高蛋白日粮对雏鹅生长性能、血清炎症因子及XDH表达的影响

【目的】探讨高蛋白日粮对雏鹅生长性能、血清炎症因子及肝脏、肾脏、空肠、十二指肠中黄嘌呤脱氢酶(XDH)表达的影响。【方法】选用1日龄雁鹅72只,随机分成对照组(CP)、高蛋白组1(HP1)和高蛋白组2(HP2),分别饲喂含180.00,230.00和280.00 g/kg粗蛋白的日粮,每组3个重复,每个重复8只鹅。试验为期14 d,每周测定各组雏鹅采食量、体质量。于7和14 d采血,分离血清,用ELISA法测定血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(1L-1β)、白细胞介素6(IL-6)、尿酸(UA)含量;采用RT-qPCR、免疫组化法、Western-blotting法测定14日龄雏鹅肝脏、肾脏、空肠、十二指肠中XDH基因及其蛋白的表达水平。【结果】1)7日龄时,HP2组雏鹅的平均体质量显著小于CP组(P<0.05),极显著小于HP1组(P<0.01),HP1组雏鹅的平均日增重显著大于HP2组(P<0.05);14日龄时,CP组雏鹅的平均体质量、平均日增重、日采食量极显著高于HP1和HP2组(P<0.01)。2)7日龄时,HP2组雏鹅血清中的1L-1β、TNF-α、UA含量及XOD活性均极显著高于CP组(P<0.01),1L-1β、TNF-α、UA含量显著高于HP1组(P<0.05);HP1组雏鹅血清中TNF-α质量浓度极显著高于CP组(P<0.01)。14日龄时,HP2组雏鹅血清中1L-1β、IL-6、TNF-α、UA含量及XOD活性均显著或极显著高于CP组和HP1组;HP1组雏鹅血清中的1L-1β、IL-6、TNF-α、UA含量及XOD活性极显著高于CP组(P<0.01)。3)HP2组雏鹅肝脏、肾脏、十二指肠的XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于CP组(P<0.05或P<0.01),肝脏、肾脏中XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于HP1组(P<0.05或P<0.01);HP1组雏鹅肝脏、十二指肠中XDH基因及其蛋白的表达显著或极显著高于CP组(P<0.05或P<0.01)。各组雏鹅空肠中XDH基因及其蛋白的表达无显著差异(P>0.05)。【结论】摄入过高水平的蛋白会导致雏鹅生长性能降低,机体发生炎症反应,肝脏、肾脏、十二指肠中XDH基因和蛋白表达量增加,从而引发雏鹅高尿酸血症。

系统测评xDHB3LYP密度泛函方法在描述π-π、CH/π、和SH/π等非键相互作用中的表现

正确描述由非键相互作用驱动的分子解离曲线仍然是密度泛函方法开发的一个巨大的挑战.目前常用的杂化泛函使用密度、密度梯度、动能密度以及精确交换等仅包含占据轨道信息的变量无法正确描述色散作用中的R渐进衰减行为.在泛函构造中过分强调平衡位置的精度可能会影响解离曲线其它区域的整体表现.目前,常用的密度泛函方法有系统性低估弱相互作用的趋势.这一问题需要通过引入经验色散校正来缓解.本文证明了在不使用经验色散校正的情况下,双杂化近似方法,特别是新近开发的revXYG3和XYG7两种泛函,可以准确地描述整个分子解离曲线,误差仅有0.1 kcal/mol左右.

XDH系列型心电图机干扰的排除

在送检的心电图机中,时常出现干扰现象,无法对各项技术指标进行检定。要排除干扰,必须首先分清楚属哪一种类型的干扰,然后动手加以排除。这里以上海产XDH系列型心电图机为例,谈一下如何诊断和排除。 1.电源纹波系数较大引起强烈干扰仪器开机后,在“观察”状态,不管导联选择开关置何位置,描笔均会大幅度振动。遇见这种故障应立即停机,拔下描笔的双心播头,否则会损坏描笔。对XDH—3B型心电图机,因线路各部分之间均用多芯插件连接,往往插座插得不够牢靠,造成描笔时无时而大幅度振动。这时先要检查电源上CH5和CH7的插件。其次要检查C49、C50两只滤波电容。

新大洲·本田XDH125型摩托车维修调整数据(一)

一、技术规格 1.尺寸及重量 总长:2020mm;总宽;800mm;总高:1065mm;轴距:1280mm;鞍座高度:765mm;脚踏支架高度:293mm;离地间隙:140mm;净质量:109kg(Ⅰ类),111kg(Ⅱ类),110kg(Ⅲ类)。

木糖代谢基因表达水平对酿酒酵母重组菌株产物形成的影响

以Ｅ．ｃｏｌｉＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ穿梭质粒ＹＥｐ２４为骨架，将树干毕赤酵母（ＰｉｃｈｉａｓｔｉｐｉｔｉｓＣＢＳ６０５４）的木糖还原酶（ＸｙｌｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅＸＲ）基因ＸＹＬ１及木糖醇脱氢酶（ＸｙｌｏｌｉｔｏｌｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＸＤＨ）基因ＸＹＬ２分别以不同的相对表达方向置于酿酒酵母的乙醇脱氢酶Ｉ（ＡＤＨ１）启动子和磷酸甘油激酶（ＰＧＫ）启动子下，构建不同ＸＹＬ１及ＸＹＬ２的重组质粒。这些重组质粒分别转化酿酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＨ１５８）受体菌。得到的重组菌株表现出不同的基因表达水平，ＸＲ与ＸＤＨ的酶比活力比值即ＸＲ／ＸＤＨ的变化范围在００６～１７５之间。当ＸＹＬ１或ＸＹＬ２受ＰＧＫ１启动子控制同时位于ＡＤＨ１启动子下游时，检测到最高的酶比活力。为了加强对木糖的利用，在ＸＹＬ１、ＸＹＬ２基因的酵母重组菌株中又引入磷酸戊糖途径中的转醛酶（Ｔｒａｎｓａｌｄｏｌａｓｅ）基因ＴＡＬ１及转酮酶（Ｔｒａｎｓｋｅｔｏｌａｓｅ）基因ＴＫＬ１，使酵母菌在原有水平的基础上超表达合成转酮酶及转醛酶。同时具有ＸＹＬ１和ＸＹＬ２以及超表达基因ＴＡＬ１、ＴＫＬ１的酵母重组菌株可以在木糖为唯一碳源平板?

四妙散及其加减方对高尿酸合并高脂血症大鼠的影响及机理探讨

目的研究四妙散及其加减方对高尿酸合并高脂血症大鼠血清尿酸、血脂指标以及黄嘌呤氧化酶(XOD)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、四妙散组(10g·kg^(-1),按生药量计)、四妙散加减方组(13g·kg^(-1),按生药量计),每组10只。采用腺嘌呤+氧嗪酸钾+高糖高脂饲料制备高尿酸合并高脂血症大鼠模型。给药30d,戊巴比妥钠麻醉,采血并分离血清测定尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的水平;取肝组织匀浆测定XOD、XDH、SOD活性及MDA含量,取肾组织匀浆测定SOD活性及MDA含量;取肾脏切片,HE染色观察肾组织形态。结果与模型组比较,四妙散及其加减方组大鼠血清代谢指标均有不同程度的改善;四妙散加减方能显著降低血清UA、CHO、TG水平(P<0.05),升高HDL水平(P<0.05),显著降低肝组织XOD、XDH水平(P<0.05),显著升高肝、肾组织中SOD水平(P<0.05),降低肝、肾组织中MDA含量(P<0.05)。结论四妙散加减方具有降尿酸和降血脂的功效,其机制可能与其抑制XOD、XDH活性及增强SOD活性相关。

野生大豆植株中酰脲分布和嘌呤降解酶活性

野生大豆植株中,合成酰脲的三种关键酶中的黄嘌呤脱氢酶,尿酸酶只存在于根瘤中,而尿囊素酶存在于所有器官。茎和荚皮中的尿囊素和尿囊酸含量较高,茎尿囊素和尿囊酸含量高峰在结荚后期,荚皮尿囊素和尿囊酸含量在结荚初期最高,以后迅速下降,根瘤尿囊素酶活性较其它器官高,在整个生育期中以结荚后期最高。荚皮中尿囊素和尿囊酸含量明显高于籽粒,而籽粒中尿囊素酶活性是荚皮1—3倍。

钼素对不同氮素形态营养液培养的盐角草生物量的影响

以盐角草(Salicornia europaea)为材料进行水培实验,研究了不同浓度钼素营养对硝态氮(NO3--N)和铵态氮(NH4+-N)营养液中培养的盐角草生长的影响。结果表明,两种氮素形态营养液培养下,随着钼素水平的提高,盐角草肉质茎中硝酸还原酶(NR)和黄嘌呤脱氢酶(XDH)的活性增强,叶绿素含量、酰脲类物质(Ureides)含量升高,生物产量增加;3μmol.L-1的钼素叶面喷施对盐角草肉质茎生长优于营养液添加钼素。不同氮素营养液培养下,盐角草生长有明显差异,NH4+-N营养液培养较NO3--N营养液培养的盐角草叶绿素含量高,XDH活性高,Ureides含量增加,但NR活性下降,生物产量减少。通过对海水灌溉NO3--N营养液培养的盐角草增施钼素,能提高NR和XDH活性,增加盐角草的生物产量。

瑞氏木霉木糖代谢关键酶基因在不同碳源条件下的表达

用２０ 种不同的碳源（ 包括单一碳源和混合碳源） 分别培养瑞氏木霉（ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＱＭ９４１４ 。通过一系列Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交分析检测瑞氏木霉木糖还原酶（ＸＲ） ，木糖醇脱氢酶（ＸＤＨ） 以及转醛醇酶（ＴＡＬ） ｍ ＲＮＡ 的表达情况。实验结果证实，槐糖和木二糖是ｘｒ 和ｘｄｈ 表达的强诱导物，阿拉伯糖和乳糖也有较强的诱导作用。葡萄糖在培养基中的存在阻遏该二基因的表达。当葡萄糖耗尽以后，培养基中不存在任何诱导物的情况下，ｘｒ 和ｘｄｈ 以一定的基础水平进行转录。相比较，ｔａｌ

荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比较

目的比较荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量的差异,为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR与半定量PCR进行相对定量检测,结果做比对分析。结果两种检测方法均能检测到健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织0.4ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,半定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织15.625 ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR较半定量灵敏度高39倍。两种方法检测结果均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR与半定量PCR检测结果存在有一定差异。结论两种方法均可用于检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量,荧光实时定量PCR灵敏度较高于半定量PCR法。

一种基因工程改造的NADH高亲和力木糖还原酶突变基因可促进酿酒酵母发酵木糖生成乙醇

在导入表达毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)和木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase,XDH)基因的重组酿酒酵母中,木糖还原酶活性主要依赖辅酶NADPH,木糖醇脱氢酶活性依赖辅酶NAD+,两者的辅助因子不同导致细胞内电子氧化还原的不平衡,是造成木糖醇积累,影响木糖代谢和乙醇产量的主要原因之一.将经过基因工程改造获得的NADH高亲和力的木糖还原酶突变基因m1,与毕赤酵母木糖醇脱氢酶(PsXDH)基因xyl2共转染酿酒酵母AH109,以转染毕赤酵母木糖还原酶(PsXR)基因xyl1和xyl2重组质粒的酵母细胞为对照菌株,在SC/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基中进行筛选,获得的阳性转化子分别命名为AH-M-XDH和AH-XR-XDH.重组酵母在限制氧通气条件下对木糖和葡萄糖进行共发酵摇瓶培养,HPLC检测发酵底物的消耗和代谢产物的产出情况.结果显示,与对照菌株AH-XR-XDH相比,AH-M-XDH的木糖利用率明显提高,乙醇得率增加了16%,木糖醇产生下降了41.4%.结果证实,通过基因工程改造的木糖代谢关键酶,可用于酿酒酵母发酵木糖生产乙醇,其能通过改善酿酒酵母细胞内氧化还原失衡的问题,提高木糖利用率和乙醇产率.

柯乐猪XDH基因多态性鉴定及其对繁殖性状的影响

【目的】明确黄嘌呤脱氢酶基因(XDH)单核苷酸多态性(SNP)位点与柯乐猪繁殖性状的关联性,为加速柯乐猪的育种进程提供理论依据。【方法】选取87头健康经产柯乐母猪为研究对象,采用Sanger测序法筛查出XDH基因SNP位点,利用SPSS 22.0中的一般线性模型(GLM)分析SNP位点与柯乐猪繁殖性状指标(产活仔数、初生窝重、平均初生重、断奶仔猪数、断奶窝重及平均断奶重)的关联性,并通过RNAfold web server、ExPASy-ProtParam、NovoPro和SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析。【结果】在柯乐猪XDH基因上共筛选获得12个SNPs位点,分别是第33内含子上的g.108047658C>G和g.108047680C>A位点,第34内含子上的g.108048009C>T、g.108048044T>C、g.108048046T>C、g.108048047C>T、g.108048054C>T、g.108048153A>T、g.108048208A>G、g.108048212T>C和g.108048242C>T位点,第34外显子上的g.108047915G>A位点。12个SNPs位点均存在3种基因型,属于中度多态位点(0.25<PIC<0.50);g.108048047C>T、g.108048208A>G、g.108048242C>T、g.108048044T>C、g.108048046T>C和g.108048212T>C位点的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE>0.05),其余6个SNPs位点的基因型分布则显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE<0.05)。除g.108047658C>G位点与g.108047680C>A位点、g.108048044T>C位点与g.108048046T>C位点、g.108048046T>C位点与g.108048047C>T位点间存在强连锁不平衡关系外,其余各SNP位点间均不存在强连锁不平衡关系。g.108047658C>G和g.108047915G>A位点对柯乐猪产活仔数的影响达显著水平(P<0.05,下同),g.108047658C>G位点表现为CG基因型个体的产活仔数显著高于GG基因型个体,g.108047915G>A位点表现为AG基因型个体的产活仔数显著高于AA基因型个体。g.108047915G>A位点突变导致柯乐猪XDH基因mRNA二级结构发生改变,最小自由能由-1508.90 kcal/mol上升到-1507.80 kcal/mol;且XDH基因等位基因G的突变还导致其编码蛋白分子式、相对分子量、理论等电点(pI)、不稳定系数及蛋白高级结构发生改变。【结论】柯乐猪XDH基因第33内含子g.108047658C>G位点和第34外显子g.108047915G>A位点对其产活仔数的影响达显著水平,可作为柯乐猪繁殖性状改良的潜在分子辅助标记。

XDH型携带式水质细菌快速检验箱研制报告

为了贯彻毛主席关于“把医疗卫生工作的重点放到农村去”“备战备荒为人民”的伟大指示,针对目前在我国广大农村及各水系进行现场水质细菌监测工作的需要,我们组织设计并试制了这种“携带式水质细菌快速检验箱”。为了进行技术鉴定经营口市无线电二厂小批生产20台,并由部分省、市、自治区卫生防疫站和自来水公司进行了试用。至目前为止,在国内尚无同类型产品;国外只有Millipore公司一家已有成套的野外携带式水质细菌检验设备出售。其组装紧凑,检验项目也比较全。

猕猴不同组织器官中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

目的建立半定量RT-PCR检测方法检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的表达。方法分别提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,内参基因选用管家基因GAPDH,对获得的目的片段进行序列测定以鉴定其特异性,在凝胶影像分析仪Quantity one软件得出其电泳条带的灰度值(IOD),计算目的基因与内参基因比值得到猕猴不同组织XDH/XO的mRNA的相对表达量。结果建立了半定量RT-PCR检测方法,猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,其次为心肌,肾脏,睾丸,皮肤。结论本研究所建立的半定量RT-PCR检测方法可应用于检测猕猴各组织器官组中的XDH/XO的mRNA的表达差异。

木糖醇脱氢酶研究进展

综述了木糖醇脱氢酶研究现状,包括木糖醇脱氢酶的提取、结构、理化性质以及辅酶改造,同时对利用生物技术进行木糖醇脱氢酶基因克隆和表达的研究概况进行了简要介绍。

从猕猴肝脏组织扩增黄嘌呤脱氢酶／氧化酶基因片段

RT-PCR扩增猕猴黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因片段,为进一步开展相关研究提供实验资料。方法提取猕猴新鲜肝脏组织总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,对获得的目的片段进行序列测定,与GenBank上发表的人类(Homo sapiens)、小鼠(Mus musculus)、家鼠(Rattus norvegicus)、野猪(Sus scrofa)等物种XDH/XO基因进行该序列同源性比对分析,DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨基酸序列,InterProScan及SWISS-MODEL工具进行XDH/XO的编码蛋白结构域及功能预测及三维结构构建。结果 RT-PCR产物电泳检测得到了与设计大小相一致的目的条带,序列测定共测到683个核苷酸,DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨基酸序列包括了1个编码53个氨基酸的开放阅读框(ORF),通过该软件包中Multiple alignment对目的基因片段的核苷酸序列与NCBI报道的人类、小鼠、家鼠、野猪XDH/XO基因mRNA互补的cDNA核苷酸序列同源性进行同源性比较分析,结果显示所扩增得到的目的片段与人类同源性最高,为95.6%,与小鼠、家鼠、野猪的同源性分别为85.2%、84.3%、86.1%,说明获得的基因片段是猕猴的XDH/XO基因片段,且该基因在物种间具有较高的相似性。生物信息学预测该段XDH/XO编码蛋白含有醛氧化/脱氢酶的钼喋呤结合点结构域及黄嘌呤脱氢酶结构域。结论在体外成功扩增出猕猴XDH/XO基因片段,为进一步开展高尿酸血症致病机理研究,抗高尿酸血症新药研发奠定工作基础。

一氧化氮与牙齿敏感症关系的研究

为进一步探索XDH治疗牙齿敏感症的机理 ,选取 12名健康志愿者作对照 ,32名我院门诊龈炎患者为受试对象 .采用Gress法测试受试者用药前后唾液内NO2 - 含量 ,从而简接反映唾液NO水平的变化 .结果显示 :用药后对照组和实验组唾液内NO水平均有升高 ,且与用药前有显著性差别 (P <0 0 0 1) .提示 :XDH能在口腔微环境中产生NO ,使敏感区开放的小管内牙髓神经末梢敏感性降低 ,从而迅速达到脱敏效果 .

重组枯草芽孢杆菌表达4-木糖醇脱氢酶的发酵和反应条件优化

L-木酮糖(L-苏式-戊酮糖)是一种昂贵的稀有戊糖,而4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase,XDH)是生物合成L-木酮糖(L-xylulose)的关键酶。为了促进L-木酮糖的生产,对枯草芽孢杆菌外源表达4-木糖醇脱氢酶的发酵条件进行优化,并对以木糖醇为底物静息细胞催化反应合成L-木酮糖的反应条件进行研究。通过单因素实验确定了最佳培养基的成分(g/L)为:蔗糖25,尿素6,MgSO_40. 05,MnSO_40. 01,FeSO_40. 01,初始pH值8. 0。最佳发酵条件为:装液量40 mL(250 mL锥形瓶),接种量1. 67%,发酵培养温度28℃。在优化条件下4-木糖醇脱氢酶酶活为5. 183 U/L,与初始酶活相比提高了231. 2%。最优反应条件:底物质量浓度20 g/L,50mmol/L甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(pH 10. 0),反应温度45℃,优化反应条件下转化率达到17. 74%。通过对菌株发酵和反应工艺条件的优化,为后续L-木酮糖工业化生产奠定了基础。

RT-qPCR检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平方法的建立

目的建立实时荧光定量(RT-qPCR)检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因转录水平的方法,以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。方法提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA,经逆转录得到cDNA,以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度,使用设计的引物序列和内参基因进行RT-qPCR检测,得到XDH/XO基因表达的标准曲线。进而检测Wistar大鼠高尿酸血症动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结果 RT-qPCR法检测得到的XDH/XO基因标准曲线溶解峰单一,R^2接近1,能检测出高尿酸动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。结论 RT-qPCR检测Wistar大鼠XDH/XO基因转录水平的方法具有定量准确,重复性好的特点,可应用于高尿酸血症的发病机理、新药研究等方面。