X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征1例并文献分析

X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征(immune dysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,X-Linked syndrome,IPEX)是一种罕见的X连锁隐性遗传性疾病,新生儿期发病最早可发生在胎儿期,可引起免疫系统失调,具有很高的致命性[1-2]。一项关于澳大利亚新生儿糖尿病发病率的回顾性研究发现,1989—2007年国家登记数据库中10例新生儿糖尿病中有1例为IPEX,据此估计发病率为1/1609490[3]。IPEX死亡率高,若不及时通过免疫抑制剂或造血干细胞移植(HSCT)进行治疗,大多数受影响的男性患儿会在出生后1~2年内死亡[4]。早期诊断、早期治疗尤为重要。本文回顾性的分析了1例X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征患儿的临床特点、实验室检查、基因检测结果及治疗经过,为IPEX疾病的早期诊断及治疗提供资料。

一例晚发X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征患儿的临床及遗传学研究

目的探讨1例晚发X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征(immune dysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,X-linked syndrome,IPEX)患儿的临床特点、基因变异情况。方法分析1例IPEX综合征患儿的临床资料、实验室检查、基因变异位点及治疗情况。结果患儿为男性,3岁因顽固性腹泻、反复感染、肝功能不全、生长发育迟缓就诊,不伴糖尿病和皮肤疾病。实验室检查显示肝酶和总IgE升高、白蛋白降低及电解质紊乱;胃肠镜检查发现十二指肠黏膜糜烂和细颗粒样改变,回肠末端和结肠黏膜水肿,活检示十二指肠和回肠末端绒毛萎缩。基因检测发现,FOXP3基因第10外显子编码区存在1个c.1087A>G错义变异,导致氨基酸p.I363V改变。结论IPEX综合征通常在婴儿期起病,但临床表现多样,不应仅根据年龄排除诊断。对于患有难治性腹泻、自身免疫性疾病和生长迟缓的男性患儿,需警惕IPEX综合征,基因检测分析有利于早期诊断及治疗。

X-连锁多内分泌腺病、肠病伴免疫失调综合征1例分子与临床特征研究

目的探讨1例X连锁多内分泌腺病、肠病伴免疫失调综合征(immune dysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,X-linked syndrome,IPEX)患儿FOXP3基因变异、蛋白表达水平、免疫表型及临床特征。方法对1例表现为早发性顽固性腹泻、自身免疫现象、内分泌功能异常、生长发育落后、IgE增高的疑似IPEX男性患儿外周血单个核细胞采用流式细胞仪检测CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例和FOXP3蛋白表达,PCR法进行外周血FOXP3基因扩增及测序、比对分析,排除多态性以确定致病突变。结果该患儿CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例较正常对照明显降低,FOXP3蛋白表达量与正常对照无显著差异。经基因分析确诊为IPEX,其FOXP3基因第8号外显子末位碱基错义突变(G>A),导致FOXP3蛋白323位氨基酸由谷氨酸替换为赖氨酸(Glu323Lys),突变基因的转录产物中除了一部分为错义突变外,还形成了多种异常拼接体,部分为缺失第8号外显子,部分同时缺失7、8号外显子,另有部分完全或部分缺失5号外显子及部分11号外显子。患儿母亲为该突变的携带者。结论通过临床、免疫学筛查、基因分析及流式细胞术,确诊1例发生FOXP3多种不同异常拼接及错义突变的IPEX患儿,为此前未报到的新发突变,对早发顽固性腹泻、湿疹、内分泌功能异常伴自身免疫现象及不明肾脏损害婴幼儿,应考虑IPEX可能并进行FOXP3基因分析以最终确诊。

多发性内分泌腺瘤病Ⅰ型1例

通过对1例表现为反复水样泻、顽固性低钾血症、代谢性酸中毒病例的诊治分析,提高对胰腺内分泌肿瘤以及多发性内分泌腺瘤病的认识.

新发突变基因的新生儿X-连锁肌小管肌病1例并文献回顾

X-连锁肌小管肌病(X-linked myotubular myopathy,XLMTM)是一种罕见的先天性肌病。四川大学华西第二医院于2021年2月收治1例临床表现为肌张力低下、伴有特殊面容、需持续呼吸机辅助通气的男性新生儿,36~(+2)周早产,出生后出现呼吸困难及治疗后撤机困难,伴有四肢肌张力低下、吞咽功能障碍及特殊外貌特征(四肢细长、面部狭长、高腭弓、双手垂腕、阴囊空虚、细长指/趾等),经基因检测确诊为XLMTM。其全外显子家系测序结果提示父亲、外公、外婆均无变异,母亲存在杂合变异,致病突变为MTM1(OMIM:300415),染色体位置为chrX-150649714,核苷酸变化为c.868-2A>C。该患儿具有典型的外貌特征,且经基因检测发现为新发的突变基因。对存在肌张力异常及特殊面容的患儿,早期进行基因检测对准确诊断XLMTM有重要意义。

以极早发型炎性肠病为表型的婴幼儿X连锁淋巴组织增生综合征2型1例并文献复习

报道1例以极早发型炎性肠病为表型的婴幼儿X连锁淋巴组织增生综合征2型患儿的临床资料,并进行文献复习。

IL-2RG基因c.675 C>A突变引起X-连锁重症联合免疫缺陷病患儿的基因检测及实验室与临床结果分析

目的探讨白细胞介素-2受体共同r链(interleukin 2 receptor gamma,IL-2RG)基因新发变异导致患儿重症联合免疫缺陷病(severe combined immunodeficiency,SCID)的分子遗传学特点和临床特征。方法分析西北妇女儿童医院儿童血液内科收治的一例重症联合免疫缺陷病患儿的临床资料、实验室结果及基因检测数据。结果一例两个月男婴,出生后反复感染入院治疗,患儿血细胞检测结果提示白细胞总数正常,但淋巴细胞明显减少;淋巴细胞亚群结果显示总T(CD3+),辅助T(CD3+CD4+),杀伤T(CD3+CD8+)和NK(CD3-CD16+CD56+)淋巴细胞占比明显减低,而B(CD3-CD19+)淋巴细胞占比明显升高;IgG明显减低,IgM和IgA小于检测下限;该患儿在感染状态下细胞因子水平未明显升高。患儿母亲家系中近3代有9例男性在出生后1岁内因反复感染致死,核心家系全外显子组测序结果发现,患儿X染色体IL-2RG基因(chrX:70329160)存在半合新发错义突变[c.675 C>A,p.S225R(p.Ser225Arg)],其母亲为携带者。依据以上证据患儿被确诊为X连锁重症联合免疫缺陷病(X-SCID)。随后每月静脉注射免疫球蛋白并服用常规抗生素和抗病毒药物预防感染,为患者造血干细胞移植做准备。因患儿出生后已接种卡介苗,患儿6月龄出现了播散性卡介苗病。经治疗后行造血干细胞移植。结论X-SCID患儿机体免疫功能缺陷严重,危及生命,接种活疫苗可能导致严重感染;该研究发现IL-2RG基因c.675 C>A突变是先证者X-SCID遗传学病因的新发致病变异,扩充了X-SCID致病基因IL-2RG的基因变异谱。

FOXP3基因变异致X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征3例患儿的临床及遗传学研究

目的分析3例X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调(IPEX)综合征患儿的临床特点及基因变异情况。方法总结复旦大学附属儿科医院2013年1月24日至2019年7月29日收治的3例IPEX综合征患儿的临床特点、实验室检查与基因检测的结果、治疗及预后的情况。结果3例患儿均于婴幼儿期起病,其中1例以糖尿病伴酮症酸中毒为首发症状,2例以腹泻起病。3例患儿均有消化道受累的表现,其中1例经内镜及病理检查诊断为极早发炎症性肠病。3例患儿中有2例合并内分泌腺受累,其中1例表现为1型糖尿病伴甲状腺球蛋白及甲状腺过氧化物酶抗体阳性,但随访未发现甲状腺功能异常;另1例表现为甲状腺功能低下,予左旋甲状腺素治疗。3例患儿均携带FOXP3基因错义变异,包括c.1222G>A(p.V408M)、c.767T>C(p.M256T)和c.1021A>G(p.T341A)。1例经异基因造血干细胞移植治疗后症状缓解,1例予生物制剂加胰岛素治疗后病情稳定,另1例出生后3个月因难治性脓毒性休克及多器官功能衰竭夭折。结论FOXP3基因变异相关的IPEX综合征可能具有起病早、临床表现多样的特点。对于婴幼儿期起病的慢性腹泻伴多内分泌腺或多系统受累的男性患儿,需警惕IPEX综合征的可能性,尽早通过基因检测进行诊断和治疗,并为遗传咨询提供依据。

三个X-连锁重症联合免疫缺陷病家系的IL2RG基因新突变及产前诊断

目的:对3个X-连锁重症联合免疫缺陷病(SCID)家系进行致病基因突变分析和产前诊断。方法:收集2017~2018年于深圳市妇幼保健院医学遗传中心就诊的3个X-SCID家系中先证者及家庭成员的外周血,提取DNA,应用高通量测序和Sanger测序筛查三个家系IL2RG基因的突变位点,并分析突变位点的致病性,继而对家系中的高危胎儿进行产前诊断。结果:共发现IL2RG基因3个致病突变,均未见报道。3个X-SCID家系分别发现IL2RG基因:c.272dupA(p.Tyr91*),c.245_246insC(p.P82Pfs*15)和c.507delG(p.Q169fs*170)突变。结论:IL2RG基因突变:c.272dupA(p.Tyr91*),c.245_246insC(p.P82Pfs*15)和c.507delG(p.Q169fs*170)分别是3个家系的发病原因。高通量测序结合Sanger测序对X-SCID的基因诊断具有重要的价值。

X-连锁严重联合免疫缺陷病的植入前遗传学诊断

【目的】采用多重置换扩增建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,应用于X-连锁严重联合免疫缺陷病(X-SCID)的植入前遗传学诊断(PGD)。【方法】选择5个位于致病基因IL-2受体γ链(IL2RG)基因两侧的短串联重复序列(STR)位点对X-SCID家系进行单体型分析,采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,对扩增产物采用在家系分析中具有多态性的STR位点进行单体型分析,结合位点Amel进行性别诊断,STR位点均采用单重荧光PCR,同时对IL2RG基因exon5进行测序分析。【结果】对家系分析中,共有3个STR位点具有多态性。对10个单淋巴细胞及10个单卵裂球进行了预实验:MDA扩增成功率为100%,对致病基因IL2RG exon5的行基因测序的检测效率为100%;对于3个有多态性的STR位点和AMEL,PCR扩增效率为96.3%(77/80),等位基因脱扣率(ADO)为11.5%(7/61)。对该家系进行了一个周期的PGD,对7个胚胎进行了诊断,其中2个为正常胚胎,移植后获得双胎妊娠,早产活产一个健康男婴及一个健康女婴。【结论】采用多重置换扩增结合致病基因特异性扩增测序检测及单体型分析在单细胞水平对X-连锁严重联合免疫缺陷病进行检测,两者相结合可避免污染、等位基因脱扣等导致的误诊,提高了PGD诊断效率。

炎症性肠病IL-1β基因多态性及连锁不平衡研究

目的 了解炎症性肠病患者IL-1β基因多态性和等位基因频率的分布情况，探讨IL-1β基因多态性与炎症性肠病（IBD）的发病关系。方法 采用PCR—RFLP法，对IBD组（N=48）和正常对照组（N=137）IL—1β启动子区-31、-511位点进行基因分型，计算等位基因频率分布，并进行连锁不平衡分析及其单倍型与疾病的关联分析。结果 正常对照组IL—1β—31CC、CT、TT基因型分别为22．63％、56．93％、20．44％，IBD组为33．33％、39．58％、27．08％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；两组的等位基因频率间也无显著性差异（P〉0．05）。正常对照组IL—1β—511TT、TC、CC基因型分别为21．17％、52．55％、26．28％，IBD组为29．17％、43．75％、27．08％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；两组的等位基因频率间也无显著性差异（P〉0．05）。IL—1β-31C／T与-511T／C间存在强连锁不平衡（D’=0．915，r=0．735）。IL—1β-31C／-511T单倍体型发生IBD的风险增加（OR=1．216．95％C10．763～1．937）。结论 IL—1β—31、-511均以杂合子C／T、T／C基因型所占的百分比高，提示基因多态性可能与种族有关。IL—1β—31C／T与-511T／C之间存在强连锁不平衡，-31C／-51lT单倍体型发生IBD的风险增加。

串联质谱技术在X-连锁肾上腺脑白质营养不良病筛查中的应用价值

目的建立串联质谱(MS/MS)检测极长链酰基肉碱(VLCAC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)的方法,初步探讨VLCAC和LPC对X-连锁肾上腺脑白质营养不良病(X-ALD)的诊断价值。方法选取被明确诊断为X-ALD的患儿10例和行遗传代谢性疾病筛查的正常新生儿3530名。收集所有对象的滤纸干血片样本,使用含稳定同位素内标[2H3-二十六碳酰基肉碱(2H3-C26)和2H4-二十六碳溶血磷脂酰胆碱(2H4-C26:0-LPC)]的溶剂萃取滤纸干血片样本中的VLCAC和LPC(非衍生化法),直接采用MS/MS检测二十碳酰基肉碱(C20)、二十二碳酰基肉碱(C22)、二十四碳酰基肉碱(C24)、二十六碳酰基肉碱(C26)、二十碳溶血磷脂酰胆碱(C20:0-LPC)、二十二碳溶血磷脂酰胆碱(C22:0-LPC)、二十四碳溶血磷脂酰胆碱(C24:0-LPC)和二十六碳溶血磷脂酰胆碱(C26:0-LPC)。对建立的MS/MS方法进行方法学评价(精密度、准确度、线性)。采用偏最小二乘法分析各项指标对疾病的贡献度。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断X-ALD的效能。结果低水平C26和C26:0-LPC的批内变异系数(CV)分别为4.16%和7.75%,批间CV分别为8.29%和9.17%;高水平C26和C26:0-LPC的批内CV分别为5.57%和8.68%,批间CV分别为7.45%和8.11%。准确度为93.25%~104.94%。C26和C26:0-LPC实测值与预测值之间的决定系数(r2)分别为0.996和0.994。除C20、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC外,其他指标正常对照组与X-ALD组差异均有统计学意义(P<0.05)。C26、C26/C22比值和C26:0-LPC对疾病的贡献度最高(偏回归系数分别为0.1753、0.1300和0.0792)。ROC曲线分析结果显示,C26和C26/C22比值诊断X-ALD的敏感性均为100%,特异性均为100%,曲线下面积(AUC)均为1.0;C26:0-LPC诊断X-ALD的敏感性为100%,特异性为72.9%,AUC为0.972。结论非衍生化MS/MS检测VLCAC和LPC有较高的精密度和准确度,C26或可作为诊断X-ALD的生物标志物。

单细胞单轮二重PCR诊断X-连锁鱼鳞病

X-连锁鱼鳞病(X-linked ichthyosis,XLI)是隐性遗传病,是人类最常见的先天性代谢疾病之一.从单细胞水平诊断XLI,就可为开展XLI的胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)打下基础.采用单轮二重PCR扩增患者和正常女性的单淋巴细胞以及正常人单卵裂球的STS基因和amelogenin(Amel)基因,在正常人单淋巴细胞组和正常人单卵裂球组中STS基因扩增成功率分别为95.8%、90.9%,在患者单淋巴细胞组中的假阳性率为1.5%;在Amel-X和Amel-Y基因位点扩增成功率分别为91.9%、92.7%,污染率分别为1.4%、0;ADO的发生率为6.2%.结果表明单细胞单轮二重PCR诊断XLI具有较高的准确性和特异性,有助于我们进一步开展XLI的PGD.

X-连锁慢性肉芽肿病的植入前遗传学诊断方法学研究

目的:采用多重置换扩增(MDA)建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断(PGD)方法,可应用于X-连锁慢性肉芽肿病的PGD。方法:采用16个位于CYBB基因两侧的短串联重复序列(STR)位点对X-连锁慢性肉芽肿病家系进行单体型分析,采用MDA对单细胞进行全基因组扩增,对其产物采用在家系分析中具有多态性的STR位点及特异性扩增CYBB基因进行分析,同时采用位点Amel进行性别诊断。结果:家系分析结果显示共有7个STR位点具有多态性。共进行了10个单淋巴细胞及10个单卵裂球的MDA,全部扩增成功。对致病基因CYBB外显子8的聚合酶链反应(PCR)扩增效率为100%,其中1个单淋巴细胞发生致病位点的等位基因脱扣(ADO),10个单卵裂球诊断结果均为215 bp,未检测出异常的204 bp条带,ADO率为10%(1/10);对于7个有多态性的STR位点和位点Amel,PCR扩增效率为96.9%(155/160),ADO率为11.3%(13/115)。结论:采用MDA结合致病基因特异性扩增及单体型分析在单细胞水平对X-连锁慢性肉芽肿病进行检测,两者相结合可避免污染、ADO等导致的误诊,可提高PGD的诊断效率,为进一步的临床应用奠定了基础。

伴房间隔缺损的X-连锁鱼鳞病1例

报告1例伴房间隔缺损的X-连锁鱼鳞病。患儿男,9岁。出生后皮肤干燥脱屑,大量片状黑褐色鳞屑,伴左侧肢体运动障碍9年,易劳累7年。心脏彩色超声心动图示Ⅱ孔中间型房间隔缺损,头颅CT显示右额顶区脑软化灶。

X-性连锁鱼鳞病一家系STS基因及其侧翼序列检测

目的检测一个中国X-性连锁鱼鳞病(XLI)家系类固醇硫酸酯酶(STS)基因及其侧翼序列突变情况。方法收集家系患者临床资料,抽取该家系中患者、表型正常者及与该家系无关的50例健康人外周血,提取外周血DNA,PCR扩增外周血基因组DNA的STS基因及侧翼序列。结果家系中全部患者均存在STS基因及侧翼序列DXS1139-DXS22S1缺失,而表型正常者及50例健康人未发现这种缺失。结论 STS基因及侧翼序列缺失是导致该家系患者临床表型的原因。

X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征二例并文献复习

目的 探讨X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征（IPEX）的临床表现、实验室检查、治疗和预后特点,提高儿科医师的认识.方法 回顾分析2例确诊IPEX患儿的临床资料,并复习相关文献进行讨论.结果 2例IPEX患儿分别表现为慢性腹泻起病和糖尿病酮症酸中毒起病,均合并重症感染.住院期间行基因测序,结果显示FOXP3基因突变.最终1例经造血干细胞移植成功,1例等待移植中.结论 早发顽固性腹泻,多发内分泌疾病及反复感染等临床表现的婴幼儿需警惕IPEX,基因测序可明确诊断,早期移植可缓解病情.

以极早发型炎症性肠病样改变为主要特征的X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征一例

1例患儿6月龄起病,以反复腹泻、便血,伴有营养不良、贫血、肛瘘为主要表现,初诊为极早发型炎症性肠病,经过抗感染、营养治疗、生物制剂、美沙拉嗪及激素治疗后效果不佳,完善二代基因测序证实为X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调(IPEX)综合征。停止治疗后随访至4岁,患儿症状自发缓解。以极早发型炎症性肠病样表现为主要特征且症状自发缓解的IPEX综合征尚未见中文报道。

一个X-连锁遗传鱼鳞病家系的分析

目的:寻找由DNA损伤引起的人类表型缺陷,为人类遗传资源的收集与保藏以及人类基因结构与功能的研究打下基础.方法:通过实地调查得到表型缺陷家系,然后进行系谱分析.结果:得到一个X-连锁遗传鱼鳞病家系,3代16位成员中有3例患者.结论:鱼鳞病是由DNA损伤引起的人类表型缺陷,本文中该病症符合X-连锁隐性遗传.

X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征一例基因及蛋白表达研究

目的探讨表现为顽固性腹泻、皮疹以及有或无胰岛素依赖性糖尿病的疑似X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征（IPEX）患儿FOXP3基因变异及其蛋白表达水平。方法对近两年来我院收治的4例表现为早发性顽固性腹泻、皮疹以及有或无胰岛素依赖性糖尿病的疑似IPEX男性患儿进行FOXP3基因扩增及测序分析，将发现的可疑突变位点通过数据库查询及与100例健康儿童相同位点序列比较，采用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞比例和F0肼）3蛋白表达。结果4例疑似患儿中发现1例FOXP3突变，为11号外显子66位碱基错义突变（G〉A），导致FOXP3蛋白370位氨基酸由甲硫氨酸替换为异亮氨酸（Met370Ile），患儿母亲为携带者。100例正常儿童FOXP3基因相同位点未见变异，故可排除该位点多态性可能。该突变为此前未见报道的新突变，患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞比例升高而FOXP3表达量无减低。结论通过临床、免疫学筛查和基因分析，发现我国首例IPEX患儿（g：13128G〉Ac：1298G〉AMet370Ile），对早发胰岛素依赖性糖尿病、顽固性腹泻及不明肾脏损害婴幼儿，应考虑IPEX可能并进行FOXP3基因分析。