X-射线修复交叉互补蛋白5在脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的分析X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)在脑胶质瘤(brain glioma,BG)中的表达水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法利用癌症基因图谱(TCGA)数据库的RNA测序数据分析XRCC5在636例BG[468例低分级脑胶质瘤(LGG),168例多形性胶质母细胞瘤(GBM)]与正常脑组织的表达差异,比较XRCC5表达水平与年龄、性别、病理分级、生存期以及肿瘤增殖相关抗原67(MKI67)表达水平的相关性。对BG组织芯片(47例LGG、75例GBM及3例正常脑组织)进行XRCC5免疫组化染色,进一步验证XRCC5表达水平与BG病理分级的关系。结果TCGA分析结果显示,XRCC5在BG组织中的表达水平高于正常脑组织(P<0.001),在GBM组的表达水平高于LGG组(P<0.001);XRCC5表达水平与BG病理分级呈正相关(P<0.001),与MKI67表达水平呈正相关(P<0.001);XRCC5高表达组生存期长于低表达组(P<0.001);不同性别、不同年龄段XRCC5表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05);XRCC5的免疫组化染色结果显示,肿瘤组织中XRCC5表达水平高于正常人脑组织(P<0.05)。结论XRCC5在BG组织中升高,且与恶性肿瘤的生物标记物MKI67呈正相关。XRCC5表达越高,患者的预后越好,生存期越长。

DNA单链断裂损伤修复研究进展

在哺乳动物细胞中DNA单链断裂的修复过程需要多聚（ADP-核糖）聚合酶、X射线修复交叉互补蛋白1、DNA连接酶IIIα和其他DNA损伤修复因子的参与。该修复过程分为单链断裂的检测、断链末端处理、缺口填补和DNA连接四个环节。

XRCC6基因多态性与术后化疗胃癌患者预后的关系

目的探讨X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)基因多态性与术后化疗胃癌患者预后的关系。方法选取99例术后行奥沙利铂+替吉奥化疗方案治疗的胃癌患者作为研究对象,检测其入院时外周血XRCC6基因rs2267437位点基因型。随访患者化疗36个月后的生存情况,将其分为存活组56例和死亡组43例。比较两组患者的临床病理资料和XRCC6基因基因型的分布频率,并采用COX回归模型分析XRCC6基因多态性与术后化疗胃癌患者预后的关系。结果死亡组肿瘤直径>5 cm、肿瘤临床分期为Ⅲ期、发生淋巴结转移、存在远处转移的患者比例更高(均P<0.05)。两组患者的XRCC6基因的基因型分布频率差异有统计学意义(P<0.05),其中死亡组患者的XRCC6基因CG基因型、GG基因型频率低于存活组。COX回归分析结果显示,校正相关临床病理特征后,携带XRCC6基因CG/GG基因型的术后化疗胃癌患者的预后更好(P<0.05)。结论XRCC6基因多态性与术后化疗的胃癌患者的预后密切相关,携带CG/GG基因型的患者预后更好。

DNA解旋酶ERCC6L与恶性肿瘤发生、发展的关系研究进展

切除修复交叉互补组6样蛋白(ERCC6L)是SNF2蛋白家族成员之一,也是一种新发现的DNA解旋酶,其主要功能是与有丝分裂调节激酶—Polo样激酶1结合,参与重塑着丝粒染色质和修复DNA损伤,并在胚胎发育、生长中发挥作用。近年来,研究表明ERCC6L在多种恶性肿瘤组织中异常表达,参与调控恶性肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和转移,可能与恶性肿瘤的发生、发展相关。本文就ERCC6L与多种恶性肿瘤发生、发展关系的研究进展展开综述。

MiR-1207-3p靶向XRCC6对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响

目的探讨miR-1207-3p靶向X-射线修复交叉补充因子6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-1207-3p与XRCC6的相关性;将XRCC6的3′端非编码区克隆进pmirGLO载体中,利用双荧光素酶报告系统检测miR-1207-3p是否靶向调控XRCC6基因;用LipoFiter3转染试剂转染miR-1207-3p mimics或miR-1207-3p inhibitor进结直肠癌细胞HT-29后,通过Western Blot检测XRCC6蛋白表达量和结直肠癌细胞HT-29凋亡标志蛋白的表达量;采用Annexin V染色法测定细胞凋亡水平。结果通过TargetScan分析,miR-1207-3p仅在一个区域与XRCC6具有较高匹配度;通过双荧光素酶报告系统检测发现,miR-1207-3p靶向结合XRCC6的3′端非编码区;过表达miR-1207-3p时,XRCC6的表达量下降,细胞凋亡标志蛋白Cleaved-Casp3、Cleaved-Casp9的表达量显著上升,细胞凋亡水平上升(t=34.18,P<0.0001);敲低miR-1207-3p时,XRCC6的表达量上升,细胞凋亡标志蛋白Cleaved-Casp3、Cleaved-Casp9的表达量显著下降,细胞凋亡水平下降(t=3.375,P=0.0279)。结论MiR-1207-3p可通过抑制XRCC6表达量来促进结直肠癌细胞HT-29的凋亡。

mFOLFOX6与XELOX方案治疗转移性结肠癌的疗效及对患者肿瘤标志物水平的影响

目的探讨5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙+奥沙利铂(mFOLFOX6)方案与奥沙利铂+卡培他滨(XELOX)方案治疗转移性结肠癌的疗效及对患者肿瘤标志物[血清铁蛋白(SF)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)、核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)]水平的影响。方法依据治疗方式的不同将124例转移性结肠癌患者分为对照组(n=59)和观察组(n=65),对照组患者给予mFOLFOX6方案化疗,观察组患者给予XELOX方案化疗。比较两组患者的临床疗效、血清肿瘤标志物水平及不良反应发生情况。结果观察组患者的治疗总有效率为66.15%,与对照组患者的54.24%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。治疗后,两组患者SF、MACC1、ERCC1水平均低于本组治疗前,观察组患者SF、MACC1、ERCC1水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。两组患者骨髓抑制发生率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);观察组患者胃肠道反应、肝肾功能损伤、口腔黏膜炎发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论mFOLFOX6与XELOX方案治疗转移性结肠癌的疗效相当,但XELOX方案在降低患者肿瘤标志物水平方面更具优势,且安全性较高。

XRCC 1 Arg399Gln基因多态性对铂类药物化疗胃癌患者预后的影响

目的:研究DNA修复酶X射线损伤交叉互补蛋白1(X-ray repair cross-complementary protein1,XRCC1)基因Arg399Gln多态性对接受铂类药物辅助化疗的胃癌患者预后的影响。方法:选取经病理学确诊的胃癌患者84例,采用含铂类药物的联合化疗方案进行辅助化疗。化疗前采集患者外周血,采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligation detection reaction,PCR-LDR)技术检测XRCC1基因Arg399Gln的多态性。结果:84例胃癌患者中,49例(58.3%)携带XRCC1的399Arg/Arg基因型,30例(35.7%)携带Arg/Gln基因型,5例(6.0%)携带Gln/Gln基因型;截止到随访结束,分别有63.1%(53/84)和55.2%(43/84)的患者出现复发和死亡,其中携带Arg/Arg基因型的胃癌患者复发率和死亡率均显著低于携带Arg/Gln或Gln/Gln基因型患者(P<0.05)。COX多因素分析显示,携带Arg/Arg基因型的患者具有较好的无复发生存期和总生存期预后(P<0.05)。结论:XRCC1Arg399Gln基因多态性与术后胃癌患者接受铂类药物化疗后的预后有关,可以在一定程度上判断术后胃癌患者接受铂类药物化疗的预后情况。

乳腺癌组织LOX、XRCC5表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系

目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)及其相互作用蛋白X射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)在乳腺癌发生、发展中的作用。方法选择乳腺浸润性导管癌患者170例,取手术切除的乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测LOX、XRCC5表达,分析LOX阳性表达与XRCC5阳性表达的关系及二者与患者临床病理参数和预后的关系。结果乳腺癌组织LOX、XRCC5阳性表达率及其相对表达量均高于癌旁正常组织(P均<0.05)。Spearman非参数相关分析显示,乳腺癌组织LOX阳性表达与XRCC5阳性表达呈正相关关系(r=0.536,P<0.01)。LOX相对表达量与乳腺癌腋窝淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、组织病理分级无关(P均>0.05)。XRCC5相对表达量与临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、腋窝淋巴结转移、组织病理分级无关(P均<0.05)。LOX阳性表达者和(或)XRCC5阳性表达者总生存率均低于LOX阴性表达者和(或)XRCC5阴性表达者(P均<0.05)。结论乳腺癌组织LOX、XRCC5表达升高,二者表达变化可协同促进乳腺癌侵袭和转移,并有可能作为乳腺癌预后评估的指标。

SCR7对三阴性乳腺癌顺铂化疗的增敏作用研究

目的:探讨SCR7对三阴性乳腺癌顺铂化疗的增敏作用。方法:选用三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞分为空白对照组、10μmol/L顺铂对照组和联合组(10μmol/L顺铂+10、20和40μmol/L SCR7),采用CCK-8法检测细胞活性并计算细胞增殖抑制率;取对数期TNBC MDA-MB-231细胞构建三阴性乳腺癌移植瘤小鼠模型,建模成功后荷瘤裸鼠随机分为对照组、SCR7组,顺铂组、SCR7+顺铂组;饲养24 d后,观察比较各组荷瘤鼠肿瘤质量、瘤体体积的变化,计算肿瘤抑制率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察瘤体组织细胞形态学变化;原位末端标记法(in situ end labeling,TUNEL)检测乳腺癌肿瘤组织的凋亡;采用Western blot检测X射线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)、多聚(ADP核糖)聚合酶1[poly(adp ribose) polymerase 1,PARP1]蛋白表达。结果:联合组细胞增殖抑制率均高于对照组(P<0.05),且随SCR7质量浓度增大呈逐渐升高趋势(P<0.05)。体内动物实验发现:相较于对照组,SCR7组、顺铂组、SCR7+顺铂组中的乳腺癌肿瘤体积、瘤重减小(P<0.05),其肿瘤抑制率分别是32%、40%、81%;SCR7+顺铂组较顺铂组减少更明显(P<0.05),且小鼠体质量与SCR7组、顺铂组相比无明显差异(P>0.05);HE染色观察干预组肿瘤组织均呈现明显形态学改变,其中SCR7+顺铂组肿瘤细胞退变变化最明显;TUNEL染色显示SCR7+顺铂组肿瘤细胞凋亡最为严重,可见大量红色细胞凋亡;Western blot检测发现,SCR7+顺铂组XRCC1、PARP1蛋白表达均明显低于其他组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:SCR7在体内外对三阴乳腺癌顺铂化疗均有增敏作用。

二甲双胍通过CXCR4/Akt信号通路增强结肠癌细胞对5-FU敏感性的实验研究

目的探讨二甲双胍对结肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响及其可能的作用机制。方法体外培养结肠癌细胞株HCT-116和HT-29,采用CCK-8法测定不同浓度(1.25、2.5、5、10、20、40、80 mmol/L)盐酸二甲双胍(MET-HCl)或不同浓度(1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L)5-FU干预后细胞活力,计算细胞存活率和48 h两药半数抑制浓度(IC_(50))。通过Chou-Talalay模型计算MET-HCl与5-FU配伍的联合指数(CI),以抑制率(Fa)=0.5时MET-HCl、5-FU浓度确定后续实验中两药的浓度。采用CCK-8法和Annexin V-FITC/PI流式细胞术分别检测实验浓度下两药单独和联合作用的HCT-116细胞或HT-29细胞的存活率和凋亡率,以加入不含药物培养液的细胞为对照组。HCT-116细胞、HT-29细胞中转染CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),通过蛋白质印迹法检测CXCR4蛋白表达水平下降(P<0.05),提示CXCR4敲低成功。采用CCK-8法检测两药单独及联合作用的敲低CXCR4表达的细胞存活率,以加入不含药物培养液的未经转染的细胞为si-对照组。蛋白质印迹法检测两药单独及联合作用的HCT-116细胞或HT-29细胞中CXCR4/Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果CCK-8法检测显示,MET-HCl和5-FU分别以浓度-时间依赖的方式减弱HCT-116和HT-29细胞活力,作用48 h时HCT-116细胞MET-HCl和5-FU的IC_(50)分别为(13.0±5.8)mmol/L、(16.9±7.2)μmol/L,HT-29细胞分别为(8.6±2.8)mmol/L、(9.7±3.1)μmol/L。CCK-8法测定HCT-116细胞或HT-29细胞用药48 h后细胞抑制率为50%、75%及90%时,HCT-116细胞对应的CI值分别为0.48、0.37、0.25,HT-29细胞分别为0.57、0.51、0.49,提示两药联用具有协同效应。按Fa=0.5,确定MET-HCl、5-FU实验浓度分别为10 mmol/L、5μmol/L。CCK-8法检测显示,10 mmol/L MET-HCl、5μmol/L 5-FU单独或二者联合作用HCT-116细胞或HT-29细胞48 h后,各用药组细胞存活率均低于对照组(均P<0.05),单独应用MET-HCl与单独应用5-FU的细胞间存活率差异均无统计学意义(均P>0.05),两药联合作用的细胞存活率均低于两药单独作用的细胞(均P<0.01);敲低CXCR4后,各用药组细胞存活率均低于si-对照组(均P<0.05),但两药单独作用与两药联合作用的细胞存活率差异均无统计学意义(均P>0.05)。流式细胞术检测显示,作用24 h后,HCT-116细胞或HT-29细胞经MET-HCl单独作用和两药联合作用的细胞凋亡率均高于对照组(均P<0.05),5-FU单独作用的细胞凋亡率与对照组间差异均无统计学意义(均P>0.05);HCT-116细胞经两药联合作用的凋亡率均高于两药单独作用(均P<0.05);HT-29细胞经两药联合作用的细胞凋亡率高于5-FU单独作用(P<0.05),但与MET-HCl单独作用比较,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白质印迹法检测显示,MET-HCl单独和两药联合作用的HCT-116细胞或HT-29细胞中CXCR4、p-Akt和XRCC1蛋白相对表达水平均低于对照组(均P<0.05),5-FU单独作用的两细胞中3个蛋白相对表达水平与对照组间差异均无统计学意义(均P>0.05);MET-HCl单独和两药联合作用的两细胞中3个蛋白相对表达水平均低于5-FU单独作用(均P<0.05),且两药联合作用的两细胞中CXCR4、p-Akt蛋白相对表达水平均低于MET-HCl单独作用(均P<0.05),两药联合作用的HCT-116细胞XRCC1蛋白相对表达水平低于MET-HCl单独作用(P<0.05),但两药联合与MET-HCl单独作用的HT-29细胞间XRCC1蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论MET-HCl可能通过CXCR4/Akt信号通路降低XRCC1的表达,从而增强结肠癌细胞对5-FU的敏感性。