X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1通过自噬途径调控Caspase 1介导的胃肠道间质瘤细胞焦亡

目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和GIST细胞系(GIST-T1、GIST-430、GIST-882)中XAF1的表达水平;采用脂质体介导转染法将pcDNA3.1-XAF1重组质粒染进GIST-882细胞,以构建高表达XAF1的GIST-882细胞。GIST-882细胞分为对照组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体质粒)、pcDNA3.1-XAF1组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒)、pcDNA3.1-XAF1+Rap组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒并给予自噬激活剂雷帕霉素处理),免疫荧光染色检测各组细胞内微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与Beclin1蛋白表达水平,ELISA法检测各组细胞上清中白细胞介素,IL-1β、IL-18含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测各组细胞LDH释放率,Western blot检测各组细胞中Caspase-1及其活化形式cleaved-Caspase-1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)蛋白表达水平。结果:与RGM-1细胞比较,GIST-T1、GIST-430、GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);细胞转染后,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于pcDNA3.1组、对照组(P<0.05)。与对照组比较,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显减弱,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著减少(P<0.05),细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著升高(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著增加(P<0.05);与pcDNA3.1-XAF1组比较,pcDNA3.1-XAF1+Rap组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著增加(P<0.05),同时,细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著下降(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著减少(P<0.05)。结论:XAF1在GIST细胞中表达下降,提高XAF1表达能通过抑制自噬从而促进Caspase 1介导的GIST细胞焦亡,发挥抗肿瘤作用。

狼疮肾炎患者外周血B细胞中X-盒结合蛋白1的表达和临床意义

目的检测狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者和健康者外周血CD19+B细胞中未剪接型X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1 unspliced,XBP1u)和剪接型X盒结合蛋白1转录因子(X-box binding protein 1spliced,XBP1s)mRNA的表达,并探讨XBP 1在LN患者的临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术检测65例LN患者和30名健康对照组外周血CD19+B细胞中XBP1u、XBP1s的表达水平,用流式细胞术检测外周血中CD19−CD138+浆细胞/CD19+B细胞比例,分析LN患者XBP1表达与B细胞亚群及临床相关指标的相关性。结果(1)LN组CD19+B细胞活动期组中XBP1u mRNA的表达水平为(0.078±0.034),高于健康对照组的(0.035±0.011)(P<0.05)、高于稳定期组的(0.049±0.016)(P<0.05);LN组CD19+B细胞活动期组中XBP1s mRNA(0.076±0.037),高于健康对照组的(0.022±0.010)(P<0.05)、高于稳定期组的(0.043±0.017)(P<0.05);(2)LN组中CD19−CD138+浆细胞/CD19+B细胞比例活动期组为(0.059±0.024),显著高于健康对照组的(0.034±0.011)(P<0.01)、活动组(0.059±0.024)高于稳定组的(0.073±0.036)(P<0.05);(3)LN患者XBP1u、XBP1s表达与CD19−CD138+浆细胞/CD19+B细胞比例呈正相关(r值分别为0.138、0.036),与抗双链DNA抗体、系统性红斑狼疮疾病活动性指数评分值呈正相关(r值分别为0.417、0.058),与血红蛋白、补体C3呈负相关(r值分别为−0.559、−0.219)。结论(1)LN患者外周血单个核细胞中XBP1u、XBP1s mRNA在活动组中表达量较健康组增加,且与系统性红斑狼疮疾病活动性指数评分值及抗双链DNA抗体呈正相关;(2)XBP 1在LN患者B细胞中表达升高,与浆细胞明显相关,提示XBP 1可能通过促进B细胞分化而参与LN的发病。

HAX-1调控人宫颈癌Hela的细胞增殖

目的探讨造血细胞特异性蛋白1(HS-1)相关蛋白X-1(HAX-1)对宫颈癌Hela细胞增殖的调控作用。方法以人宫颈癌Hela细胞系为研究模型,采用脂质体介导法将HAX-1 siRNAs和阴性对照siRNA转染Hela细胞并构建HAX-1沉默细胞系(HAX-1沉默组),以HAX-1高表达质粒和pcDNA3.1空载质粒转染Hela细胞并构建HAX-1过表达细胞系(HAX-1过表达组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测转染后Hela细胞中HAX-1的表达情况;EdU试验检测转染后的细胞增殖能力;MTT试验检测转染后的细胞活力;流式细胞术检测HAX-1对转染后Hela细胞周期和细胞凋亡的变化;RT-qPCR检测转染后Ki-67、c-Myc、BCL-2/BAX基因的表达水平。结果沉默HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著降低,而过表达HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达HAX-1后,HAX-1过表达组中EdU阳性细胞数目下降,细胞活力降低,G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,细胞凋亡率上升,增殖相关基因Ki67表达降低,BCL-2/BAX基因显著降低(P<0.05),而HAX-1沉默组则具有相反的表现。结论HAX-1的表达抑制了Hela细胞增殖,并通过BCL-2/BAX途径诱导其凋亡。

HAX-1通过调控MDM2/SMAD3通路对TGF-β1诱导的特发性肺间质纤维化的作用机制

目的探讨造血细胞特异性蛋白1相关蛋白X-1(HAX-1)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的特发性肺间质纤维化的作用及机制。方法将A549细胞分为对照组(无处理)、TGF-β1组(用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、NC si组(用阴性对照siRNA转染细胞,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+pcDNA3.1组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用pcDNA3.1空质粒转染细胞,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+MDM2组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+MDM2+DMSO组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,向细胞培养液中加入溶剂DMSO处理细胞30 min,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+MDM2+SIS3组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,用终浓度为1μmol·L^(-1)溶于DMSO的SIS3处理细胞30 min,再用5μg·L^(-1)的TGF-β1诱导48 h)。相应处理结束后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;Western blot检测HAX-1、鼠双微体基因2(MDM2)、SMAD3、p-SMAD3、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)蛋白表达水平。结果TGF-β1诱导细胞后,细胞由鹅卵石形或多角形转变为梭形、纺锤形,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),HAX-1、α-SMA和COL1A1蛋白表达升高(P<0.05)。干扰HAX-1可提高E-cadherin蛋白表达(P<0.05),抑制MDM2、p-SMAD3、α-SMA和COL1A1蛋白表达(P<0.05),并且细胞形态又转变为鹅卵石形或多角形。MDM2过表达抵消HAX-1干扰对p-SMAD3、E-cadherin、α-SMA和COL1A1蛋白表达的影响(P<0.05)。SMAD3抑制剂SIS3处理后细胞形态又转变为鹅卵石形或多角形,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),α-SMA和COL1A1蛋白表达下降(P<0.05)。结论HAX-1在TGF-β1诱导的A549细胞中高表达,HAX-1敲低可通过MDM2/SMAD3通路抑制TGF-β1诱导的肺泡细胞纤维化过程。

江苏省高职院校物流管理专业1+X证书实施现状研究

文章综合运用文献研究和调查研究,以首批1+X试点专业领域的物流管理专业为例,对高等职业院校实施1+X证书制度的困境及原因进行了全面细致的调查研究。研究过程中对江苏省高职物流管理专业的学生、老师进行了问卷调查,并结合深度访谈,发现高职院校面临着推行1+X证书制度困境。在此基础上分析了造成高职院校推行1+X证书制度的困难的原因。根据1+X推行困境的原因,提出四个方面的解决策略。高等职业院校实施1+X证书制度有着十分重要的价值,1+X证书制度将推动职业院校的学生就业竞争能力和人才供给能力的提升,职业院校的市场吸引力得到增强,也将推动职业教育深入改革。

1+X证书制度下高职院校质量评价指标体系构建

1+X证书制度是我国职业教育改革的一项重大制度创新,是对职业教育人才培养模式的一场深刻变革。根据1+X证书制度要求,从“双师”素质、教师队伍建设、教学资源建设、课程体系建设等方面入手构建高职院校质量评价指标体系。高职院校作为1+X证书制度的实施主体,如何把握1+X证书制度给高职院校带来的机遇与挑战,如何构建1+X证书制度下高职院校质量评价指标体系,是摆在高职院校面前的一项重要课题。基于对1+X证书制度的理解和1+X证书制度下高职院校质量评价指标体系构建的实践探索,总结出1+X证书制度下高职院校质量评价指标体系构建策略。

1+X证书背景下药品经营人才培养研究

目的探讨“1+X”证书背景下药品经营人才培养路径。方法以“药品购销”职业技能等级标准为指南,以“1+X”药品购销员考试内容为依据进行改革。结果修订和完善人才培养方案、课程标准,同时进行课程“三教”改革。结论“1+X”证书制度背景下进行药学专业(群)教育改革必要可行。

热电池用Co_(x)Fe_(y)Ni_(1-x-y)S_(2)正极材料的性能研究

采用高温固相法合成了Co_(x)Fe_(y)Ni_(1-x-y)S_(2)正极材料,并研究了掺杂金属比例对其性能的影响。测试结果表明,制备的Co_(x)Fe_(y)Ni_(1-x-y)S_(2)为单一的固溶体材料,微观形貌为多面体颗粒,材料的热分解温度在640℃以上,且随着x的增大和y值的减小而增大。当x=0.5,y=0.3时,Co_(x)Fe_(y)Ni_(1-x-y)S_(2)具有最佳的电性能,工作时间可达2774 s,比容量为1733.8 As/g,工作初期内阻低于15 mΩ。

“1+X”证书融入汽车制造类专业模块化课程设计的研究与实践

“1+X”证书制度是国家衡量学生技能水平准尺之一。以汽车制造类专业模块化课程设计为例,以“1+X”证书实施为导向,强化技能培训,首先将书证培训融入汽车制造类人才培养方案,开发配套模块化课程设计方案,然后将职业技能考核等级标准融入课程标准,开发核心课程标准和教学资源包;构建汽车制造类专业模块化课程考核评价模式以及总结经验形成管理制度,最后实施效果的反馈:该课程模块化的设计不仅使学生综合素养得到拓展和提升,真正培养出有创造性和开拓性的高技能人才,还能有效缓解结构性就业问题。

高职1+X虚拟仿真实训教学模式研究

随着信息化技术的快速发展,虚拟仿真技术被普遍地应用在高职实践教学中。结合与工业机器人技术专业相关的1+X证书考核内容,构建1+X虚拟仿真实训教学模式,提出了对搭建虚拟仿真实训系统、调整专业课程教学内容、提升教师职业能力水平和改变学生单一实训模式进行改革的建议,在一定程度上解决了在实训教学过程中高投入、高损耗、高风险的“三高”问题,调动了学生自主学习的积极性,提高1+X证书考核通过率,从而培养高质量技能型人才。

1+X和AHK书证融通下的新型活页式教材开发和应用——以中职《数控车床编程与实训》为例

以《数控车床编程与实训》活页式教材开发为例,阐述1+X和AHK书证融通下的新型活页式教材的开发。教材开发以立德树人为根本要求,以为党育人、为国育才为根本目标,以学生为中心,以1+X证书和AHK职业资格证书要求为标准,以项目为载体,以多媒体为补充,注重项目的趣味性、产品的实践性、技能的层次性、内容的灵活性;将通用核心素养和职场核心素养贯穿技能学习过程,技能学习和素养学习紧密融合、相互促进。学生应通过举一反三的动手和实践操作练习,获得机械产品制造的能力,依次通过学业水平测试、1+X车铣加工职业技能等级考试、AHK切削机械工认证考试,成为具有较高实践操作水平、较高职业素养的高素质技能人才。

职业教育1+X证书制度的实施路径研究

1+X证书制度改变了传统逻辑下职业教育发展思路,提升了以职业技能培养为中心的职业教育工作能力,实现了职业教育的与时俱进。新时期职业教育对1+X证书制度的运用,要明确其核心优势,把握其实施发展趋势,构建人才培养载体,采用建立基于职业证书管理的职业教育体系,加强围绕职业证书的教育实践评估,优化职业技能培养学分管理标准及深化校企合作对接等多种实施路径,以期提升基于1+X证书制度的职业人才培养质量。

双高建设背景下“1+X”课证融通与专业群人才培养协调发展模式探究

双高计划是推动中国教育现代化的重要决策,围绕办好新时代职业教育的新要求,集中力量建设一批高水平专业群。作为“双高计划”遴选的核心指标,专业群的建设水平在很大程度上代表了高职院校的办学水平,同时也是高职院校建设的关键。基于“1+X”课证融通模式,分析“双高计划”背景下高职院校电子商务专业群建设。针对高职院校电子商务专业群人才培养面临的问题,借助“1+X”课证融通体系,从立足岗位需求,深化校企合作,打造优质专业群师资团队等方面,探索专业群特色人才培养模式,为区域高职院校向社会输出高级职业技术技能人才提供路径支持。

基于新型“1+X+N”人才培养模式的一流本科课程建设探索

为了适应时代的发展需求,响应国务院提出的在应用型本科高校启动“学历证书+若干职业技能等级证书”制度(即“1+X”证书制度)的试点工作,民办本科院校积极探索“1+X+N”人才培养新模式。在人才培养新模式下,省级一流本科课程光纤通信技术课程组从明确课程定位、推动教学改革、加大资源建设、优化教学内容与实施过程、推进课程思政、改善课程成绩评定等方面开展工作,努力提升学生在光纤通信方面的综合应用能力,培养出满足新时代通信发展需求的高质量人才。

1+X证书制度下桥隧检测专业课证融通的探究

在“1+X”证书制度背景下,如何将高职院校的课程标准与职业技能等级证书有机结合,实现课证融通,是高职院校教学改革的目标。本文以高职院校桥隧检测专业为例,针对“1+X”证书制度下传统课程体系对接“X”证书要求存在的问题进行分析,并针对这些问题,探索“1+X”证书制度下桥隧检测专业课证融通的实施,提出了课证融通、育训并举、师生共进等方面的相应对策。

“1+X”证书制度下新型活页式教材开发研究

“1+X”证书制度与活页式教材是我国职业教育的重点建设方向。“1+X”证书制度下的新型活页式教材同时服务于学历教育和职业教育,是职业院校当前开展教学的重要手段和载体。在调查高职园艺技术专业蔬菜生产技术课程教材开发现状的基础上,探讨了新型活页式教材的开发策略,对于实践“1+X”证书制度试点工作和“三教”改革,培养复合型的园艺技术技能人才有着积极作用。

1+X证书制度下的书证融通研究——以机电一体化专业为例

在介绍1+X证书制度的客观信息与发展历程的基础上,阐述了书证融通的基本情况。同时,根据机电一体化专业的实际情况和教学案例研究了结合1+X证书制度完善书证融通的有效策略。希望可以为相关人士提供帮助和借鉴,深度贯彻落实1+X证书制度,完成机电一体化专业的书证融通,为社会与经济建设输送高质量的复合型人才,助力国家发展。

汽车专业“1+X”证书考核的实践与探索

本文通过对汽车专业实施“1+X”证书培训考核的实践进行分析总结,从1+X证书推进需要重视的证书类型的选择、实施团队的建设、培养体系的创新,以及几年证书考核结果的分析等几方面问题进行了分析总结,阐明了构建“岗课赛证”融通的教学要求,即三个标准的融合为基础,构建融合的培训与考核体系,融合各级技能竞赛要求。同时构建产教融合的师资队伍,最终形成符合“1+X”证书需要,适应“岗课赛证”要求的教学体系。

1+X证书制度下高职机械类专业“岗课赛证”人才培养模式构建

“1+X”证书制度的本质是实现书证衔接融通,“岗课赛证”的人才培养模式就是在高职院校与企业之间搭建人才培养的桥梁,“岗”与“课”是桥梁的两端,“赛”与“证”则是两座桥梁。本文探讨1+X证书制度下“岗课赛证”融合育人的人才培养模式构建,要将岗位标准、职业技能大赛、职业技能等级证书考核纲要融入课程体系,同时构建科学的“岗课赛证”教学体系和人才培养评价体系,在此基础上提出1+X证书制度下“岗课赛证”融合育人的保障要素,一是要培养“岗课赛证”融合育人的教师团队,二是要完善“岗课赛证”融合育人的教学资源,三是要构建“岗课赛证”融合育人的新生态。

1+X证书制度下老年护理专业教学改革探究——以朝阳市卫生学校为例

为了有效推进1+X证书制度下职业院校护理专业健康、有序发展,培养出“一专多能”的复合型护理专业技能型人才,以朝阳市卫生学校为例,分析目前老年护理专业教学存在的问题,并针对地提出多渠道提升专任教师实践技能、构建完善的课程体系、多维度建设教学资源、构建综合考核评价体系、完善实训基地建设等策略,为1+X证书制度下职业院校教学改革提供参考.