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Effects of transfected adenovirus-mediated transcription factor X-box binding protein 1 on hippocampal-derived neural stem cell proliferation and apoptosis under hypoxia 被引量:4
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作者 Ying Sha Baohua Liu +3 位作者 Qun Liu Lei Song Jia Fan Yong Liu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第13期981-986,共6页
BACKGROUND: Neural stem cell (NSC) survival is closely associated with cell apoptosis in ischemic-hypoxic regions following transplantation. Numerous studies have revealed that X-box binding protein 1 (XBP1) is a... BACKGROUND: Neural stem cell (NSC) survival is closely associated with cell apoptosis in ischemic-hypoxic regions following transplantation. Numerous studies have revealed that X-box binding protein 1 (XBP1) is a transcription factor during endoplasmic reticulum unfolded protein response and is essential for cell survival, differentiation, and anti-apoptotic effects. OBJECTIVE: To determine the effects of the XBP1 gene on NSC proliferation and apoptosis under hypoxic conditions following XBP1 gene transfection into rat embryonic hippocampal NSCs using recombinant adenovirus vector. DESIGN, TIME AND SETTING: In vitro experiments were performed at the Laboratory of Cell Biology of Jilin University and Laboratory of Proteomics, Department of Neurology, Jilin University China from September 2008 to November 2009. MATERIALS: Recombinant adenovirus package XBP1 gene and Ad-XBPl-enhanced green fluorescent protein plasmid (Guangzhou Easywin BioMed Technology, China), rabbit anti-XBP1 and its target gene estrogen receptor degradation-enhancing a-mannosidase-like protein (EDEM) glucose-regulated protein 78 (GRP78), anti-apoptotic molecule Bcl-2 and proapoptotic molecule Bax polyclonal antibody (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA, USA), and COCI2 (Sigma, St. Louis, MO, USA) were used in the present study. METHODS: Hippocampi from embryonic, Sprague Dawley rats on gestational day 16 were harvested for NSC isolation and cloning, followed by immunofluorescence for Nestin and sub-culturing. The recombinant adenovirus Ad-XBPl-enhanced green fluorescent protein plasmid was transfected into rat embryonic hippocampal NSCs, and then CoCl2 was applied to induce hypoxia. MAIN OUTCOME MEASURES: Cell quantification and 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide colorimetric assay were utilized to detect proliferation in XBPl-transfected NSCs for 7 consecutive days. Western blot assay was utilized to quantify XBP1 GRP78, EDEM, Bcl-2, and Bax expression. Flow cytometry was used to measure apoptosis. RESULTS: NSC proliferation was significantly enhanced following XBP1 gene transfection (P 〈 0.05). Under hypoxic conditions, GRP78, EDEM, and Bcl-2 levels increased, but Bax levels decreased. In addition, NSC apoptosis decreased following transfection (P 〈 0.05). CONCLUSION: The XBP1 gene was successfully transfected into rat embryonic hippocampal NSCs using a recombinant adenovirus vector. NSC proliferation following transfection, as well as anti-apoptotic effects under hypoxia, was significantly increased. 展开更多
关键词 x-box binding protein 1 HYPOXIA apoptosis endoplasmic reticulum stress neural stem cells transplantation nerve growth factor neural regeneration
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Exosomes derived from microglia overexpressing miR-124-3p alleviate neuronal endoplasmic reticulum stress damage after repetitive mild traumatic brain injury
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作者 Yan Wang Dai Li +12 位作者 Lan Zhang Zhenyu Yin Zhaoli Han Xintong Ge Meimei Li Jing Zhao Shishuang Zhang Yan Zuo Xiangyang Xiong Han Gao Qiang Liu Fanglian Chen Ping Lei 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第9期2010-2018,共9页
We previously reported that miR-124-3p is markedly upregulated in microglia-derived exosomes following repetitive mild traumatic brain injury.However,its impact on neuronal endoplasmic reticulum stress following repet... We previously reported that miR-124-3p is markedly upregulated in microglia-derived exosomes following repetitive mild traumatic brain injury.However,its impact on neuronal endoplasmic reticulum stress following repetitive mild traumatic brain injury remains unclear.In this study,we first used an HT22 scratch injury model to mimic traumatic brain injury,then co-cultured the HT22 cells with BV2 microglia expressing high levels of miR-124-3p.We found that exosomes containing high levels of miR-124-3p attenuated apoptosis and endoplasmic reticulum stress.Furthermore,luciferase reporter assay analysis confirmed that miR-124-3p bound specifically to the endoplasmic reticulum stress-related protein IRE1α,while an IRE1αfunctional salvage experiment confirmed that miR-124-3p targeted IRE1αand reduced its expression,thereby inhibiting endoplasmic reticulum stress in injured neurons.Finally,we delivered microglia-derived exosomes containing miR-124-3p intranasally to a mouse model of repetitive mild traumatic brain injury and found that endoplasmic reticulum stress and apoptosis levels in hippocampal neurons were significantly reduced.These findings suggest that,after repetitive mild traumatic brain injury,miR-124-3 can be transferred from microglia-derived exosomes to injured neurons,where it exerts a neuroprotective effect by inhibiting endoplasmic reticulum stress.Therefore,microglia-derived exosomes containing miR-124-3p may represent a novel therapeutic strategy for repetitive mild traumatic brain injury. 展开更多
关键词 apoptosis C/EBP homologous protein endoplasmic reticulum stress EXOSOME inositol-requiring enzyme MICROGlIA miR-124-3p neuron repetitive mild traumatic brain injury x-box binding protein 1
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噬菌体展示protein A及protein L Ig结合单结构域随机组合文库及Ig亲和筛选 被引量:10
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作者 徐容 沈毅臖 +6 位作者 邓松华 蔡春晓 陈秋莉 贾建安 王锦红 潘欣 潘卫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期535-543,共9页
ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,... ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,各结构域DNA片段经SacⅠ酶切后,再随机连接形成各种不同长度的分子组合文库,将该文库呈现在噬菌体表面构建了噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库,所建组合文库容量为2.3×106个菌落形成单位,滴度为4.1×1011TU/ml,包含各种单结构域片段,并以随机方式连接.用人Ig对该文库进行4轮亲和筛选,随机挑选36个代表性的阳性克隆进行序列测定分析表明,亲和筛选获得了多种非天然形式存在的新的Ig结合分子结构,其中32个克隆具有由proteinL的单结构域和proteinA的单结构域间隔重复排列而成的特征性(MDPL-MDPA)n结构.对噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库的体外分子进化研究的尝试,为Ig结合分子的结构和功能研究提供了一新的途径,也为Ig结合分子的定向改造打下基础. 展开更多
关键词 噬菌体展示 分子进化 结构域 组合文库 protein A protein l
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尿Fetuin-A和尿L-FABP对早期糖尿病肾病的诊断价值研究
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作者 覃保瑜 黄鸿 姚彦冰 《右江医学》 2023年第7期609-614,共6页
目的探讨尿胎球蛋白A(Fetuin-A)和尿肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病(DKD)的诊断价值。方法选取2018年1月—2021年6月在广西医科大学第一附属医院住院的2型糖尿病患者162例,根据尿微量白蛋白/尿肌酐(Scr)比值(... 目的探讨尿胎球蛋白A(Fetuin-A)和尿肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病(DKD)的诊断价值。方法选取2018年1月—2021年6月在广西医科大学第一附属医院住院的2型糖尿病患者162例,根据尿微量白蛋白/尿肌酐(Scr)比值(UACR)水平分为正常白蛋白尿(NA)组,微量蛋白尿(MA)组,临床蛋白尿(CA)组,随机选取50例健康体检者为正常对照(NC)组。检测受试者的尿Fetuin-A/尿Scr比值和尿L-FABP/尿Scr比值,以Pearson相关分析和受试者工作特征曲线(ROC曲线)作分析评价。结果与NA组、NC组相比,CA组和MA组的尿Fetuin-A/尿Scr及尿L-FABP/尿Scr水平明显增高(P<0.001),各组尿Fetuin-A/尿Scr及尿L-FABP/尿Scr水平随UACR的增高而增高;尿Fetuin-A/尿Scr及尿L-FABP/尿Scr与估算肾小球滤过率(eGFR)水平呈负相关(r分别为-0.67和-0.72,均P<0.05);尿Fetuin A/尿Scr和尿L-FABP/尿Scr以及两者联合检测的ROC曲线下面积分别为0.842、0.867、0.931。结论尿Fetuin A和尿L-FABP可作为早期DKD的诊断标志物,2个指标的联合检测能进一步提高诊断早期DKD的效能。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 尿胎球蛋白A 尿肝型脂肪酸结合蛋白 尿液 诊断
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The unfolded protein response signaling and retinal Müller cell metabolism 被引量:2
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作者 Kristen Kelly Joshua J.Wang Sarah X.Zhang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第11期1861-1870,共10页
The retina is one of the most energy demanding tissues in the body. Like most neurons in the central nervous system, retinal neurons consume high amounts of adenosine-5′-triphosphate(ATP) to generate visual signal ... The retina is one of the most energy demanding tissues in the body. Like most neurons in the central nervous system, retinal neurons consume high amounts of adenosine-5′-triphosphate(ATP) to generate visual signal and transmit the information to the brain. Disruptions in retinal metabolism can cause neuronal dysfunction and degeneration resulting in severe visual impairment and even blindness. The homeostasis of retinal metabolism is tightly controlled by multiple signaling pathways, such as the unfolded protein response(UPR), and the close interactions between retinal neurons and other retinal cell types including vascular cells and Müller glia. The UPR is a highly conserved adaptive cellular response and can be triggered by many physiological stressors and pathophysiological conditions. Activation of the UPR leads to changes in glycolytic rate, ATP production, de novo serine synthesis, and the hexosamine biosynthetic pathway, which are considered critical components of Müller glia metabolism and provide metabolic support to surrounding neurons. When these pathways are disrupted, neurodegeneration occurs rapidly. In this review, we summarize recent advance in studies of the UPR in Müller glia and highlight the potential role of the UPR in retinal degeneration through regulation of Müller glia metabolism. 展开更多
关键词 unfolded protein response RETINA ller glia metabolism NEURODEGENERATION x-box binding protein 1 glycolysis glucose transporter
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Interaction of Immune System Protein with PEGylated and Un-PEGylated Polymeric Nanoparticles
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作者 Matthewos Eshete Kayla Bailey +2 位作者 Tuyen Duong Thanh Nguyen Santosh Aryal Seong-O Choi 《Advances in Nanoparticles》 2017年第3期103-113,共11页
Biodegradable Nanoparticles (NPs) are under intense investigation due to their potential application in targeted drug delivery. Upon their entry to the biological system, they encounter the immune system, which limits... Biodegradable Nanoparticles (NPs) are under intense investigation due to their potential application in targeted drug delivery. Upon their entry to the biological system, they encounter the immune system, which limits their availability at the intended site. Most importantly, the innate immune system is the one that acts as the first line of defense against foreign materials. It can be activated by collectin proteins which recognize the structural pattern of polysaccharide on the surface of microorganisms. NPs may interact with these proteins in a similar way, and the interaction may lead to beneficial outcomes in vaccine delivery. On the other hand, in targeted drug delivery, it is desirable for the NPs not to be recognized as foreign material as this may lead to their fast elimination from the system through mechanism such as opsonization. We investigated the interaction of PEGylated and un-PEGylated PLGA NPs with Recombinant Human Mannose-Binding Protein (HMBP) in an effort to understand the effect of surface modification on their binding to the protein. Results show that both PLGA-COOH and PLGA-PEG-NH2 bind to HMBP as studied using dynamic light scattering (DLS), fluoresce and UV-vis spectroscopy. However, their binding is shown to have different effect on the structure of the protein. Study done using fluorescence spectroscopy displayed a decrease in fluorescence emission of the protein upon binding to PLGA-COOH. On the other hand the fluorescence emission of the protein increased upon binding to the PLGA-PEG-NH2 indicating conformational changes in the protein structure. 展开更多
关键词 Nanoparticles Mannose-binding protein Poly (l-lactic-Co-Glycolic Acid) NANOPARTIClE protein INTERACTION
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血清内皮细胞特异性分子1、视黄醇结合蛋白4及脂蛋白相关磷脂酶A2水平变化对脑梗死患者疗效有影响 被引量:1
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作者 刘建新 薛海龙 《内科急危重症杂志》 2024年第1期55-58,共4页
目的:探究血清内皮细胞特异性分子1(ESM-1)、视黄醇结合蛋白4(RBP-4)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平与脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性、神经功能缺损的相关性,并分析各指标对疗效的预测价值。方法:收集脑梗死患者127例,入院时... 目的:探究血清内皮细胞特异性分子1(ESM-1)、视黄醇结合蛋白4(RBP-4)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平与脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性、神经功能缺损的相关性,并分析各指标对疗效的预测价值。方法:收集脑梗死患者127例,入院时采用酶联免疫吸附试验测定血清ESM-1、Lp-PLA2水平,采用免疫增强比浊法检测血清RBP-4水平,入院后均给予重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗,根据溶栓后第7天美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为早期有效组、无效组与恶化组,分析各血清指标与斑块稳定性、NIHSS评分、脑梗死面积的相关性,并采用多元线性回归方程分析各指标对疗效的预测价值。结果:早期恶化组血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于早期无效组和有效组,且早期无效组高于早期有效组(P均<0.05);不稳定斑块患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于稳定斑块患者和无斑块患者,且稳定斑块患者高于无斑块患者(P均<0.05);神经功能重度缺损患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于神经功能中度和轻度缺损患者,且中度患者高于轻度缺损患者(P均<0.05);大面积脑梗死患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于中面积和小面积脑梗死患者,且中面积高于小面积脑梗死患者(P均<0.05);血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平与斑块稳定性呈负相关,与NIHSS评分、脑梗死面积呈正相关(P均<0.05);血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平与疗效显著相关(P均<0.05)。结论:血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平可能成为评估脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性、神经功能缺损情况及疗效的生物学标志物。 展开更多
关键词 脑梗死 颈动脉粥样硬化斑块 神经功能缺损 内皮细胞特异性分子1 视黄醇结合蛋白4 脂蛋白相关磷脂酶A2
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RT-PCR克隆籼稻叶绿素a/b结合蛋白基因全长cDNA及序列的in silico分析 被引量:5
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作者 袁定阳 余东 +4 位作者 谭炎宁 孙志忠 韶也 孙学武 段美娟 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期173-177,共5页
根据日本晴cab4基因序列(GenBank:AK104499.1)设计引物,用RT-PCR的方法从籼稻9311中克隆了叶绿素a/b结合蛋白基因的全长cDNA,命名为cab-9311(cab gene from 9311)。insilico分析表明:cab-9311与cab4基因同源性为99%,编码的蛋白含有244... 根据日本晴cab4基因序列(GenBank:AK104499.1)设计引物,用RT-PCR的方法从籼稻9311中克隆了叶绿素a/b结合蛋白基因的全长cDNA,命名为cab-9311(cab gene from 9311)。insilico分析表明:cab-9311与cab4基因同源性为99%,编码的蛋白含有244个氨基酸,与cab4基因编码的蛋白同源性为98%。蛋白分子质量为26.9kD,理论等电点为6.52。第54位~第216位氨基酸是一个典型的叶绿素a/b结合蛋白功能域(chlorophyll a/bbinding domain)。跨膜分析和蛋白质三级预测显示,该蛋白在C端有一个典型的跨膜区。亚细胞定位分析表明该蛋白定位于叶绿体,是一个叶绿体内囊体膜上的锚定蛋白。 展开更多
关键词 水稻 叶绿素a/b结合蛋白基因 克隆 in silico分析
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大菱鲆IGF结合蛋白的营养调控功能
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作者 曾欢 唐明军 +4 位作者 刘成栋 王旋 周慧慧 麦康森 何艮 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1528-1540,共13页
为揭示IGF结合蛋白(Insulin-like growth factor binding protein, IGFBP)对水产动物生理生长和营养代谢的影响,选取大菱鲆肌成纤维细胞作为研究对象,通过生物信息学分析将斑马鱼(Danio rerio)、智人(Homo sapiens)和大菱鲆(Scophthalmu... 为揭示IGF结合蛋白(Insulin-like growth factor binding protein, IGFBP)对水产动物生理生长和营养代谢的影响,选取大菱鲆肌成纤维细胞作为研究对象,通过生物信息学分析将斑马鱼(Danio rerio)、智人(Homo sapiens)和大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)中igfbp基因的氨基酸序列共同进行分析推断进化历史,对肌成纤维细胞进行IGFBPs的抑制剂(NBI 31772)和IGF1R的抑制剂(BMS 554417)处理,通过荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、Annexin V-FITC染色、代谢物测定等分析。结果显示:大菱鲆IGFBP家族共有12个基因,不同的igfbp基因具有显著的组织表达特异性。在脑、鳃、胆囊组织中igfbp2a表达量最高;在眼、肌肉、肾脏、皮肤组织中igfbp5a表达量最高;在脾脏和心脏组织中igfbp3b表达量最高;在肝脏组织中igfbp2b表达量最高;在肠组织中igfbp4表达量最高;大菱鲆肌成纤维细胞在营养诱导后igfbp1a、igfbp3b、igfbp4、igfbp5a和igfbp5b基因表达呈先下降后上升的趋势。igf2相较于igf1对营养应答更敏感。短期抑制IGFBPs能够促进IGF的信号激活能力,而长期抑制IGFBPs则降低IGF的活性并导致细胞凋亡。此外,长期抑制IGFBPs会造成糖酵解和三羧酸循环代谢中间物含量降低,但会积累细胞内游离必需氨基酸。研究成果为进一步认识IGFBPs及IGF信号通路在水产动物中的作用提供了新的参考。 展开更多
关键词 胰岛素样生长信号通路 胰岛素样生长因子结合蛋白 细胞凋亡 营养代谢 大菱鲆
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L-精氨酸对宫内发育迟缓胎鼠胰岛素样生长因子及其结合蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 卢岩 刘晓梅 李书琴 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2006年第4期319-322,共4页
目的宫内发育迟缓(IUGR)儿常有脑发育的异常,L精氨酸具有舒张血管、增加胎盘血流的作用,可用于改善胎盘缺氧状态,促进胎儿生长发育。用被动吸烟法制作孕鼠IUGR模型,孕8~20d给予不同剂量L精氨酸,了解其对宫内发育迟缓胎鼠脑内胰岛素样... 目的宫内发育迟缓(IUGR)儿常有脑发育的异常,L精氨酸具有舒张血管、增加胎盘血流的作用,可用于改善胎盘缺氧状态,促进胎儿生长发育。用被动吸烟法制作孕鼠IUGR模型,孕8~20d给予不同剂量L精氨酸,了解其对宫内发育迟缓胎鼠脑内胰岛素样生长因子及其结合蛋白表达的影响,并探讨L精氨酸的作用机制。方法孕鼠随机分为4组:对照组、模型组、L精氨酸小剂量和大剂量防治组,每组9只。孕21d剖宫取胎,应用酶联免疫吸附法检测各组胎鼠脑组织胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)、胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3)含量,应用荧光定量RTPCR法检测各组胎鼠脑组织IGFⅠmRNA表达。结果与对照组相比较,模型组胎鼠脑组织中IGFⅠ(0.789±0.062ng/mgvs0.947±0.042ng/mg)、IGFⅡ(0.270±0.020ng/mgvs0.374±0.015ng/mg)含量均比对照组明显降低,IGFBP3(0.253±0.011ng/mgvs0.089±0.015ng/mg)含量比对照组明显升高,IGFⅠmRNA表达量(13.12±1.39)×104cps/μgRNAvs(21.28±3.54)×104cps/μgRNA比对照组明显降低,差异均有显著性(P<0.01)。与模型组相比较,小剂量和大剂量L精氨酸防治组IGFⅠ含量明显增高,分别为0.937±0.067ng/mg和0.858±0.077ng/mg,IGFⅡ含量明显增高,分别为0.318±0.018ng/mg和0.354±0.021ng/mg,IGFBP3含量明显降低,分别为0.132±0.006ng/mg和0.146±0.009ng/mg差异有显著性(P<0.01或<0.05)。同时小剂量和大剂量L精氨酸防治组IGFⅠmRNA表达量也明显增高,分别为(19.24±2.48)×104cps/μgRNA和(17.35±2.30)×104cps/μgRNAvs(13.12±1.39)×104cps/μgRNA,差异均有显著性(P<0.01)。结论L精氨酸可增加被动吸烟致宫内发育迟缓胎鼠脑内IGFⅠ、IGFⅡ含量和IGFⅠmRNA的表达,降低IGFBP3含量。L精氨酸防治IUGR的机制与其对胰岛素样生长因子及其结合蛋白表达的影响有关。 展开更多
关键词 l-精氨酸 宫内发育迟缓 胰岛素样生长因子 胰岛素样生长因子结合蛋白 大鼠
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L-4F对oxLDL刺激下脂肪细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的影响 被引量:1
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作者 谢湘竹 赵水平 +1 位作者 于碧莲 钟巧青 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期917-920,共4页
目的观察载脂蛋白A-I模拟肽L-4F对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)刺激下3T3-L1脂肪细胞分泌表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 3T3-L1脂肪细胞促分化成熟后,oxLDL(50μg/ml)刺激脂肪细胞,给予L-4F(1-50μg/... 目的观察载脂蛋白A-I模拟肽L-4F对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)刺激下3T3-L1脂肪细胞分泌表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 3T3-L1脂肪细胞促分化成熟后,oxLDL(50μg/ml)刺激脂肪细胞,给予L-4F(1-50μg/ml),H-89(10μmol/L)及H-89+L-4F(50μg/ml)干预,收集细胞,测定脂肪细胞MCP-1上清液中的浓度和mRNA表达水平,以及脂肪细胞核因子C/EBPα、β的蛋白质水平;改良Boyden小室法检测不同干预组上清液对人外周血单核细胞趋化活性的影响。结果 OxLDL(50μg/ml)刺激使分化成熟的3T3-L1脂肪细胞表达及分泌MCP-1明显增加,并使得诱导的单核细胞移动距离明显增加。L-4F以浓度依赖的方式减少脂肪细胞MCP-1的表达和分泌,降低单核细胞趋化活性;50μg/ml L-4F使MCP-1 mRNA的表达降低(91±6)%(P<0.01)。PKA抑制剂H-89(10μmol/L)干预oxLDL刺激的脂肪细胞后MCP-1 m RNA的表达也显著减少(P<0.01),但是,在50μg/ml L-4F作用的基础上,H-89(10μmol/L)的孵育并未使得MCP-1 mRNA的表达进一步降低(P>0.05)。50μg/ml oxLDL刺激对脂肪细胞C/EBPα的含量无明显影响,但增加C/EBPβ蛋白量,且该作用呈时间依赖性;L-4F和H-89干预均降低C/EBPβ的蛋白质含量。结论 OxLDL时间依赖性地诱导脂肪细胞C/EBPβ的蛋白合成,并增强脂肪细胞MCP-1的表达分泌,L-4F以浓度依赖的方式对抗oxLDL的致炎作用,cAMP/PKA-C/EBPβ信号通道可能是L-4F的作用途径之一。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白(oxlDl) l-4F 脂肪细胞 单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1) 蛋白激酶A CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPs)
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IGFBP-5及cFLIP在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 侯雪晶 刘昕 +1 位作者 乔云波 张友忠 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第7期710-714,共5页
目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5)、细胞型Fas相关死亡结构域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)及高危型人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR及免疫组织化... 目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5)、细胞型Fas相关死亡结构域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)及高危型人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR及免疫组织化学SP法检测28例正常宫颈组织、37例CIN、40例宫颈癌组织中IGFBP-5、cFLIP表达,二代杂交捕获法检测上述患者宫颈分泌物中高危型HPV DNA。结果IGFBP-5蛋白在正常组织、CIN、宫颈癌中表达差异有统计学意义(P<0.05),在CINⅡ/Ⅲ组达高峰,在宫颈浸润癌中IGFBP-5表达下降,且与临床分期、病理分化程度及淋巴结转移有关。IGFBP-5 mRNA在宫颈癌中高于正常组织,但低于CIN组(P<0.05)。cFLIP蛋白及mRNA在正常组织未见表达,在CIN及宫颈癌中随病变程度加深而表达量增加,各组表达差异有统计学意义(P<0.05)。HPV阳性率在CIN及宫颈癌中高于正常组(P<0.05)。结论IGFBP-5及cFLIP与宫颈病变的发展有关,可用于判断患者病情变化及预后。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-5 细胞型Fas相关死亡结构域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤样病变
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尿L-FABP在预测急性肾损伤预后中的意义 被引量:1
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作者 薛婧 陈彩妹 +1 位作者 王凉 孙铸兴 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期528-533,I0003,共7页
目的 观察住院急性肾损伤(AKI)患者尿肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的水平,分析其对肾脏替代治疗(RRT)及住院死亡的预测能力.方法 前瞻性收集经肾内科医师会诊确诊AKI患者103例,留取会诊时患者的血尿标本,检测其血尿肌酐及尿L-FAB... 目的 观察住院急性肾损伤(AKI)患者尿肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的水平,分析其对肾脏替代治疗(RRT)及住院死亡的预测能力.方法 前瞻性收集经肾内科医师会诊确诊AKI患者103例,留取会诊时患者的血尿标本,检测其血尿肌酐及尿L-FABP水平.运用ROC曲线评估尿L-FABP预测AKI患者预后的准确性.结果 ①103例患者中,50例接受了RRT(48.5%),45例住院期间死亡(42.7%);②尿L-FABP可以预测行机械通气及合并脓毒症AKI患者是否需要进行RRT,AUC分别为0.822和0.743(P <0.001);③尿L-FABP可以预测AKI患者住院病死率,当截断值为124.95 ng/mg·Cr,敏感性和特异性均较高.对未发生心衰、行机械通气、AKIN-2和3期的AKI患者,尿L-FABP预测其住院期间死亡准确性好,AUC分别为0.844、0.832、0.912和0.900(P <0.05).校正了年龄、性别、急性肾衰预后评分(ATN-ISS)后,尿L-FABP高于均值组的患者发生住院期间死亡的风险比低于均值组高1.24倍(HR 2.24,95%CI 1.50~3.09,P=0.02).结论 住院患者中AKI的发生率及死亡率高.尿L-FABP可以预测行机械通气、合并脓毒症的AKI患者是否需要RRT,以及AKI患者住院期间死亡率. 展开更多
关键词 急性肾损伤(AKI) 生物学标志物 肝脏型脂肪酸结合蛋白(l-FABP) 预后
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宫内发育迟缓大鼠血清胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ、BP3的变化及L-精氨酸的保护作用 被引量:2
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作者 卢岩 刘晓梅 李书琴 《中国优生与遗传杂志》 2006年第6期22-24,共3页
目的通过L-精氨酸孕期干预后大鼠血清胰岛素样生长因子-Ⅰ、Ⅱ及结合蛋白3水平的变化,探讨L-精氨酸的保护作用及其机制。方法采用被动吸烟法造大鼠IUGR模型,孕鼠随机分为4组:对照组、模型组、L-精氨酸小剂量和大剂量防治组,每组9只。孕... 目的通过L-精氨酸孕期干预后大鼠血清胰岛素样生长因子-Ⅰ、Ⅱ及结合蛋白3水平的变化,探讨L-精氨酸的保护作用及其机制。方法采用被动吸烟法造大鼠IUGR模型,孕鼠随机分为4组:对照组、模型组、L-精氨酸小剂量和大剂量防治组,每组9只。孕21d剖宫取胎,测量胎鼠体重。应用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ及IG-FBP-3水平。结果对照组、模型组与小、大剂量L-精氨酸防治组IUGR发生率分别为3.92%,54.95%,5.55%和9.09%。模型组大鼠血清IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平较对照组明显降低(P<0.01),小剂量和大剂量L-精氨酸防治组与模型组相比,IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平明显增高(P<0.01)。模型组大鼠血清IGFBP-3水平较对照组明显增高(P<0.01),小剂量和大剂量L-精氨酸防治组与模型组相比,IGFBP-3水平明显降低(P<0.01),与对照组亦有明显差异(P<0.01)。结论L-精氨酸可增高被动吸烟致宫内发育迟缓大鼠血清胰岛素样生长因子-Ⅰ、Ⅱ的水平,降低胰岛素样生长因子结合蛋白3的水平,从而促进胎鼠发育,防治IUGR的发生。 展开更多
关键词 l-精氨酸 宫内发育迟缓 胰岛素样生长因子 胰岛素样生长因子结合蛋白 保护作用
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ApoE4对大鼠在体海马L-LTP的影响及其分子机制的分析
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作者 乔枫 祁金顺 《太原理工大学学报》 CAS 北大核心 2014年第2期244-247,共4页
探讨载脂蛋白E4(apolipoprotein E,apoE4)的神经毒性作用。将12只健康雄性SD大鼠随机分成对照组和实验组两组(n=6)。采用电生理手段,利用海马给药装置和刺激/记录绑定电极记录大鼠在体海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)和高频刺激(HF... 探讨载脂蛋白E4(apolipoprotein E,apoE4)的神经毒性作用。将12只健康雄性SD大鼠随机分成对照组和实验组两组(n=6)。采用电生理手段,利用海马给药装置和刺激/记录绑定电极记录大鼠在体海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)和高频刺激(HFSs)诱导的晚期长时程增强(L-LTP),观察急性注射apoE4后对大鼠海马CA1区L-LTP的诱导及维持的影响。并且通过Western Blotting检测cAMP应答元件结合蛋白(CREB)的表达及其磷酸化水平,探讨apoE4影响L-LTP的分子机制。结果表明,HFSs前注射0.2μg apoE4并没有改变突触传递,对双脉冲易化(PPF)没有影响。但显著抑制L-LTP的诱导和维持,降低CREB的磷酸化水平。说明apoE4可以损伤海马L-LTP。这种神经毒性不是突触前神经递质释放所介导,而是通过降低突触后CREB活性实现的。 展开更多
关键词 载脂蛋白E4 阿尔茨海默病 晚期长时程增强 cAMP应答元件结合蛋白
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陆地棉微管结合蛋白CLASP家族基因的鉴定及表达分析 被引量:1
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作者 朱守鸿 赵兰杰 +3 位作者 刘永昌 李艳军 张新宇 孙杰 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期389-398,共10页
CLASP蛋白(CLIP-associated protein,CLASP)是一种调节微管结构与功能的微管结合蛋白,在植物生长发育及形态建成过程中起着至关重要的作用。本研究利用生物信息学的方法,在陆地棉基因组数据库中鉴定出6个编码CLASP蛋白的基因。多重序列... CLASP蛋白(CLIP-associated protein,CLASP)是一种调节微管结构与功能的微管结合蛋白,在植物生长发育及形态建成过程中起着至关重要的作用。本研究利用生物信息学的方法,在陆地棉基因组数据库中鉴定出6个编码CLASP蛋白的基因。多重序列比对及系统进化树分析表明,陆地棉CLASPs可分为2个亚家族(I和II),亚家族I含有HEAT重复结构域和典型的CLASP-N端结构域,亚家族II只含有CLASP-N端结构域。实时荧光定量PCR结果表明,6个CLASPs基因在棉花各组织中均有表达,但表达模式各不相同,其中CotAD_63740(Gen Bank登录号为KX881965)和CotAD_04861(Gen Bank登录号为KX881961)在纤维中优势表达,CotAD_48232(Gen Bank登录号为KX881962)、CotAD_48665(Gen Bank登录号为KX881963)、CotAD_55570(Gen Bank登录号为KX881964)和CotAD_68468(Gen Bank登录号为KX881966)在茎中优势表达,表达模式的不同表明CLASPs在棉花不同组织中功能不同。本研究为深入研究棉花CLASPs的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 陆地棉 微管结合蛋白 微管 表达分析
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尿L-FABP、NGAL联合ACR检测诊断妊娠期糖尿病早期肾功能损伤价值 被引量:16
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作者 汪洁 陶龙芳 彭康 《中国计划生育学杂志》 2022年第6期1323-1326,共4页
目的:探究孕妇尿肝型脂肪酸结合蛋白质(L-FABP)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)及尿清蛋白与尿肌酐比值(ACR)用于妊娠期糖尿病(GDM)早期肾功能损伤的临床诊断价值。方法:选取本院产科2018年1月—2019年12月收治的妊娠期糖尿病患者... 目的:探究孕妇尿肝型脂肪酸结合蛋白质(L-FABP)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)及尿清蛋白与尿肌酐比值(ACR)用于妊娠期糖尿病(GDM)早期肾功能损伤的临床诊断价值。方法:选取本院产科2018年1月—2019年12月收治的妊娠期糖尿病患者120例,根据是否发生早期肾功能损伤分为肾损伤组(n=36)和无肾损伤组(n=84),常规产前检查健康孕妇100例为对照组。收集晨中段尿检测尿液L-FABP、NGAL及ACR并分析3指标对妊娠期糖尿病早期肾功能损伤诊断价值。结果:尿L-FABP、NGAL、ACR水平对照组、无肾损伤组、肾损伤组逐渐升高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,L-FABP、NGAL、ACR与尿微量白蛋白呈正相关(r=0.612、0.624、0.702,均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析,L-FABP AUC为0.855,最佳截断值>53.12 ng/ml,灵敏度为74.8%,特异度为87.2%;NGAL AUC为0.812,最佳截断值>3.74μg/ml,灵敏度为70.2%,特异度为90.4%;ACRAUC为0.834,最佳截断值≥35.71,灵敏度为90.2%,特异度为85.4%。L-FABP、NGAL、ACR联合检测的灵敏度为96.7%,特异度为99.4%,AUC为0.979。结论:GDM早期肾功能损伤患者尿L-FABP、NGAL、ACR异常升高,3指标联合检测诊断GDM早期肾功能损伤效能较高,有助于早期诊断、及时干预,降低肾功能损伤。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 早期肾功能损伤 尿肝型脂肪酸结合蛋白质 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白 尿清蛋白与尿肌酐比值 诊断价值
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Effects of endoplasmic reticulum stress on the expressionof inflammatory cytokines in patients with ulcerative colitis 被引量:4
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作者 nan li xue-ming wang +5 位作者 li-jun jiang meng zhang na li zhen-zhen wei nan zheng ya-jiao zhao 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2016年第7期2357-2365,共9页
AIM: To explore the changes of X-box binding protein 1splicing(XBP1s) and inflammatory cytokine expression in patients with ulcerative colitis(UC) in response to endoplasmic reticulum stress(ERS).METHODS: Reverse tran... AIM: To explore the changes of X-box binding protein 1splicing(XBP1s) and inflammatory cytokine expression in patients with ulcerative colitis(UC) in response to endoplasmic reticulum stress(ERS).METHODS: Reverse transcription polymerase chain reaction and quantitative polymerase chain reaction were performed to detect the forms of XBP1 s and the expression of interleukin(IL)-2, interferon(IFN)-γ, and IL-17α. Differences between patients with UC and normal subjects were then determined.RESULTS: Mononuclear cells of the peripheral blood of normal subjects and UC patients with were stimulated with no drugs(control), phytohemagglutinin(PHA), thapsigargin(TG), or both PHA and TG. XBP1 s in patients with UC exhibited splicing, which was greater with co-stimulation than single stimulation. Costimulation increased the expression level of IL-2, IFN-γ, and IL-17α.CONCLUSION: The T lymphocytes of both normal subjects and patients with UC responded to ERS by activating the XBP1s-mediated signalling pathway, upregulating the expression of inflammatory cytokines, and increasing the occurrence of inflammation. The mononuclear cells in the peripheral blood of patients with UC were more sensitive to ERS than those in the peripheral blood of normal subjects. 展开更多
关键词 UlCERATIVE COlITIS Endoplasmic reticulumstress x-box binding protein 1 SPlICING
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枳NLP转录因子响应干旱胁迫并与NRE顺式作用元件互作 被引量:3
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作者 曹雄军 卢晓鹏 +2 位作者 熊江 李静 谢深喜 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期3370-3378,共9页
【目的】探讨枳氮素含量在干旱条件下的变化,以及氮代谢途径枳亚硝酸还原酶基因(NiR)和NLP转录因子的响应表达,分析确定枳NLP转录因子与NiR启动子区域硝酸盐响应顺式作用元件(nitrate-responsive cis-element,NRE)位点绑定互作。【方法... 【目的】探讨枳氮素含量在干旱条件下的变化,以及氮代谢途径枳亚硝酸还原酶基因(NiR)和NLP转录因子的响应表达,分析确定枳NLP转录因子与NiR启动子区域硝酸盐响应顺式作用元件(nitrate-responsive cis-element,NRE)位点绑定互作。【方法】以一年生的砧木枳为试验材料,进行干旱处理直至植株叶片开始萎蔫,并设置对照。利用凯氏定氮仪检测干旱条件下枳叶片和侧根的全氮含量,并同步利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和2-ΔΔCT法分析PtNiR、PtNLP2、PtNLP4、PtNLP7及PtNLP8在枳叶片和侧根的表达情况。通过基因克隆并检索与比对分析,获取PtNiR启动子区域的硝酸盐响应顺式作用元件序列,之后利用同源克隆方法构建用于酵母单杂交的pHIS2-4×NRE和p GADT7-Rec-NLP载体,将构建的pHIS2-4×NRE和p GADT7-Rec-NLP载体质粒共同转化到酵母菌株Y187中,在氨基酸缺失培养基(SD/-Trp/-Leu,以及SD/-His/-Trp/-Leu/+120 mmol·L^(-1) 3-氨基三唑)上30℃恒温培养3—5 d,观察酵母的生长情况,以确定枳NLP转录因子(PtNLP2、PtNLP4、PtNLP7及PtNLP8)与NRE的互作关系。【结果】受干旱的影响,枳叶片全氮含量表现出先升高再下降的趋势,而侧根中全氮含量则显著下降;在对照中,枳叶片和侧根全氮含量均显著上升。RT-qPCR分析表明,PtNiR的表达水平在叶片中先上调然后再显著下调,而在侧根中则随着干旱程度的增加显著下调;PtNLP2、PtNLP4及PtNLP7在枳叶片和侧根中的表达也均呈现不同程度的先上调然后再受到抑制的规律,而PtNLP8在枳叶片和侧根中的表达则在一定程度上受到干旱抑制。通过克隆测序分析,在枳NiR启动子区域-196至-154的位置发现了疑似NRE。酵母单杂交分析表明,转化pHIS2-4×NRE-HIS3载体和p GADT7-Rec-NLP载体的Y187酵母在对照培养基(-Trp/-Leu)和含有120 mmol·L^(-1) 3-氨基三唑的三缺培养基(-His/-Trp/-Leu)上均能正常生长。【结论】枳侧根中的全氮含量受干旱的影响而显著下降,以对照为参比,枳侧根和叶片中的全氮含量均随着干旱时间的延长而相对减少。氮代谢途径的枳NiR和NLP转录因子在叶片和侧根中的表达对干旱有不同程度的响应。PtNLP2、PtNLP4、PtNLP7及PtNLP8转录因子均能与PtNiR启动子中的硝酸盐响应顺式作用元件(NRE)位点绑定互作,从而激活下游基因的表达。 展开更多
关键词 NlP转录因子 干旱胁迫 硝酸盐响应顺式作用元件 绑定
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L-4F Inhibits Oxidized Low-density Lipoprotein-induced Inflammatory Adipokine Secretion via Cyclic AMP/Protein Kinase A-CCAAT/Enhancer Binding Protein β Signaling Pathway in 3T3-L1 Adipocytes 被引量:1
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作者 Xiang-Zhu Xie Xin Huang +3 位作者 Shui-Ping Zhao Bi-Lian Yu Qiao-Qing Zhong Jian Cao 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期1108-1112,共5页
Background: Adipocytes behave like a rich source of pro-inflammatory cytokines including monocyte chemoattractant protein- 1 (MCP- 1). Oxidized low-density lipoprotein (oxLDL) participates in the local chronic in... Background: Adipocytes behave like a rich source of pro-inflammatory cytokines including monocyte chemoattractant protein- 1 (MCP- 1). Oxidized low-density lipoprotein (oxLDL) participates in the local chronic inflammatory response, and high-density lipoprotein could counterbalance the proinftammatory function of αLDL, but the underlying mechanism is not completely understood. This study aimed to evaluate the effect of apolipoprotein A-I mimetic peptide L-4F on the secretion and expression of MCP-1 in fully differentiated 3T3-L 1 adipocytes induced by oxLDL and to elucidate the possible mechanisms. Methods: Fully differentiated 3T3-L 1 adipocytes were incubated in the medium containing various concentration of L-4F (0-50 gg/ml) with oxLDL (50 Lag/ml) stimulated, with/without protein kinase A (PKA) inhibitor H-89 (10 gmol/L) preincubated. The concentrations of MCP- 1 in the supematant, the mRNA expression of MCP- 1, the levels of CCAAT/enhancer binding protein α (C/EBPα), and CCAAT/ enhancer binding protein 13 (C/EBPβ) were evaluated. The monocyte chemotaxis assay was performed by micropore filter method using a modified Boyden chamber. Results: OxLDL stimulation induced a significant increase ofMCP-1 expression and secretion in 3T3-L 1 adipocytes, which were inhibited by L-4F preincubation in a dose-dependent manner. PKA inhibitor H-89 markedly reduced the oxLDL-induced MCP-1 expression, but no further decrease was observed when H-89 was used in combination with L-4F (50 μg/ml) (P 〉 0.05). OxLDL stimulation showed no significant effect on C/EBPa protein level but increased C/EBPβ protein level in a time-dependent manner. H-89 and L-4F both attenuated C/EBPI3 protein level in oxLDL-induced 3T3-L1 adipocytes. Conclusions: OxLDL induces C/EBPI3 protein synthesis in a time-dependent manner and enhances MCP-1 secretion and expression in 3T3-L 1 adipocytes. L-4F dose-dependently counterbalances the pro-inflammatory effect of oxLDL, and cyclic AMP/PKA-C/EBP-β signaling pathway may participate in it. 展开更多
关键词 ADIPOCYTES CCAAT/Enhancer-binding proteins l-4F Monocyte Chemoattractant protein-1 Oxidized low-densitylipoprotein protein Kinase A
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