一株具有抗菌和细胞毒活性的海洋嗜盐菌XD20的筛选和鉴定

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体rDNA ITS区序列分析，并将所测得序列在NCBI数据库中进行相似性搜索，选取其中相似性较高的序列以邻接法构建系统进化树，将该菌株分类鉴定到种。结果：从我国东海海域C01站位（122°26′30″，30°43′48″）30m水深处分离获得一活性菌株XD20，是一嗜盐菌株，能耐受高达10．0％的盐浓度，合适的生长盐浓度范围为2．5％～7．5％；它对白念珠菌具有抑菌活性，对SMMC7721细胞株和HeLa细胞株具有细胞毒活性。以菌丝断裂方式产生节孢子，孢子大小及形态与Wallemia sebi相符；rDNAITS区测序发现，该菌株序列与Wallemia sebi的多条序列相似程度较高，且差异均在ITS1和ITS2区，属于可变区。结论：活性菌株XD20首次从海洋中分离获得，为一嗜盐海洋菌株，鉴定为Wallemia sebi（Fr．）Arx。

影响甘蔗内生成团泛菌XD20生长和促生特性的因子分析

【目的】探讨环境因子对甘蔗内生成团泛菌(Pantoea agglomerans)XD20生长及促生特性的影响,为该菌的进一步开发应用提供参考。【方法】检测不同pH、氯化钠浓度、重金属、化学试剂及铁离子浓度、碳源、氨基酸及碳氮比对菌株XD20生长、嗜铁性能和溶磷性能的影响,并采用正交设计对碳源、氮源、氯化钠浓度进行优化筛选。【结果】菌株XD20适宜生长的pH在7左右,超过4%的氯化钠浓度会抑制其生长;菌株XD20具有一定的重金属耐受性,可在Mn7+、Cr6+浓度为5~400 mg/L范围内生长;以MSA作为基础培养基,当铁离子浓度为0~10μmol/L时,该菌的相对嗜铁量随铁离子浓度升高而升高,当铁离子浓度超过10μmol/L时,其相对嗜铁量含量呈降低趋势。以柠檬酸为碳源、脯氨酸为氮源、碳氮比为3∶1时,有利于菌株XD20嗜铁素的分泌。不同碳源对菌株生长和溶磷性能的影响结果表明,有利于该菌生长的碳源排序为甘油>葡萄糖>柠檬酸>蔗糖>苹果酸;正交试验结果表明,供试菌株XD20生长量最大的碳源、氮源和氯化钠浓度分别为0.1%柠檬酸、0.5 g/L硫酸铵和4%氯化钠;影响供试菌溶磷能力的因子顺序为钠离子浓度>碳源>氮源,菌株XD20溶磷量最大时的培养条件与其生长量最大时的培养条件一致。【结论】甘蔗内生固氮菌株XD20具有较好的环境耐受性,铁离子浓度会影响其生长量和嗜铁量。以柠檬酸为碳源、脯氨酸为氮源、碳氮比为3∶1时,有利于菌株XD20嗜铁素的分泌。0.1%柠檬酸、0.5 g/L硫酸铵和4%氯化钠的培养条件对其生长和溶磷特性的效果最好。