艾灸督脉组穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区肌醇需要酶1/X-盒连接蛋白1通路的影响

目的:观察艾灸督脉组穴对血管性痴呆(VD)大鼠海马CA1区肌醇需要酶1(IRE1)/X-盒连接蛋白1(XBP1)通路的影响,探讨艾灸治疗VD的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组和西药组,每组12只。采用双侧颈总动脉永久结扎法复制VD模型。艾灸组取“百会”“大椎”“风府”温和灸,20 min/次,1次/d,干预6 d休息1 d,治疗4周。西药组给予尼莫地平2 mg·kg-1·d-1分3次灌胃,连续4周。采用Morris水迷宫实验检测造模前后及干预后大鼠的学习记忆能力,TUNEL染色法检测海马CA1区神经细胞凋亡率,Western blot法和实时荧光定量PCR法检测海马CA1区IRE1、XBP1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白及mRNA的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越原平台次数明显减少(P<0.01),海马CA1区神经细胞凋亡率明显升高(P<0.01),IRE1、XBP1、Bax蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。治疗后与模型组比较,艾灸组和西药组平均逃避潜伏期均明显缩短(P<0.01),穿越原平台次数增加(P<0.05),海马CA1区神经细胞凋亡率明显降低(P<0.01),IRE1、XBP1、Bax蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)。以上指标艾灸组与西药组比较差异无统计学意义。结论:艾灸督脉组穴可提高VD大鼠认知功能,其作用机制可能与调控IRE1/XBP1通路,抑制促凋亡蛋白Bax释放,促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达,进而抑制海马神经细胞凋亡有关。

XBP-1活性对小鼠移植皮肤存活率的作用研究

目的通过小干扰RNA技术抑制小鼠体内X-盒结合蛋白1(XBP-1)表达,探讨其在小鼠皮肤移植后急性排斥反应中的作用及可能机制。方法 BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠分别作为供体及受体,建立小鼠皮肤急性排斥反应模型。受体随机分为3组,转染组术后1～7d经尾静脉注入100μg XBP-1-siRNA慢病毒质粒(n=15);对照组以同样方式每日注入同剂量慢病毒载体(n=15);磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=15)注入同等剂量PBS。术后7d取标本及眼球血,观察移植物病理改变及生存率、移植物病理改变;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测移植区及外周血白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)及白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果转染组移植皮肤存活率较空白载体组及对照组有明显改善(P<0.05),呈轻度排斥反应;转染组外周血IFN-γ及IL-6的水平较对照组及PBS组明显下降(P<0.05),而IL-10则显著增高(P<0.05)。结论抑制小鼠体内XBP-1活性可通过调节局部细胞因子表达,从而延缓皮肤移植后急性排斥反应对移植物的破坏。