XAGE-1b在前列腺癌患者血清中的表达及其与Gleason评分的相关性

目的 检测XAGE-1b在前列腺癌患者血清中的表达情况,研究其与Gleason评分的相关性.方法 收集1 55例前列腺癌患者、131例良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）患者和178例健康人群的血清,用Luminex液相芯片法检测XAGE-1b和前列腺癌特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）的表达水平,同时确定XAGE-1b的正常值范围,计算XAGE-1b抗原表达阳性率、特异性和敏感度.Western blot法验证阳性血清,并分析其与Gleason评分的相关性.结果 XAGE-1b在前列腺癌和BPH患者血清中的阳性表达率分别为52.3％和8.4％,两组数据之间差异有统计学意义（P=0.021）.以BPH患者组为对照,XAGE-1b检测前列腺癌的敏感性和特异性分别为90.1％和52.9％;其中,在PSA水平为4～10 ng/mL的人群中XAGE 1b检测前列腺癌的敏感度和特异性分别为70.4％和48.4％.Spearman等级相关分析线显示XAGE-1b与Gleason评分呈正相关（r=0.891）.结论 XAGE-1b在前列腺癌患者血清中有较高表达,XAGE-1b抗原的表达水平与Gleason评分之间呈正相关.

不同XAGE-1异构体在肝细胞癌中的表达

目的探讨肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时研究其与肝癌患者临床病理之间的关系。方法使用RT-PCR方法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及80例肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时收集患者临床资料,对XAGE-1b的表达与肝癌患者临床病理特征之间的关系进行研究。结果XAGE-1b和XAGE-1d mRNA在肝癌细胞株和部分患者肿瘤组织标本中阳性表达[分别是35/80(43.75%)、6/80(7.50%)];而XAGE-1a和XAGE-1c mRNA在肝癌细胞株和肝癌患者标本中均为阴性表达;在对照组组织标本(4例肝血管瘤,8例肝破裂)中4种XAGE-1异构体均为阴性表达。XAGE-1bmRNA在肝癌组织中具有较高的表达率,并且其表达与肝癌TNM分期相关。结论XAGE-1b在肝癌细胞中呈阳性表达,同时在肝癌组织中呈高度阳性表达,预示XAGE-1b的表达与肝癌预后相关,可作为其免疫治疗的潜在靶点之一。

XAGE-1b基因在非小细胞肺癌中的表达及与临床特点的相关性研究

目的探讨XAGE-1b基因在非小细胞肺癌中的表达水平及与临床特点的相关性。方法非小细胞肺癌患者30例,通过手术获得肺癌组织和癌旁正常肺组织,分别提取组织总RNA,RT-PCR反应扩增XAGE-1b基因全长,通过电泳和基因测序鉴定RT-PCR产物,确定基因表达阳性标本,分析基因表达阳性率及与临床特征相关性。结果30例肺癌组织中,XAGE-1b基因表达阳性率为40%(12/30),30例癌旁正常肺组织不表达该基因;基因表达与患者年龄、性别、肿瘤分化程度无相关性,与病理类型有相关性,腺癌中基因表达阳性率明显高于其他病理类型(61.1%vs8.3%,P=0.015);随着TNM分期的升高,基因表达阳性率略有增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论XAGE-1b基因在肺腺癌中高表达,可优先选择该基因作为肺腺癌免疫治疗靶点。

非小细胞肺癌VEGFR-2与XAGE-1b基因表达相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌中血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)与肿瘤-睾丸抗原XAGE-1b基因表达的相关性。方法从30例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中提取总RNA、RT-PCR反应扩增XAGE-1b基因、定量RT-PCR检测VEGFR-2表达水平,分析二者表达的相关性以及与临床特征的相关性。结果 30例患者中,XAGE-1b表达阳性率为40%,61.1%的腺癌表达XAGE-1b,远高于非腺癌的8.3%(χ2=6.302,P=0.012)。XAGE-1b与VEGFR-2表达水平呈正相关(r=0.546,P=0.002),XAGE-1b阳性患者的VEGFR-2表达水平偏高。多元回归分析显示,病理类型(比值比0.072,95%可信区间0.007～0.785,P=0.031)和VEGFR-2表达水平(比值比14.765,95%可信区间1.274～171.144,P=0.031)是XAGE-1b表达的影响因素。XAGE-1b表达阳性与阴性、VEGFR-2表达高与低患者的生存时间差异均无统计学意义(Log-rankP=0.416、P=0.384)。结论非小细胞肺癌中VEGFR-2与XAGE-1b基因表达呈正相关,XAGE-1b表达阳性并且VEGFR-2高表达的患者可能是免疫疗法与抗血管生成疗法联合治疗的合适人群。

癌睾丸抗原XAGE-1：肿瘤免疫治疗的新靶向

目前肿瘤的发病率逐年提高,传统的肿瘤治疗手段却很难达到满意的效果,因此在传统肿瘤治疗的基础上,寻找新的肿瘤辅助治疗方法迫在眉睫。肿瘤免疫治疗备受重视,开展肿瘤免疫治疗的前提是寻找理想的肿瘤抗原。癌睾丸抗原（Cancer-testis antigen,CTA）是一类在肿瘤组织表达,正常组织（睾丸、卵巢除外）几乎不表达的抗原,由于其表达特性而被视为肿瘤免疫治疗的理想靶抗原,目前一些CTA疫苗已试用于临床并取得一定疗效。

人癌症/睾丸相关蛋白XAGE-1b原核表达载体的构建及融合蛋白的表达

目的构建人癌症/睾丸相关蛋白XAGE-1b原核表达载体及诱导XAGE-1融合蛋白表达。方法从文库质粒pACT2-XAGE-1b中利用PCR法扩增XAGE-b cDNA编码序列,将其克隆到pET-32a载体中,并将重组质粒pET-32bXAGE-1b转染大肠杆菌DE3中,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western blot检测融合蛋白表达。结果原核表达载体pET-32a-XAGE-1b构建成功;转染菌株经IPTG诱导后,出现约29 kD蛋白过表达,Western-blot检测显示His6融合蛋白表达。结论成功构建原核表达载体pET-32a-XAGE-1b,转染菌株可表达His6融合蛋白。

XAGE-1b基因在肝癌细胞中的表达

目的:探讨XAGE-1b基因在肝癌细胞中的表达。方法:选择肝癌患者44例,通过手术获得肝癌组织和癌旁正常组织,分别提取组织总RNA、RT-PCR反应扩增XAGE-1b基因全长,通过电泳和基因测序鉴定RT-PCR产物,确定基因表达阳性标本,分析基因表达阳性率。结果:44例肝癌组织中,XAGE-1b基因表达阳性率为43.18%(19/44),44例癌旁正常组织不表达该基因。结论:XAGE-1b基因在肝癌细胞中高表达,可考虑进一步研究该基因调控肝癌细胞恶性行为的机制。

敲减XAGE-1b基因表达降低ACCM和A673肿瘤细胞的增殖能力

XAGE是通过生物信息学方法发现的新一类肿瘤-睾丸抗原(cancer/testis antigen,CT抗原)基因,其主要表达亚型为XAGE-1b.已有的研究表明,该基因可能与肿瘤细胞的生长相关.本研究构建了针对XAGE-1b进行RNA干扰的重组腺病毒载体Adv-Sh1和Adv-Sh2.半定量和定量RT-PCR显示,Adv-Sh1比Adv-Sh2对XAGE-1b的干扰效率更高.细胞荧光干扰实验显示,Adv-Sh1对XAGE-1b有显著的干扰作用.在细胞增殖和集落形成实验中,感染Adv-Sh1后的细胞增殖能力显著降低(P<0.01),形成的单克隆集落数也显著减少.研究结果表明,下调XAGE-1b基因表达使ACCM和A673肿瘤细胞的增殖能力均有降低,提示XAGE-1b在肿瘤生长过程中可能发挥重要作用.本研究为进一步深入研究XAGE-1b的功能和致癌机制打下了良好基础.

基于ChIP-Seq进行肿瘤/睾丸抗原XAGE-1b的DNA结合位点鉴定

XAGE-1b(X antigen family member 1B)属于XAGE亚家族,是一种肿瘤-睾丸抗原(cancer/testis antigen,CTA),表达于正常人睾丸组织和多种类型的肿瘤细胞中.本实验室前期研究发现,该基因在涎腺腺样囊性癌高转移细胞系中呈高表达.为了进一步研究XAGE-1b下游调控基因,本实验采用ChIP-Seq技术筛查XAGE-1b蛋白质可能存在的DNA结合片段.结果发现,XAGE-1b下游调控基因富集于细胞分裂(cell division,P-Value=7.95e-04)、细胞周期调控(cell cycle,P-Value=5.532e-03)、及癌症相关基因(GESA/MSigDB module_11,P-Value=2.010e-06)中.同时发现,XAGE-1b下游调控多个基因的表达产物(NCBI/interactions 22827,P-Value=4.678e-06)能与原癌基因c-Myc的启动子抑制蛋白PUF60发生蛋白质相互作用,并通过qPCR进行了验证.这些研究对阐明XAGE-1b在肿瘤细胞的增殖和转移中的作用有重要意义.

XAGE-1b基因在非小细胞肺癌中的表达水平及与临床特点的关系研究

通过观察非小细胞肺癌中XAGE-1b基因表达情况,探讨该基因与患者病理特点的关系。方法:以45例非小细胞肺癌患者为研究对象,提取病灶组织和病灶旁正常组织,予以总DNA提取和基因全长扩增,逆转录-聚合酶链反应产物通过电泳进而基因测序获取,记录基因表达情况,分析阳性表达与临床特点的关系。结果:XAGE-1b基因不表达于癌旁正常组织,19例肺癌组织中,该基因呈阳性表达。对比有差异(P<0.05);该基因表达与患者分化程度和病理分期不相关,数据无差异(P>0.05);病理类型为其相关因素,其他类型中,XAGE-1b基因阳性表达均不及腺癌,对比差异明显(P<0.05)。结论:XAGE-1b基因高表达于肺腺癌患者比病灶组织中,可考虑以该基因为靶点,予以肺腺癌患者免疫治疗。

肝癌细胞中XAGE-1b的表达和意义

目的研究XAGE-1b在肝癌细胞中的表达情况,探讨其对肝癌细胞的生物行为影响。方法运用实时荧光定量PCR方法检测38例肝癌病理组织以及42例癌旁组织的XAGE-1b的基因表达水平。结果 XAGE-1b在肝癌组织中表达值为(9.139±0.768),在癌旁组织中表达值为(2.078±0.646),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 XAGE-1b在肝癌发生、发展过程中可能起重要作用,有望成为反映肝癌肿瘤恶性程度及预后判断的标记物,并成为分子靶向药物治疗的靶点。

XAGE-1基因在肺癌组织中的表达及其与临床特点的关系

背景与目的研究证实XAGE-1作为一种癌胚抗原在多种肿瘤中高表达。本研究旨在探讨XAGE-1基因在肺癌组织中的表达水平及其与临床特点的关系。方法肺癌患者85例,提取肺癌组织和癌旁组织总RNA,巢式PCR反应扩增XAGE-1四种剪接体基因,分析基因表达情况及其与临床特点的关系。结果 32.94%(28/85)肺癌患者癌组织阳性表达XAGE-1基因,在各种类型肺癌中,59.46%(22/37)的腺癌与21.74%(5/23)鳞癌患者癌组织阳性表达XAGE-1基因;XAGE-1b基因的表达与肺癌病理类型有相关性(P<0.05),腺癌阳性表达率明显高于鳞癌,而与肺癌的性别、年龄及临床分期无相关性(P>0.05)。结论 XAGE-1基因在肺癌尤其腺癌组织中高表达,该基因可以作为免疫治疗的靶基因。

XAGE-1b基因与肿瘤的关系及研究进展

XAGE-1b 基因是 XAGE 亚科，属于 GAGE 家族的一员。这个基因强烈表达于尤文氏肉瘤，腺泡状横纹肌肉瘤和正常睾丸。该基因编码的蛋白含有一个核定位信号，并与其他GAGE/ PAGE 蛋白质共用一个相似性序列。因为表达模式和序列的相似性，这种蛋白也属于 CT（癌-睾丸）抗原家族。该基因的选择性剪接，除了替代转录起始位点，还产生多个转录变异体。

XAGE-1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义分析

目的探讨XAGE-1四种不同剪接体基因在胃癌组织中的表达水平及与临床特点的关系.方法胃癌患者85例提取胃癌组织及癌旁组织总RNA,RT-PCR检测XAGE-1四种剪接体的表达,并分析其表达与临床特点的关系.结果 49.41%(42/85)的胃癌组织阳性表达XAGE-1 mRNA,其中41.18%(35/85)癌组织表达XAGE-1b,8.23%(7/85)胃癌组织表达XAGE-1d mRNA.XAGE-1b mRNA的表达与肺癌性别、年龄、组织分型、TNM分期、肿瘤大小、浸润程度及淋巴结转移无相关性(P>0.05).结论 XAGE-1b基因在胃癌组织中高表达可以作为肿瘤疫苗的靶位点.

XAGE-1b在肝癌增殖侵袭中的生物学作用

目的探讨XAGE-1b在肝癌细胞株中的表达与增殖侵袭的关系。方法运用荧光定量PCR检测3株肝癌细胞株XAGE-1b内源性表达情况,选取内源性表达量较高的1株细胞株进行功能实验。运用XAGE-1b干扰片段转染肝癌细胞株,荧光定量PCR检测其转染效率;运用CCK8细胞增殖实验、Boyden小室细胞侵袭实验观察肝癌细胞株体外增殖及侵袭情况。结果XAGE-1b干扰载体转染肝癌细胞株后,其XAGE-1b的mRNA表达下调(P<0.05);干扰XAGE-1b肝癌细胞体外增殖、侵袭能力下降(P<0.05,P<0.05)。结论XAGE-1b表达下调抑制肝癌细胞体外增殖及侵袭能力,初步证实XAGE-1b在肝癌增殖侵袭中发挥重要作用。

XAGE-1 bmRNA在肝癌患者血液中的表达

目的探讨原发性肝癌外周血液中XAGE-1 bmRNA的表达意义。方法采集86例原发性肝癌患者静脉血，实时荧光定量PCR检测其中XAGE-1 bmRNA的表达。结果原发性肝癌患者血液中XAGE-1 bmRNA检出率为80．8％。结论XAGE-1 bmRNA可作为一种肿瘤标志物诊断原发性肝癌。

XAGE—1b mRNA在肝癌、肝硬化、良性肝病患者和健康人血液中的表达

目的 探讨原发性肝癌、肝硬化、良性肝病患者和健康人血液中XAGE-1b mRNA表达的差异及意义。方法 采集125例原发性肝癌患者、23例肝硬化患者、34例良性肝病患者、41例健康志愿者静脉血，实时荧光定量PCR 检测其中XAGE-1b mRNA的表达。结果 原发性肝癌患者、肝硬化患者、良性肝病患者、健康人血液中XAGE-1b mRNA 的表达量分别为3.72（0.93，10.2）×10-5、0（0，0.56）×10-5、0（0，0）×10-5、0（0，0）×10-5。原发性肝癌患者表达量显著高于肝硬化、良性肝病患者和健康人，肝硬化患者表达量高于良性肝病患者和健康人，良性肝病患者与健康人的表达量差异无统计学意义。以8.385×10-7为最佳临界值，XAGE-1b mRNA诊断原发性肝癌的敏感性为80.0%，特异性为89.8%，阳性预测值90.9%，阴性预测值77.9%。肝癌患者的阳性率为80.0%，肝硬化患者的阳性率为30.4%。结论 XAGE-1b mRNA可作为一种肿瘤标志物诊断原发性肝癌，并有利于肝癌、肝硬化、良性肝病的鉴别。