高蛋白日粮对雏鹅生长性能、血清炎症因子及XDH表达的影响

【目的】探讨高蛋白日粮对雏鹅生长性能、血清炎症因子及肝脏、肾脏、空肠、十二指肠中黄嘌呤脱氢酶(XDH)表达的影响。【方法】选用1日龄雁鹅72只,随机分成对照组(CP)、高蛋白组1(HP1)和高蛋白组2(HP2),分别饲喂含180.00,230.00和280.00 g/kg粗蛋白的日粮,每组3个重复,每个重复8只鹅。试验为期14 d,每周测定各组雏鹅采食量、体质量。于7和14 d采血,分离血清,用ELISA法测定血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(1L-1β)、白细胞介素6(IL-6)、尿酸(UA)含量;采用RT-qPCR、免疫组化法、Western-blotting法测定14日龄雏鹅肝脏、肾脏、空肠、十二指肠中XDH基因及其蛋白的表达水平。【结果】1)7日龄时,HP2组雏鹅的平均体质量显著小于CP组(P<0.05),极显著小于HP1组(P<0.01),HP1组雏鹅的平均日增重显著大于HP2组(P<0.05);14日龄时,CP组雏鹅的平均体质量、平均日增重、日采食量极显著高于HP1和HP2组(P<0.01)。2)7日龄时,HP2组雏鹅血清中的1L-1β、TNF-α、UA含量及XOD活性均极显著高于CP组(P<0.01),1L-1β、TNF-α、UA含量显著高于HP1组(P<0.05);HP1组雏鹅血清中TNF-α质量浓度极显著高于CP组(P<0.01)。14日龄时,HP2组雏鹅血清中1L-1β、IL-6、TNF-α、UA含量及XOD活性均显著或极显著高于CP组和HP1组;HP1组雏鹅血清中的1L-1β、IL-6、TNF-α、UA含量及XOD活性极显著高于CP组(P<0.01)。3)HP2组雏鹅肝脏、肾脏、十二指肠的XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于CP组(P<0.05或P<0.01),肝脏、肾脏中XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于HP1组(P<0.05或P<0.01);HP1组雏鹅肝脏、十二指肠中XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于CP组(P<0.05或P<0.01)。各组雏鹅空肠中XDH基因及其蛋白的表达无显著差异(P>0.05)。【结论】摄入过高水平的蛋白会导致雏鹅生长性能降低,机体发生炎症反应,肝脏、肾脏、十二指肠中XDH基因和蛋白表达量增加,从而引发雏鹅高尿酸血症。

系统测评xDHB3LYP密度泛函方法在描述π-π、CH/π、和SH/π等非键相互作用中的表现

正确描述由非键相互作用驱动的分子解离曲线仍然是密度泛函方法开发的一个巨大的挑战.目前常用的杂化泛函使用密度、密度梯度、动能密度以及精确交换等仅包含占据轨道信息的变量无法正确描述色散作用中的R渐进衰减行为.在泛函构造中过分强调平衡位置的精度可能会影响解离曲线其它区域的整体表现.目前,常用的密度泛函方法有系统性低估弱相互作用的趋势.这一问题需要通过引入经验色散校正来缓解.本文证明了在不使用经验色散校正的情况下,双杂化近似方法,特别是新近开发的revXYG3和XYG7两种泛函,可以准确地描述整个分子解离曲线,误差仅有0.1 kcal/mol左右.

XDH系列型心电图机干扰的排除

在送检的心电图机中,时常出现干扰现象,无法对各项技术指标进行检定。要排除干扰,必须首先分清楚属哪一种类型的干扰,然后动手加以排除。这里以上海产XDH系列型心电图机为例,谈一下如何诊断和排除。 1.电源纹波系数较大引起强烈干扰仪器开机后,在“观察”状态,不管导联选择开关置何位置,描笔均会大幅度振动。遇见这种故障应立即停机,拔下描笔的双心播头,否则会损坏描笔。对XDH—3B型心电图机,因线路各部分之间均用多芯插件连接,往往插座插得不够牢靠,造成描笔时无时而大幅度振动。这时先要检查电源上CH5和CH7的插件。其次要检查C49、C50两只滤波电容。

新大洲·本田XDH125型摩托车维修调整数据(一)

一、技术规格 1.尺寸及重量 总长:2020mm;总宽;800mm;总高:1065mm;轴距:1280mm;鞍座高度:765mm;脚踏支架高度:293mm;离地间隙:140mm;净质量:109kg(Ⅰ类),111kg(Ⅱ类),110kg(Ⅲ类)。

XDH型携带式水质细菌快速检验箱研制报告

为了贯彻毛主席关于“把医疗卫生工作的重点放到农村去”“备战备荒为人民”的伟大指示,针对目前在我国广大农村及各水系进行现场水质细菌监测工作的需要,我们组织设计并试制了这种“携带式水质细菌快速检验箱”。为了进行技术鉴定经营口市无线电二厂小批生产20台,并由部分省、市、自治区卫生防疫站和自来水公司进行了试用。至目前为止,在国内尚无同类型产品;国外只有Millipore公司一家已有成套的野外携带式水质细菌检验设备出售。其组装紧凑,检验项目也比较全。

耳穴揿针治疗对剖宫产初产妇泌乳功能及TDP-43/Btn1A1/XDH通路的影响

目的:观察耳穴揿针治疗对剖宫产初产妇母乳喂养及泌乳功能的影响,并从乳脂分泌相关基因角度探讨其作用机制。方法:将100例剖宫产初产妇随机分为观察组(50例,脱落3例)和对照组(50例,剔除2例)。对照组予产科常规护理;观察组在对照组基础上,给予耳穴揿针治疗1次,穴取内分泌、胸、胸椎、神门、交感等,取一侧耳穴,共持续3 d。比较两组初产妇治疗后泌乳启动时间、产后72 h泌乳充足率、产后42 d纯母乳喂养率、母乳喂养评分;实时荧光定量PCR法、Western blot法检测两组初产妇治疗后乳汁反式激活应答DNA结合蛋白(TDP-43)、嗜乳脂蛋白亚家族1成员A1(Btn1A1)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)的mRNA及蛋白表达。结果:治疗后,观察组泌乳启动时间早于对照组(P<0.01),母乳喂养评分高于对照组(P<0.01);观察组产后72 h泌乳充足率为63.8%(30/47),高于对照组的41.7%(20/48,P<0.05);观察组产后42 d纯母乳喂养率为72.3%(34/47),高于对照组的47.9%(23/48,P<0.05)。观察组乳汁TDP-43、Btn1A1 mRNA及蛋白表达高于对照组(P<0.01);两组乳汁XDH mRNA及蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在常规护理基础上,加用耳穴揿针治疗可以提前启动剖宫产初产妇泌乳,提高产后泌乳充足率及产后纯母乳喂养率,其作用机制可能与上调TDP-43、Btn1A1表达有关。

3,5,2',4'-四羟基查尔酮对小鼠血尿酸及肝脏XOD/XDH的影响

目的研究3,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮（P40）对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化还原酶的影响（量效及时效关系）。方法腹腔注射尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾（450 mg·kg-1体重）复制高尿酸血症小鼠模型。用磷钨酸法测定血尿酸（uric acid,UA）水平;用Elisa方法测定肝脏黄嘌呤氧化酶（XOD）及黄嘌呤脱氢酶（XDH）的含量。结果灌胃给予3,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮（0.5~4.0 mg·kg-1）后,显著降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平和肝脏中黄嘌呤氧化酶的含量,与模型组相比,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。灌胃给予别嘌醇30 min、3,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮60 min时即能显著降低高尿酸小鼠血清尿酸水平;给予3,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮/别嘌醇15、30、60、90 min后,均能降低肝脏中黄嘌呤氧化酶及黄嘌呤脱氢酶的含量,与模型组相比,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论 13,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮可降低氧嗪酸钾所致高尿酸血症小鼠的尿酸水平,起效时间慢于别嘌醇;2 3,5,2＇,4＇-四羟基查尔酮的降尿酸作用与抑制黄嘌呤氧化还原酶活性有关。

麦洼牦牛XDH和BTN1A1基因哺乳期表达分析

为了鉴定牦牛乳脂肪滴形成和分泌相关的黄嘌呤脱氢酶(XDH)、嗜乳脂蛋白亚家族成员1(BTN1A1)基因全泌乳期的表达状况,产犊前15天和产犊后第1,15,30,60,120,240天采集5头麦洼牦牛乳腺组织样品,运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析XDH、BTN1A1基因全泌乳期表达变化以及它们与牦牛泌乳的关系。结果表明:牦牛乳腺BTN1A1基因在泌乳的第30天和第120天有2个表达峰,最大峰值出现在产犊后的第30天;XDH基因在泌乳的第30天出现峰值。XDH、BTN1A1基因在产犊后30～120 d的表达水平与产犊前15天相比差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),说明XDH、BTN1A1基因在牦牛产犊后30～120 d维持较高水平并稳定表达。

瑞氏木霉木糖代谢关键酶基因在不同碳源条件下的表达

用２０ 种不同的碳源（ 包括单一碳源和混合碳源） 分别培养瑞氏木霉（ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＱＭ９４１４ 。通过一系列Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交分析检测瑞氏木霉木糖还原酶（ＸＲ） ，木糖醇脱氢酶（ＸＤＨ） 以及转醛醇酶（ＴＡＬ） ｍ ＲＮＡ 的表达情况。实验结果证实，槐糖和木二糖是ｘｒ 和ｘｄｈ 表达的强诱导物，阿拉伯糖和乳糖也有较强的诱导作用。葡萄糖在培养基中的存在阻遏该二基因的表达。当葡萄糖耗尽以后，培养基中不存在任何诱导物的情况下，ｘｒ 和ｘｄｈ 以一定的基础水平进行转录。相比较，ｔａｌ

从猕猴肝脏组织扩增黄嘌呤脱氢酶／氧化酶基因片段

RT-PCR扩增猕猴黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因片段,为进一步开展相关研究提供实验资料。方法提取猕猴新鲜肝脏组织总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,对获得的目的片段进行序列测定,与GenBank上发表的人类(Homo sapiens)、小鼠(Mus musculus)、家鼠(Rattus norvegicus)、野猪(Sus scrofa)等物种XDH/XO基因进行该序列同源性比对分析,DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨基酸序列,InterProScan及SWISS-MODEL工具进行XDH/XO的编码蛋白结构域及功能预测及三维结构构建。结果 RT-PCR产物电泳检测得到了与设计大小相一致的目的条带,序列测定共测到683个核苷酸,DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨基酸序列包括了1个编码53个氨基酸的开放阅读框(ORF),通过该软件包中Multiple alignment对目的基因片段的核苷酸序列与NCBI报道的人类、小鼠、家鼠、野猪XDH/XO基因mRNA互补的cDNA核苷酸序列同源性进行同源性比较分析,结果显示所扩增得到的目的片段与人类同源性最高,为95.6%,与小鼠、家鼠、野猪的同源性分别为85.2%、84.3%、86.1%,说明获得的基因片段是猕猴的XDH/XO基因片段,且该基因在物种间具有较高的相似性。生物信息学预测该段XDH/XO编码蛋白含有醛氧化/脱氢酶的钼喋呤结合点结构域及黄嘌呤脱氢酶结构域。结论在体外成功扩增出猕猴XDH/XO基因片段,为进一步开展高尿酸血症致病机理研究,抗高尿酸血症新药研发奠定工作基础。

一氧化氮与牙齿敏感症关系的研究

为进一步探索XDH治疗牙齿敏感症的机理 ,选取 12名健康志愿者作对照 ,32名我院门诊龈炎患者为受试对象 .采用Gress法测试受试者用药前后唾液内NO2 - 含量 ,从而简接反映唾液NO水平的变化 .结果显示 :用药后对照组和实验组唾液内NO水平均有升高 ,且与用药前有显著性差别 (P <0 0 0 1) .提示 :XDH能在口腔微环境中产生NO ,使敏感区开放的小管内牙髓神经末梢敏感性降低 ,从而迅速达到脱敏效果 .

重组枯草芽孢杆菌表达4-木糖醇脱氢酶的发酵和反应条件优化

L-木酮糖(L-苏式-戊酮糖)是一种昂贵的稀有戊糖,而4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase,XDH)是生物合成L-木酮糖(L-xylulose)的关键酶。为了促进L-木酮糖的生产,对枯草芽孢杆菌外源表达4-木糖醇脱氢酶的发酵条件进行优化,并对以木糖醇为底物静息细胞催化反应合成L-木酮糖的反应条件进行研究。通过单因素实验确定了最佳培养基的成分(g/L)为:蔗糖25,尿素6,MgSO_40. 05,MnSO_40. 01,FeSO_40. 01,初始pH值8. 0。最佳发酵条件为:装液量40 mL(250 mL锥形瓶),接种量1. 67%,发酵培养温度28℃。在优化条件下4-木糖醇脱氢酶酶活为5. 183 U/L,与初始酶活相比提高了231. 2%。最优反应条件:底物质量浓度20 g/L,50mmol/L甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(pH 10. 0),反应温度45℃,优化反应条件下转化率达到17. 74%。通过对菌株发酵和反应工艺条件的优化,为后续L-木酮糖工业化生产奠定了基础。

RT-qPCR检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平方法的建立

目的建立实时荧光定量(RT-qPCR)检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因转录水平的方法,以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。方法提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA,经逆转录得到cDNA,以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度,使用设计的引物序列和内参基因进行RT-qPCR检测,得到XDH/XO基因表达的标准曲线。进而检测Wistar大鼠高尿酸血症动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结果 RT-qPCR法检测得到的XDH/XO基因标准曲线溶解峰单一,R^2接近1,能检测出高尿酸动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结论 RT-qPCR检测Wistar大鼠XDH/XO基因转录水平的方法具有定量准确,重复性好的特点,可应用于高尿酸血症的发病机理、新药研究等方面。

木糖代谢基因表达水平对酿酒酵母重组菌株产物形成的影响

以Ｅ．ｃｏｌｉＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ穿梭质粒ＹＥｐ２４为骨架，将树干毕赤酵母（ＰｉｃｈｉａｓｔｉｐｉｔｉｓＣＢＳ６０５４）的木糖还原酶（ＸｙｌｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅＸＲ）基因ＸＹＬ１及木糖醇脱氢酶（ＸｙｌｏｌｉｔｏｌｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＸＤＨ）基因ＸＹＬ２分别以不同的相对表达方向置于酿酒酵母的乙醇脱氢酶Ｉ（ＡＤＨ１）启动子和磷酸甘油激酶（ＰＧＫ）启动子下，构建不同ＸＹＬ１及ＸＹＬ２的重组质粒。这些重组质粒分别转化酿酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＨ１５８）受体菌。得到的重组菌株表现出不同的基因表达水平，ＸＲ与ＸＤＨ的酶比活力比值即ＸＲ／ＸＤＨ的变化范围在００６～１７５之间。当ＸＹＬ１或ＸＹＬ２受ＰＧＫ１启动子控制同时位于ＡＤＨ１启动子下游时，检测到最高的酶比活力。为了加强对木糖的利用，在ＸＹＬ１、ＸＹＬ２基因的酵母重组菌株中又引入磷酸戊糖途径中的转醛酶（Ｔｒａｎｓａｌｄｏｌａｓｅ）基因ＴＡＬ１及转酮酶（Ｔｒａｎｓｋｅｔｏｌａｓｅ）基因ＴＫＬ１，使酵母菌在原有水平的基础上超表达合成转酮酶及转醛酶。同时具有ＸＹＬ１和ＸＹＬ２以及超表达基因ＴＡＬ１、ＴＫＬ１的酵母重组菌株可以在木糖为唯一碳源平板?

野生大豆植株中酰脲分布和嘌呤降解酶活性

野生大豆植株中,合成酰脲的三种关键酶中的黄嘌呤脱氢酶,尿酸酶只存在于根瘤中,而尿囊素酶存在于所有器官。茎和荚皮中的尿囊素和尿囊酸含量较高,茎尿囊素和尿囊酸含量高峰在结荚后期,荚皮尿囊素和尿囊酸含量在结荚初期最高,以后迅速下降,根瘤尿囊素酶活性较其它器官高,在整个生育期中以结荚后期最高。荚皮中尿囊素和尿囊酸含量明显高于籽粒,而籽粒中尿囊素酶活性是荚皮1—3倍。

钼素对不同氮素形态营养液培养的盐角草生物量的影响

以盐角草(Salicornia europaea)为材料进行水培实验,研究了不同浓度钼素营养对硝态氮(NO3--N)和铵态氮(NH4+-N)营养液中培养的盐角草生长的影响。结果表明,两种氮素形态营养液培养下,随着钼素水平的提高,盐角草肉质茎中硝酸还原酶(NR)和黄嘌呤脱氢酶(XDH)的活性增强,叶绿素含量、酰脲类物质(Ureides)含量升高,生物产量增加;3μmol.L-1的钼素叶面喷施对盐角草肉质茎生长优于营养液添加钼素。不同氮素营养液培养下,盐角草生长有明显差异,NH4+-N营养液培养较NO3--N营养液培养的盐角草叶绿素含量高,XDH活性高,Ureides含量增加,但NR活性下降,生物产量减少。通过对海水灌溉NO3--N营养液培养的盐角草增施钼素,能提高NR和XDH活性,增加盐角草的生物产量。

荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比较

目的比较荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量的差异,为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR与半定量PCR进行相对定量检测,结果做比对分析。结果两种检测方法均能检测到健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织0.4ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,半定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织15.625 ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR较半定量灵敏度高39倍。两种方法检测结果均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR与半定量PCR检测结果存在有一定差异。结论两种方法均可用于检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量,荧光实时定量PCR灵敏度较高于半定量PCR法。

一种基因工程改造的NADH高亲和力木糖还原酶突变基因可促进酿酒酵母发酵木糖生成乙醇

在导入表达毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)和木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase,XDH)基因的重组酿酒酵母中,木糖还原酶活性主要依赖辅酶NADPH,木糖醇脱氢酶活性依赖辅酶NAD+,两者的辅助因子不同导致细胞内电子氧化还原的不平衡,是造成木糖醇积累,影响木糖代谢和乙醇产量的主要原因之一.将经过基因工程改造获得的NADH高亲和力的木糖还原酶突变基因m1,与毕赤酵母木糖醇脱氢酶(PsXDH)基因xyl2共转染酿酒酵母AH109,以转染毕赤酵母木糖还原酶(PsXR)基因xyl1和xyl2重组质粒的酵母细胞为对照菌株,在SC/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基中进行筛选,获得的阳性转化子分别命名为AH-M-XDH和AH-XR-XDH.重组酵母在限制氧通气条件下对木糖和葡萄糖进行共发酵摇瓶培养,HPLC检测发酵底物的消耗和代谢产物的产出情况.结果显示,与对照菌株AH-XR-XDH相比,AH-M-XDH的木糖利用率明显提高,乙醇得率增加了16%,木糖醇产生下降了41.4%.结果证实,通过基因工程改造的木糖代谢关键酶,可用于酿酒酵母发酵木糖生产乙醇,其能通过改善酿酒酵母细胞内氧化还原失衡的问题,提高木糖利用率和乙醇产率.

猕猴不同组织器官中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

目的建立半定量RT-PCR检测方法检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的表达。方法分别提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,内参基因选用管家基因GAPDH,对获得的目的片段进行序列测定以鉴定其特异性,在凝胶影像分析仪Quantity one软件得出其电泳条带的灰度值(IOD),计算目的基因与内参基因比值得到猕猴不同组织XDH/XO的mRNA的相对表达量。结果建立了半定量RT-PCR检测方法,猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,其次为心肌,肾脏,睾丸,皮肤。结论本研究所建立的半定量RT-PCR检测方法可应用于检测猕猴各组织器官组中的XDH/XO的mRNA的表达差异。