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乳酸杆菌组成型启动子探测载体pgateway-612的构建
被引量:
2
1
作者
陈家锃
崔红玉
+4 位作者
田志军
葛俊伟
安同庆
彭金美
李一经
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期849-853,共5页
为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌-LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子。我们利用底物X-gluC与报告基因gusA编...
为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌-LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子。我们利用底物X-gluC与报告基因gusA编码的蛋白酶之间的特异性显色反应筛选阳性菌落,超声破碎后的菌体蛋白经SDS-PAGE和western blot分析表明该启动子在宿主菌中具有组成型启动子活性。本研究为进一步利用表达载体及筛选其他LAB启动子奠定基础。
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关键词
乳酸菌
启动子探测载体
Gateway克隆技术
x-gluc
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职称材料
六倍体大小麦tritordeum花药组织特异性启动子的鉴定与分离
被引量:
2
2
作者
涂知明
陈泠
+1 位作者
杨广笑
何光源
《武汉植物学研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期321-325,共5页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件。一个无启动子的带有UidA基因的质粒pPLGUS通过基因枪转化进tritordeum材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色来检测不同组织中的GUS活性,有一个...
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件。一个无启动子的带有UidA基因的质粒pPLGUS通过基因枪转化进tritordeum材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色来检测不同组织中的GUS活性,有一个株系的花药组织特异性启动子已被证明成功捕获,并通过PCR方法将其分离。提取叶片的总DNA作模板,上游使用水稻花药启动子分离的引物P1,以UidA基因的部分序列为下游引物P2,PCR扩增UidA基因的上游旁侧序列。已经获得一条长667 bp的目的片断,含有部分UidA基因的序列和一段UidA基因的上游旁侧序列,该序列中具有植物启动子的一些必备元件,初步断定它是一段花药组织特异性启动子序列。
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关键词
组织特异性启动子
花药
UidA基因
x-gluc
显色
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职称材料
香蕉CMV—BH外壳蛋白基因转化香蕉的研究初报
被引量:
6
3
作者
张银东
张锡炎
+1 位作者
曾宪松
郑学勤
《热带作物学报》
CSCD
1995年第S1期19-25,共7页
将香蕉CMV(黄瓜花叶病毒)—BH外壳蛋白基因克隆到能在植物里表达的P(0224)载体上,然后再将此基因连同35S启动子和NOS终止子克隆到另一植物表达载体p(B121)的HindⅢ位点,构成一个既有选择标记的NPⅡ...
将香蕉CMV(黄瓜花叶病毒)—BH外壳蛋白基因克隆到能在植物里表达的P(0224)载体上,然后再将此基因连同35S启动子和NOS终止子克隆到另一植物表达载体p(B121)的HindⅢ位点,构成一个既有选择标记的NPⅡ基因,又有报告基因GUS的嵌合基因表达载体,且每个基因都有各自的启动子和终止子。利用基因枪将带有NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS基因的质粒载体导人香蕉试管苗的幼芽中,培养2d后检测GUS基因的表达,观察到不同细胞层次都有x-Gluc反应。
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关键词
NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS嵌合基因载体
基因枪法
香蕉试管苗幼芽
x-gluc
反应
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职称材料
基因直接转化植物小孢子方法的探讨
被引量:
1
4
作者
刘山鸣
赖康
+1 位作者
郑学勤
刘公社
《热带作物学报》
CSCD
1994年第S1期67-70,共4页
将带有gus报告基因的质粒DNA用电激法转入小白菜的小孢子中,培养两天后,检测gus基因的表达,观察到X—Glue反应。
关键词
GUS报告基因
电激法
小孢子
X—Glue反应
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职称材料
题名
乳酸杆菌组成型启动子探测载体pgateway-612的构建
被引量:
2
1
作者
陈家锃
崔红玉
田志军
葛俊伟
安同庆
彭金美
李一经
机构
东北农业大学动物医学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期849-853,共5页
基金
国家十一五支撑计划项目(2009BADB01-3)
文摘
为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌-LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子。我们利用底物X-gluC与报告基因gusA编码的蛋白酶之间的特异性显色反应筛选阳性菌落,超声破碎后的菌体蛋白经SDS-PAGE和western blot分析表明该启动子在宿主菌中具有组成型启动子活性。本研究为进一步利用表达载体及筛选其他LAB启动子奠定基础。
关键词
乳酸菌
启动子探测载体
Gateway克隆技术
x-gluc
Keywords
Lactobacillus brevis
promoter probing vector
gateway clone
x-gluc
分类号
S862.61 [农业科学—野生动物驯养]
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职称材料
题名
六倍体大小麦tritordeum花药组织特异性启动子的鉴定与分离
被引量:
2
2
作者
涂知明
陈泠
杨广笑
何光源
机构
华中科技大学生命科学与技术学院中英联合实验室
出处
《武汉植物学研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期321-325,共5页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2002AA224031)
国家自然科学基金资助项目(30370807)
华中科技大学博士论文基金资助项目
文摘
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件。一个无启动子的带有UidA基因的质粒pPLGUS通过基因枪转化进tritordeum材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色来检测不同组织中的GUS活性,有一个株系的花药组织特异性启动子已被证明成功捕获,并通过PCR方法将其分离。提取叶片的总DNA作模板,上游使用水稻花药启动子分离的引物P1,以UidA基因的部分序列为下游引物P2,PCR扩增UidA基因的上游旁侧序列。已经获得一条长667 bp的目的片断,含有部分UidA基因的序列和一段UidA基因的上游旁侧序列,该序列中具有植物启动子的一些必备元件,初步断定它是一段花药组织特异性启动子序列。
关键词
组织特异性启动子
花药
UidA基因
x-gluc
显色
Keywords
Tissue-specific promoter
Anther
U/dA gene
x-gluc
test
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
香蕉CMV—BH外壳蛋白基因转化香蕉的研究初报
被引量:
6
3
作者
张银东
张锡炎
曾宪松
郑学勤
机构
中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
1995年第S1期19-25,共7页
文摘
将香蕉CMV(黄瓜花叶病毒)—BH外壳蛋白基因克隆到能在植物里表达的P(0224)载体上,然后再将此基因连同35S启动子和NOS终止子克隆到另一植物表达载体p(B121)的HindⅢ位点,构成一个既有选择标记的NPⅡ基因,又有报告基因GUS的嵌合基因表达载体,且每个基因都有各自的启动子和终止子。利用基因枪将带有NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS基因的质粒载体导人香蕉试管苗的幼芽中,培养2d后检测GUS基因的表达,观察到不同细胞层次都有x-Gluc反应。
关键词
NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS嵌合基因载体
基因枪法
香蕉试管苗幼芽
x-gluc
反应
Keywords
NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS fussion gene vector Microprojectile bombardment Tubebanana shoot Gluc reaction
分类号
S436.681 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
基因直接转化植物小孢子方法的探讨
被引量:
1
4
作者
刘山鸣
赖康
郑学勤
刘公社
机构
热带作物生物技术国家重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
1994年第S1期67-70,共4页
文摘
将带有gus报告基因的质粒DNA用电激法转入小白菜的小孢子中,培养两天后,检测gus基因的表达,观察到X—Glue反应。
关键词
GUS报告基因
电激法
小孢子
X—Glue反应
Keywords
Reporter gene Gus gene Electroporation Microspores
x-gluc
reaction
分类号
Q945.51 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乳酸杆菌组成型启动子探测载体pgateway-612的构建
陈家锃
崔红玉
田志军
葛俊伟
安同庆
彭金美
李一经
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
下载PDF
职称材料
2
六倍体大小麦tritordeum花药组织特异性启动子的鉴定与分离
涂知明
陈泠
杨广笑
何光源
《武汉植物学研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
3
香蕉CMV—BH外壳蛋白基因转化香蕉的研究初报
张银东
张锡炎
曾宪松
郑学勤
《热带作物学报》
CSCD
1995
6
下载PDF
职称材料
4
基因直接转化植物小孢子方法的探讨
刘山鸣
赖康
郑学勤
刘公社
《热带作物学报》
CSCD
1994
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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引用分析
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