表达降低并与疾病活动度负相关

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X连锁X染色体特异性失活转录本(XIST)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+细胞亚群中的表达,并分析其临床意义。方法募集50例SLE患者和30例健康人,比较SLE组和健康对照组CD4+T细胞中XIST表达情况。根据系统性红斑狼疮疾病活动度指数(SLEDAI)评分情况将50例SLE患者分为稳定期SLE组(SLEDAI评分<5分,n=19)和活动期SLE组(SLEDAI评分≥5分,n=31)。比较稳定期SLE组和活动期SLE组CD4+T细胞中XIST表达情况。分析活动期SLE患者CD4+T细胞中XIST表达水平与SLEDAI的相关性。根据是否合并狼疮肾炎,将31例活动期SLE患者分为无合并狼疮肾炎组(n=17)和合并狼疮肾炎组(n=14),比较两组CD4+T细胞中XIST表达情况。绘制CD4+T细胞中XIST诊断SLE和合并狼疮肾炎的受试者工作特征(ROC)曲线。结果与健康对照组相比,SLE组CD4+T细胞XIST表达显著降低。与稳定期SLE组相比,活动期SLE组CD4+T细胞中XIST表达显著降低。相关性分析显示,活动期SLE患者CD4+T细胞中XIST表达水平与SLEDAI评分呈负相关。活动期SLE患者中,与无合并狼疮肾炎组相比,合并狼疮肾炎组CD4+T细胞中XIST表达显著降低。ROC曲线结果显示,CD4+T细胞中XIST在诊断SLE及是否合并狼疮肾炎中具有良好效能。结论SLE患者CD4+T细胞中XIST表达显著降低,其表达水平与疾病活动度密切相关,而且在诊断SLE及SLE合并狼疮肾炎方面具有良好效能。

血清miR-98-5p、LncRNA XIST在急性呼吸窘迫综合征患儿中与疾病严重程度、预后的关系

目的:检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清中微小RNA(miR)-98-5p、长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异性转录因子(XIST)表达情况,并探究二者与疾病严重程度、预后的关系。方法:收集86例ARDS患儿为研究对象(研究组),同期健康体检儿童90名设为对照(对照组),参考柏林(2012年)ARDS病情严重程度诊断标准中动脉血氧分压/吸入氧浓度将ARDS患儿分为轻度组、中度组、重度组;另根据ARDS患儿28 d生存状况分为存活组和死亡组。实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平,绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平对ARDS患儿预后不良的预测价值;Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平与ARDS患儿预后的关系;Pearson分析ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST的相关性。结果:与对照组相比,研究组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。与轻度组相比,中度组、重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05);与中度组相比,重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05)。与存活组相比,死亡组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。ROC曲线显示,血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积分别为0.771、0.764,截断值分别为0.54、1.97,其敏感性分别为76.1%、86.9%,特异性分别为73.7%、52.6%;血清中miR-98-5p联合LncRNA XIST预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积为0.888,其敏感性为77.6%、特异性为94.7%。miR-98-5p高表达者存活率35.14%高于低表达者12.24%(P<0.05),LncRNA XIST高表达存活率12.73%低于低表达者38.71%(P<0.01)。Pearson分析发现ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST呈负相关关系(r=-0.411,P<0.05)。Starbase3.0预测发现LncRNA XIST与miR-98-5p存在结合位点。结论:ARDS患儿血清中miR-98-5p水平降低、LncRNA XIST水平升高,二者均与疾病严重程度、预后关系密切,且二者呈显著负相关,有望用于评估ARDS疾病严重程度、预后。

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的:通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果:54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%(26/54)和25.9%(14/54),差异比较有统计学意义(P<0.05);非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义(P<0.01);LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高(P<0.05),与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性(P>0.05);NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关(P>0.05)。结论:LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。

LunX mRNA在非小细胞肺癌患者的检测意义

非小细胞肺癌(NSCLC)的高病死率多源于其转移与复发,如能在疾病早期通过临床检验明确诊断,有望改变NSCLC患者的生存率。近年来,许多学者通过免疫组化、反转录-聚合酶链反应等方法分别从分子生物水平、基因水平来研究与NSCLC关系密切的分子学标志物。其中肺组织特异性X蛋白(LunX)在非小细胞肺癌的检测中有较高的敏感性和特异性。现对LunX与NSCLC的微转移、病理分型、分期、治疗模式及预后等研究进展进行综述。

LncRNA XIST调节miR-574-5p/TLR4轴对呼吸道合胞病毒感染的支气管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨长链非编码(long non-coding,Lnc)核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)X-非活性特异性转录本(X-inactive specific transcript,XIST)调节微小RNA(microRNA,miR)-574-5p/Toll样受体(Toll-like receptor 4,TLR4)轴对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡的影响。方法将人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial,16HBE)分为阴性对照(negative control,NC)组、RSV感染(RSV infection,RSV)组、小干扰RNA阴性对照(small interfering RNA negative control,si-NC)组、XIST小干扰RNA(XIST small interfering RNA,si-XIST)组、siXIST+抑制剂阴性对照(inhibitor negative control,inhibitor-NC)组、si-XIST+miR-574-5p抑制剂(miR-574-5p inhibitor)组,实时荧光定量聚合酶链反应检测LncRNA XIST、miR-574-5p表达;5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)染色、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β的分泌;双荧光素酶报告基因实验验证miR-574-5p与LncRNA XIST和TLR4的关系;蛋白质印迹检测TLR4、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(B lymphoblastoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteine aspartate proteolytic enzyme 3,Cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果相较于NC组,RSV组、si-NC组LncRNA XIST、凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、TLR4、Bax、Cleaved Caspase-3表达升高,EdU阳性率、miR-574-5p、PCNA、Bcl-2表达降低(P均<0.05);相较于si-NC组,si-XIST组LncRNA XIST表达、凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、TLR4、Bax、Cleaved Caspase-3表达降低,EdU阳性率、miR-574-5p、PCNA、Bcl-2表达升高(P均<0.05);下调miR-574-5p可逆转敲低LncRNA XIST对RSV感染的16HBE细胞凋亡和炎症反应的抑制(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-574-5p与LncRNA XIST、miR-574-5p与TLR4存在靶向调控关系(P<0.05)。结论LncRNA XIST在RSV感染的16HBE细胞中上调表达,敲低LncRNA XIST可能通过上调miR-574-5p来下调TLR4表达,抑制RSV感染后的16HBE细胞凋亡。

血清lncRNAXIST和SIRT1水平与DR的关系及其诊断价值

目的:检测2型糖尿病(T2DM)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)X非活性特异性转录本(XIST)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)表达水平,并探讨其与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性及其诊断价值。方法:前瞻性研究。选取2022-01/2023-02在我院收治T2DM患者214例作为研究对象。根据是否发生视网膜病变,分为非DR组126例126眼,DR组88例88眼。另选取同期体检健康者130例为对照组。检测三组血清lncRNA XIST、SIRT1水平并进行比较。采用Pearson法分析lncRNA XIST和SIRT1表达与DR的关系,受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA XIST、SIRT1单独及联合对DR的预测价值,多因素Logistic回归分析影响T2DM患者发生DR的因素。结果:与对照组比较,非DR组和DR组血清lncRNA XIST、SIRT1水平依次降低(均P<0.05);DR患者血清lncRNA XIST和SIRT1水平呈正相关(r=0.639,P<0.05);ROC分析显示,血清lncRNA XIST、SIRT1联合预测DR的曲线下面积(AUC)为0.940,高于血清lncRNA XIST、SIRT1单独检测的AUC(0.855、0.875)。Logistic回归分析显示,lncRNA XIST(OR=0.752)、SIRT1(OR=0.694)是DR发生的影响因素(均P<0.01)。结论:DR患者血清lncRNA XIST、SIRT1水平均降低,lncRNA XIST联合SIRT1对DR发生有较好的评估效能。

长链非编码RNA在膜性肾病中的作用研究进展

在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到关注。膜性肾病(MN)是我国常见的原发性肾小球肾炎,严重威胁人们的健康和生命。lncRNA,尤其是X非活性特异性转录物、浆细胞瘤变体易位1参与MN的发生发展。但目前关于lncRNA在MN中的作用机制研究较少,深入研究lncRNA在MN中的作用机制,可能为MN的诊断及治疗提供新的治疗靶点。

急性冠脉综合征患者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平表达与心脏自主神经功能的相关性研究

目的检测急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录物(LncRNA X inactivate-specific transcript,LncRNA XIST)和微小RNA(miR)-330-3p水平,分析二者与心脏自主神经功能的关系。方法选取2020年2月~2021年6月在华北石油管理局总医院诊断为ACS的患者156例,包括不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)80例(UA组)和急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)76例(AMI组);另选取同期体检健康者100例作为对照组。实时荧光定量PCR法检测受试者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平;24 h动态心电图检测受试者心率变异性(heart rate variability,HRV)时域指标[包括:24 h内正常R-R间期标准差(SDNN)、每5 min R-R间期平均值的标准差(SDANN)、每5 min R-R间期标准差的平均值(SDNN index)、相邻R-R间期之差的均方根(RMSSD)及相邻R-R间期相差>50 ms心搏数占总心搏数的百分比(PNN50)]以及Pearson法分析ACS患者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平与HRV时域指标的相关性。结果与对照组比较,UA组和AMI组血清LncRNA XIST(1.37±0.26,1.69±0.31 vs 1.09±0.22)水平升高(F=113.587,P=0.000),miR-330-3p(0.82±0.15,0.53±0.12 vs 1.03±0.18)及SDANN(115.96±19.57 ms,98.96±16.57 ms vs 133.43±21.01 ms),SDNN(113.84±15.26 ms,101.84±11.22 ms vs 136.41±31.53 ms),SDNN index(54.68±6.72 ms,46.73±5.14 ms vs 64.68±10.64 ms),RMSSD(27.48±5.62 ms,21.37±3.64 ms vs 36.48±8.62 ms)和PNN50(7.58%±2.83%,4.18%±1.13%vs 10.72%±3.21%)水平均降低(F=54.923~225.201,均P=0.000),差异均有统计学意义。与UA组比较,AMI组血清LncRNA XIST水平升高(t=10.792,P<0.05),miR-330-3p及SDANN,SDNN,SDNN index,RMSSD和PNN50水平降低,差异有统计学意义(t=4.743~16.538,均P<0.05);ACS患者血清LncRNA XIST与SDNN index,RMSSD和PNN50呈负相关(r=-0.465,-0.532,-0.542,均P<0.05);miR-330-3p与SDNN index,RMSSD和PNN50呈正相关(r=0.471,0.562,0.561,均P<0.05)。结论ACS患者血清LncRNA XIST水平升高,miR-330-3p水平降低,与心脏自主神经功能有关,可作为防治ACS的重要靶点。

人端粒酶反转录酶和脆性组氨酸三联体基因在口腔鳞癌中的表达及意义

端粒酶被认为是迄今为止最具有人体肿瘤特异性和敏感性的分子标志物,人端粒酶反转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTRT）是端粒酶活性的限速酶,只在端粒酶阳性的肿瘤细胞和永生化细胞中表达,与端粒酶活性平行相关[1]。脆性组氨酸三联体基因（fragile histidine triad,FHIT）是1996年发现的一种抑癌基因,

实时RT-PCR法检测非小细胞肺癌淋巴微转移

目的以Lunx和血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体为靶基因,实时PT-PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌旁组织、手术切除区域淋巴结微转移,探讨人肺特异性X蛋白(humanlung-specificXprotein,Lunx)、VEGF-C、VEGF受体3(VEGFR-3)的敏感性和特异性。方法以肺部良性病变切除的20枚淋巴结为对照,采用SYBRGreenⅠ嵌合荧光实时RT-PCR检测NSCLC手术切除区域淋巴结60枚LunxmRNA表达并与常规病理比较;以肺部良性病变切除的组织20例为对照,检测VEGF-C、VEGFR-3在30例癌旁组织中的表达。结果30例NSCLC患者癌旁组织VEGFCR-3、VEGF-C阳性率分别为60%(18/30)、77%(23/30),分别与病理阳性率37%(11/30)比较,均有显著差异(χ2=4,P<0.05;χ2=6.72,P<0.01);60枚NSCLC患者手术切除区域淋巴结Lunx阳性率78.3%(47/60),与病理阳性率55%(33/60)比较有显著差异(χ2=7.68,P<0.01)。结论VEGFCR-3、VEGF-C、Lunx均可作为NSCLC淋巴微转移的分子标志物,与病理比较有较高的敏感性;实验采用一种新颖的荧光实时RT-PCR相对定量方法分析结果,有助于早期肺癌转移的检测。

一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型的建立和应用

目的建立一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型。方法从大鼠前列腺组织中提取物5α-还原酶,与底物睾酮(T)以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系。反应产物二氢睾酮(DHT)用酶免技术(EIA)测定,以产物生成量确定酶活性;对反应底物、NADPH、酶浓度以及反应最佳温度和时间进行了优化。结果当底物、NADPH、酶提取物浓度分别为0.25μM、1mM和0.3mg,37℃反应60分钟可获最大酶活性。特异性5α-还原酶抑制剂非那雄胺显著降低5α-还原酶催化产物DHT的生成。进一步对24种中药进行筛选,姜黄、夏枯草等中药提取物具有5α-还原酶抑制剂作用。结论本文建立的非同位素方法有效、可行,可作为一种体外模型筛选和研究5α-还原酶抑制剂。

Xist lncRNA介导X染色体失活及应用研究进展

在哺乳动物胚胎发育过程中,雌性胚胎细胞中一条X染色体转录沉默,导致两性间的剂量补偿称为X染色体失活(X chromosome inactivation,XCI)。X染色体失活中心(X chromosome inactivation center,XIC)是XCI的主要调控区域,X-非活性特异性转录物(X-inactive specific transcript,Xist)位于该区域中且是XCI的关键部分。Xist长链非编码RNA(long chain non-coding RNA,lncRNA)是一种非活性的特异性转录物,能够招募如RNA互作结合蛋白(RNA interaction binding protein,RBP)、染色质修饰因子等一系列辅助因子,促使染色体和细胞核空间结构、染色质组成及X连锁基因转录水平发生改变,从而将有活性的染色体转化为无活性的染色体。对小鼠、人及其他物种研究显示,XCI普遍存在于哺乳动物胚胎发育中,是胚胎存活的基础,然而不同物种胚胎中却存在一些特异性差异。此外,癌症、肿瘤等一些人类疾病也与XCI有关。目前关于XCI机制研究比较零散,作者就Xist lncRNA介导XCI的主要分子机理、调控机制及在不同物种中的研究进行概述。

长链非编码RNA GAS5与冠心病相关病变的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类不具有编码蛋白质能力的RNA,可以在多个层面参与基因的表达调控。生长阻滞特异性转录本5(GAS5)属于lncRNA家族,在人类多种组织中广泛表达,与多种疾病(肿瘤、心脑血管病等)密切相关。GAS5可能是一种潜在的生物标志物,对冠心病的诊断、治疗及预后评估具有重要意义,在动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注损伤等冠心病相关病变中起非常重要的作用。因此,深入研究GAS5在冠心病相关病变中的作用机制,可以为冠心病的诊疗提供新思路。

血清lncRNA XIST与老年膝关节骨性关节炎病情严重程度及炎性因子水平的相关性

目的分析血清长链非编码RNA(lncRNA)X非活性特异性转录本(XIST)水平与老年膝关节骨性关节炎(KOA)患者病情严重程度及炎性因子水平的相关性。方法选择2019年3月至2021年4月确诊的96例KOA患者为研究对象(研究组),同期健康体检者100例作为对照(对照组),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清中XIST水平,酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL-6)水平。根据X线片评估,参考Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准对所有受试者病情严重程度进行分级;Spearman分析KOA患者病情严重程度与血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平关系;Pearson分析KOA患者血清中XIST与IL-1β、TNF-α、IL-6水平关系。结果与对照组比较,研究组血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05)。K-L分级判定结果:对照组均为0级,研究组Ⅰ级19例、Ⅱ级24例、Ⅲ级36例、Ⅳ级17例。Spearman分析发现KOA患者血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平与病情严重程度呈正相关(r值分别为0.784、0.791、0.657、0.703,P<0.05);Pearson分析发现KOA患者血清中XIST水平与IL-1β、TNF-α、IL-6水平均呈正相关(r值分别为0.635、0.525、0.414,P<0.05)。结论老年KOA患者血清中XIST水平升高,且其与病情严重程度、炎性因子水平关系密切,可能对于指导临床治疗老年KOA患者具有一定意义。