黄腐酚对高尿酸血症大鼠血尿酸水平及骨代谢的调控作用

目的考察黄腐酚(XAN)对高尿酸血症(HUA)大鼠的降血尿酸(UA)及调控骨代谢活性作用。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为6组(n=8):空白组,模型组,别嘌醇(ALLO)组,黄腐酚低剂量(XAN-L)组、中剂量(XAN-M)组、高剂量(XAN-H)组。采用氧嗪酸钾(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))与次黄嘌呤(250 mg·kg^(-1)·d^(-1))联用法建立HUA模型。造模2 h后,各药物组分别给予相应药物混悬液(ALLO 20 mg·kg^(-1)·d^(-1),XAN5 mg·kg^(-1)·d^(-1),XAN 15 mg·kg^(-1)·d^(-1),XAN 45 mg·kg^(-1)·d^(-1)),灌胃干预14 d。分别于第3、7、10、14天进行眼眶取血,检测血清中UA、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)水平及黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。实验结束测定碱性磷酸酶(ALP)活性,以及骨代谢相关蛋白Runt相关转录因子2(Runx2)、组织蛋白酶K(CTSK)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和护骨因子(OPG)水平,并对RANKL/OPG比值进行分析。结果与空白组相比,第3、7、10、14天模型组大鼠血清UA水平升高(均P<0.01),表明大鼠HUA模型成功构建。与模型组相比,XAN-M、XAN-H可有效降低急、慢性HUA大鼠血清UA水平(均P<0.01)、抑制XOD活性(均P<0.01)、改善肾功能指标CRE(均P<0.01)和BUN(均P<0.05)。XAN-L虽未明显降低急性HUA大鼠的血清UA水平,但可有效降低XOD活性(P<0.01),并改善其肾功能指标CRE(P<0.01)和BUN(P<0.05);而对于慢性HUA大鼠,其能够有效降低血清UA水平(均P<0.01),却无明显肾保护作用。各剂量组XAN还可不同程度增强HUA大鼠的ALP活性(均P<0.01)、上调Runx2表达(XAN-L组除外,均P<0.01)、下调CTSK的表达(均P<0.01)、抑制RANKL分泌(均P<0.01)、促进OPG的表达(仅XAN-H组,P<0.01)、纠正RANKL/OPG的比值(均P<0.05)。结论XAN具有降低HUA大鼠血UA水平的作用,这可能与其抑制XOD活性以减少UA生成及保护肾功能以加强UA排泄有关;XAN还具有促进骨形成、抑制骨破坏,有效调控骨代谢的作用,这可能与其通过RANKL/OPG信号通路抑制破骨细胞分化有关。

黄腐酚逆转B16-F10黑色素瘤细胞恶性表型

本研究从体外增殖、细胞周期分布、克隆形成和迁移能力、黑色素合成以及糖酵解水平等考察了黄腐酚(XN)对B16-F10高转移潜能小鼠黑色素瘤细胞恶性表型的影响。结果表明,XN明显抑制B16-F10细胞增殖、克隆形成和体外迁移,阻滞细胞周期于G0/G1期,并上调细胞黑色素合成水平。同时发现XN下调B16-F10细胞的葡萄糖摄取,降低乳酸脱氢酶和己糖激酶活性及NAD^(+)/NADH比率,下调缺氧诱导因子1(HIF-1α)和沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)表达。另外,XN明显延长荷B16-F10黑色素瘤小鼠生存期。总之,本研究表明XN逆转B16-F10黑色素瘤恶性表型,并发挥抗肿瘤增殖和转移活性,或与其调控肿瘤糖代谢效应相关。

黄腐酚抑制炎症信号缓解大鼠关节炎痛的机制研究

目的:研究黄腐酚(Xn)对大鼠关节炎疼痛的作用及机制。方法:将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成3组(每组10只):对照组、关节炎疼痛模型[左后膝关节内注射完全弗氏佐剂(CFA)]组(CFA组)和CFA+Xn(5 mg/kg鞘内注射)组。记录大鼠痛觉行为及运动能力的变化;分子对接分析Xn与糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的作用关系;免疫荧光和Western blot法分析大鼠脊髓组织中GSK-3β的表达及活性、星形胶质细胞激活状态、核因子κB(NF-κB)信号及白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA法检测大鼠血清IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与对照组相比,CFA注射诱导大鼠自发缩足次数增加,机械痛阈值下降,运动能力受损(P<0.05);脊髓组织中磷酸化GSK-3β、星形胶质细胞标志物胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)、NF-κB和IL-1β表达水平均显著升高(P<0.05);血清中IL-1β和TNF-α水平上调。与CFA组相比,Xn鞘内给药减少大鼠自发缩足次数,上调机械痛阈值,增加转棒停留时间和运动距离(P<0.05);分子对接分析显示Xn可抑制GSK-3β活性;Xn给药显著降低脊髓组织磷酸化GSK-3β、GFAP、NF-κB和IL-1β蛋白水平(P<0.05),以及血清中IL-1β和TNF-α水平(P<0.05)。结论:Xn可能通过降低GSK-3β活性抑制炎症信号,从而缓解大鼠关节炎疼痛。

黄腐酚抑制膝骨关节炎大鼠软骨组织细胞自噬作用

目的探讨黄腐酚对膝骨关节炎大鼠软骨损伤和软骨细胞自噬水平的影响及其可能的作用机制。方法选取48只大鼠用前后交叉韧带断离术建立膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、黄腐酚低剂量组、黄腐酚高剂量组和西药组,各12只,另设对照组12只。黄腐酚低剂量、高剂量组分别灌胃50、100 mg·kg^(-1)黄腐酚混悬液(生理盐水配制),西药组灌胃0.17 g·kg^(-1)硫酸氨基葡萄糖胶囊,对照组及模型组给予等量生理盐水,连续干预28 d。观察大鼠软骨组织形态、计算Mankin’s评分;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assy,ELISA)检测各组大鼠血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;HE染色观察软骨组织病理学变化;TUNEL法检测大鼠软骨组织细胞凋亡情况;反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠软骨组织磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(mammalian rapamydia target protein,mTOR)mRNA的表达情况;Western blotting检测大鼠软骨组织PI3K、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(phosphorylated mammalian rapamydia target protein,p-mTOR)、哺乳动物ATG同源蛋白(mammalian ATG homologous protein,Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3(protein 1 light chain 3,LC3)蛋白的表达情况。结果与模型组比较,3个给药组大鼠软骨组织学Mankin’s评分、IL-6、IL-1β、TNF-α、软骨细胞凋亡率和PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达水平及PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白的表达水平降低,Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高(P<0.05)。与黄腐酚低剂量组比较,高剂量组和西药组大鼠软骨组织学Mankin’s评分、IL-6、IL-1β、TNF-α、软骨细胞凋亡率和PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达水平及PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白的表达水平降低,Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高(P<0.05),后2组比较差异无统计学意义。结论黄腐酚能减轻KOA大鼠的炎症反应、提高软骨细胞自噬水平、抑制细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用的。

啤酒花中黄腐酚的生理活性作用的研究进展

黄腐酚为酒花中主要的异戊二烯基黄酮类物质。目前被发现仅存在于酒花中,其含量占酒花干重的0.1%～1%,它的结构赋予它多重生理活性。本文综述了近年来对酒花中黄腐酚的提取、分离纯化、结构鉴定、以及抗癌、抗病毒、预防动脉样硬化和糖尿病、雌性激素、抗氧化等生理活性及其作用机理的研究进展。

固相萃取-高效液相色谱法测定啤酒中的黄腐酚

采用Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱对啤酒样品进行分离纯化,建立了啤酒中黄腐酚的固相萃取-高效液相色谱检测方法。选用色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温25℃,流速0.4mL/min,检测波长370nm。在此条件下,黄腐酚分离良好且无杂质峰干扰,在0.5～500μg/L的范围内线性关系良好(r2=1),在高、中、低浓度下的加标回收率为91.21%～95.58%,相对标准偏差小于2%。方法的检出限为0.24μg/L,定量限为0.80μg/L。该方法简便快速、结果准确、重现性好,是检测啤酒中黄腐酚含量的有效方法。

高效液相色谱法测定苦参药材及其黄酮部位中降苦参酮、黄腐醇和苦参啶的含量

目的:建立测定苦参药材及其黄酮部位中3种黄酮类成分降苦参酮、黄腐醇和苦参啶含量的高效液相色谱方法。方法:采用 Phenomenex Luna C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙睛-水为流动相,梯度洗脱(0～35 min,45:55→69∶31),流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长 294 nm(降苦参酮)和365 nm(黄腐醇、苦参啶)。结果:降苦参酮、黄腐醇、苦参啶的线性范围分别为0.12～0.60μg(r=0.9999),0.004～0.200μg(r=0.9996),0.20～1.02μg(r=0.9997);苦参黄酮部位平均加样回收率(n=6)分别为102.5%,101.5%,99.8%;苦参药材平均加样回收率(n=6)分别为101.8%,103.5%,99.9%。结论:3批样品测定结果表明,该方法简便准确,可用于苦参药材及其黄酮部位中降苦参酮、黄腐醇和苦参啶3种黄酮类成分的含量测定。

啤酒花总黄酮测定方法的比较研究

以高效液相色谱法对啤酒花总黄酮含量的测定结果作为评判标准(相对准确值),比较与评价AlCl3分光光度法、Al(NO3)3分光光度法和硼氢化钠/氯醌分光光度法3种比色法测定酒花总黄酮含量的准确性。结果表明,高效液相色谱法测定酒花总黄酮含量为(12.73±0.26)mg/g;AlCl3法测得总黄酮含量为(13.66±0.45)mg/g,与高效液相色谱法偏差率为7.3%;而Al(NO3)3法测定结果为(43.53±1.16)mg/g,与高效液相色谱法的偏差率为241.9%;硼氢化钠/氯醌法测定结果为(70.25±1.42)mg/g,与高效液相色谱法的偏差率为451.8%。提出AlCl3分光光度法比其他2种比色法更适用于酒花总黄酮含量的测定,该方法误差小,准确性好。

酒花中“黄腐酚”的最新研究进展与开发前景

啤酒花中特有的一种名叫黄腐酚的物质被越来越多的人们所关注,该物质属异戊烯类黄酮化合物(Xantho-humol,简称Xn),经科学家研究表明:黄腐酚具有明显的抗癌等功效。重点介绍了国内外学者对啤酒中所含黄腐酚的最新研究进展,进一步论述了今后对富含黄腐酚等因子的功能性保健啤酒的开发前景。

黄腐酚类似物通过cAMP/Wnt/β-catenin信号通路抑制卵巢癌细胞增殖降低对顺铂的耐药性

目的:探究黄腐酚(xanthohumol,XN)类似物通过cAMP/Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌细胞增殖的作用及对顺铂耐药性的影响。方法:以人卵巢癌细胞株HO-8910为研究材料,分为不同浓度(0、5、7.5、15、20μmol/L)黄腐酚类似物组、对照组、顺铂组、黄腐酚类似物+顺铂组。采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、实时荧光定量酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测黄腐酚类似物对HO-8910细胞增殖及对顺铂耐药性的影响。结果:与对照组比,黄腐酚类似物能够明显抑制HO-8910细胞增殖,差异具有统计学意义(P<0.05);黄腐酚类似物a13+顺铂组HO-8910细胞对顺铂的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))显著低于顺铂组,细胞活性抑制率(inhibition rate,IR)显著高于顺铂组,差异具有统计学意义(P<0.05);PKIβ(cAMP抑制剂)、IWP-2(Wnt/β-catenin抑制剂)可降低黄腐酚类似物a13对HO-8910细胞增殖的抑制作用,逆转黄腐酚类似物a13抑制HO-8910细胞对顺铂的耐药作用,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄腐酚类似物可提高顺铂对卵巢癌细胞增殖的抑制作用,降低细胞对顺铂的耐药性,作用机制与激活cAMP/Wnt/β-catenin信号通路有关。

黄腐酚对骨关节炎模型小鼠炎性因子及关节软骨的作用

背景:研究表明黄腐酚具有抗氧化和抗炎作用,但目前尚无关于黄腐酚对骨关节炎具体作用的研究。目的:从体外和体内两方面探讨黄腐酚对骨关节炎的作用及其潜在机制。方法:(1)通过白细胞介素1β处理构建小鼠软骨细胞关节炎模型,然后用0-40μmol/L黄腐酚干预,利用Elisa法检测软骨细胞炎性因子水平,RT-PCR检测软骨细胞合成及代谢指标;(2)通过小鼠内侧半月板失稳术构建小鼠关节炎模型,给予50 mg/(kg·d)黄腐酚干预6周,组织学染色评估关节软骨受损程度,μCT扫描分析膝关节软骨下骨的骨量变化。结果与结论:(1)黄腐酚处理抑制了白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症相关细胞因子如一氧化氮、前列腺素E2、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的生成;(2)黄腐酚通过下调基质金属蛋白酶13的mRNA表达量并增加Ⅱ型胶原mRNA合成来抑制白细胞介素1β诱导的软骨细胞外基质降解;(3)接受黄腐酚处理的小鼠能明显延缓手术诱导的骨关节炎进展,拥有更加良好的关节软骨形态和更理想的骨关节炎病理评分,同时也能更好地维持软骨下骨的骨量。结果表明:黄腐酚能抑制软骨细胞的炎性递质生成,抑制软骨细胞外基质降解从而维持关节软骨的代谢平衡。

黄腐酚诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的初步研究

目的探索黄腐酚对人非小细胞肺癌细胞株A549与H1650凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测黄腐酚对A549与H1650细胞增殖的影响;流式细胞术分析黄腐酚对两种细胞凋亡的影响;Western Blot法检测两种细胞被不同浓度黄腐酚干预后细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-xl、pro-caspase-3的表达。结果黄腐酚能有效抑制A549与H1650细胞的增殖,其抑制强度与浓度呈正相关,对H1650细胞有更好的抑制作用;两种细胞的凋亡率随黄腐酚浓度的增大而上升,5μmol·L-1诱发的凋亡率与同浓度顺铂无差异(P>0.05);两种细胞中凋亡相关蛋白的表达与黄腐酚浓度相关。结论黄腐酚可能通过调控Bcl-xl、Bax、Caspase-3及其相关基因使非小细胞肺癌细胞发生凋亡。

黄腐酚对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的影响及其机制

目的 探讨黄腐酚降低人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的机制。方法 将KOV3/DDP细胞分为卵巢癌组(无干扰)、10μmol·L^(-1)黄腐酚组(10μmol·L^(-1)黄腐酚培养)、20μmol·L^(-1)黄腐酚组(20μmol·L^(-1)黄腐酚培养)、40μmol·L^(-1)黄腐酚组(40μmol·L^(-1)黄腐酚培养)、80μmol·L^(-1)黄腐酚组(80μmol·L^(-1)黄腐酚培养)、160μmol·L^(-1)黄腐酚组(160μmol·L^(-1)黄腐酚培养)。采用CCK-8检测SKOV3/DDP细胞存活率;克隆形成实验检测SKOV3/DDP细胞克隆数目;流式细胞仪检测SKOV3/DDP细胞凋亡率;CCK-8检测黄腐酚对SKOV3/DDP细胞DDP耐药性的影响;免疫印迹检测SKOV3/DDP细胞中耐药蛋白ABCB1、MDR-1和P-gp的表达。结果 与卵巢癌组相比,10μmol·L^(-1)黄腐酚组SKOV3/DDP细胞存活率无明显变化(P>0.05);与10μmol·L^(-1)黄腐酚组相比,20、40、80、160μmol·L^(-1)黄腐酚组SKOV3/DDP细胞存活率均显著降低(P<0.05)。卵巢癌组及10、20、40、80、160μmol·L^(-1)黄腐酚组SKOV3/DDP细胞克隆数目分别为(86±12)、(82±10)、(61±11)、(46±9)、(29±11)及(20±7),组间比较,差异有统计学意义(F=43.270,P<0.001)。卵巢癌组及10、20、40、80、160μmol·L^(-1)黄腐酚组SKOV3/DDP细胞凋亡率分别为(2.56±0.20)%、(3.20±0.36)%、(15.21±1.22)%、(26.30±1.60)%、(33.20±2.25)%及(45.63±2.10)%,组间比较,差异有统计学意义(F=775.200,P<0.001)。与DDP相比,DDP联合黄腐酚对SKOV3/DDP细胞的活性抑制率较高,差异有统计学意义(P<0.05);与卵巢癌组相比,10μmol·L^(-1)黄腐酚组ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达水平无显著差异(P>0.05);与10μmol·L^(-1)黄腐酚组相比,20、40、80、160μmol·L^(-1)黄腐酚组SKOV3/DDP细胞中ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 黄腐酚可降低卵巢癌SKOV3/DDP细胞的耐药性,抑制细胞活性,促进细胞凋亡,可能与下调ABCB1、MDR-1和P-gp蛋白表达相关。

HPLC法测定苦参及苦参汤中黄腐醇和苦参啶的含量

建立测定苦参及苦参汤有效部位中黄腐醇和苦参啶含量的高效液相色谱方法。方法:Phenomenex Luna C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.38%磷酸水溶液(75:25),流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为365nm。结果:黄腐醇和苦参啶分别在2.528×10^(-3)～1.264×10^(-2)μg和0.204～1.020μg范围内线性良好,相关系数 r 分别为0.9997和0.9998。3组样品黄腐醇平均回收率为100.9%,99.77%,99.26%,RSD(n=3)为1.6%,I.1%,2.0%;苦参啶平均回收率为97.66%,97.84%,96.61%,RSD(n=3)为1.4%,2.1%,1.5%。结论:本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于控制苦参及苦参汤有效部位质量。

RP-HPLC法测定酒花中的黄腐酚

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测酒花中黄腐酚含量的方法。选用色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250mm×4·6mm,5μm),以甲醇和0·2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。柱温25℃,流速0·5mL/min,检测波长370nm。在此条件下,黄腐酚得到很好分离,在1·13～113mg/L范围内线性关系良好,R2=0·9992,外加标回收率在95·05%～104·03%之间,RSD=2·71%。该方法可以简便、准确地测定酒花中黄腐酚的含量。

酒花中的黄腐酚及其他含异戊二烯基类黄酮

黄腐酚是啤酒雌花中主要的含异戊二烯基的类黄酮。人们主要通过饮用啤酒来摄入黄腐酚和其他含异戊二烯基类黄酮(8-异戊二烯基-4,5,7-三羟黄烷酮和异黄腐酚)。研究发现,黄腐酚是一种用途广泛的癌症化学预防剂,而8-异戊二烯基-4,5,7-三羟黄烷酮则被认为是目前最有效的植物雌激素。可以通过改变种植方法或利用生物工艺学方法,增加啤酒中的黄腐酚以及制药产品中8-异戊二烯基-4,5,7-三羟黄烷酮的含量。

不同品种啤酒中黄腐酚含量差异性成因的研究

为了探究不同品种啤酒中黄腐酚(Xanthohumol,Xn)含量不同的主要成因,设计了不同的遮光处理实验,对比了用6种不同啤酒及类似色度稀释黑墨水遮光处理对Xn样品的光异构化的影响。结果表明,用啤酒覆盖遮光,或混合啤酒能抑制Xn样品的光异构化,且黑啤的抑制效果优于浅色啤酒;稀释黑墨水覆盖遮光,也能抑制Xn样品的光异构化,效果与色度相近的黑啤一致。当添加了不同品种啤酒的Xn样品,用相同覆盖厚度的黑墨水进行遮光后,光照处理后,均能抑制光吸收值OD370降低,但各样品间并无显著性差异。研究间接证明了不同啤酒Xn含量差异的真正原因,在于透光性不同的物理作用,而不是含有小分子抑制剂的化学作用,这为优化啤酒发酵及储存的光照条件提高啤酒黄腐酚含量提供了借鉴。

黄腐酚的研究现状及啤酒酿造应用前景

黄腐酚是由酒花所分泌产生的,属于异戊烯类黄酮化合物(Xanthohumol,简称Xn)。黄腐酚具有抗癌、预防和治疗糖尿病、抗氧化等多种生理活性。黄腐酚的提取方法主要有:有机溶剂提取、大孔树脂吸附、超声技术提取、高速逆流色谱提取法。饮用啤酒是人体吸收黄腐酚的唯一方法,通过提高啤酒中黄腐酚的含量,可提高人体对黄腐酚的摄入量,可采用在啤酒酿造工艺过程提高啤酒的黄腐酚含量。(孙悟)

黄腐酚与食品酸味剂的协同抗氧化活性研究

黄腐酚是啤酒花中的一种重要的生物黄酮,具有多种生理功效。文章在研究了黄腐酚的稳定性基础上,选取了β-胡萝卜素亚油酸体系和DPPH体系,以协同系数（SE）为衡量指标,考察了黄腐酚与柠檬酸、柠檬酸钠、维生素C的协同抗氧化作用。实验结果表明,在β-胡萝卜素亚油酸体系中,当黄腐酚浓度小于1.5mg/m L时,黄腐酚与各种酸味剂均不存在协同抗氧化作用,而当浓度大于1.5mg/m L时,黄腐酚与各种酸味剂之间均存在协同抗氧化活性,但相对于DPPH体系,其协同作用较弱;而对于DPPH体系,黄腐酚在0.5~3.0mg/m L的浓度范围内与各种酸味剂之间均存在协同抗氧化活性,且协同作用的高低随黄腐酚的浓度提高变化并不明显。

富含黄腐酚啤酒的研究与制备

酒花中的黄腐酚具有多种有利于人类的生物活性。文中通过在啤酒中添加高纯度的黄腐酚粉末来提高啤酒中的黄腐酚含量,并对其利用情况及啤酒老化情况进行了研究。最终选用在成品啤酒中添加黄腐酚的工艺,这一添加方法能够保证黄腐酚含量在0.35mg/L^3.5mg/L,并且能够抑制啤酒的老化。