枯草芽胞杆菌XF-1粗蛋白抑菌活性初步研究

枯草芽胞杆菌XF-1是一株对大白菜根肿病有良好防治效果及对多种植物病原真菌有抑菌效果的生防菌株。为了研究其可能的作用机制,本文用硫酸铵沉淀法提取了发酵液中粗蛋白,并在不同处理条件下对其抑菌活性进行了初步研究。该粗蛋白对蛋白酶K和胰蛋白酶及紫外照射均不敏感,对热稳定。经40、60、80℃和100℃处理20 min后,其抑菌作用基本上无变化;经121℃处理20 min后,抑菌活性保持60%。这些结果,为进一步研究XF-1菌株对根肿病的防治机制和进一步应用提供了试验依据。

生防菌株XF-1的鉴定和抑菌谱的测定

依据传统形态学、生理生化特征及16S rRNA基因序列,将一株对十字花科根肿病有很好防治效果的菌株XF-1鉴定为枯草芽孢杆菌。采用细菌的通用引物P0,P6扩增16S rRNA基因片段,得到1513 bp的DNA片段,其序列与枯草芽孢杆菌的序列的同源性高达99%。与病原真菌对峙培养的结果表明,该菌株能对供试的卵菌、子囊菌、担子菌和半知菌的21个植物病原真菌均有很好的抑制作用。

枯草芽孢杆菌XF-1中脱乙酰几丁质酶在大肠杆菌中的表达及其抑菌活性

根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱乙酰几丁质酶基因的相似性达到99%,氨基酸序列相似性为98%,在第19、47、60、256和257位的氨基酸发生了变化,分别由异亮氨酸代替了菌株B168脱乙酰几丁质酶中的甲硫氨酸、缬氨酸代替了谷氨酸、苏氨酸代替了异亮氨酸、天冬氨酸代替了谷氨酸、赖氨酸代替了天冬酰胺。菌株XF-1对稻瘟病菌Magnaporthe oryzae和芸薹根肿菌Plasmodiophora brassicae有抑制作用,而菌株B168没有。菌株XF-1和B168的csn基因在大肠杆菌Escherichia coli中的表达产物均具有脱乙酰几丁质酶活性,但前者的表达产物对稻瘟病菌及芸薹根肿菌具有抑制作用,而后者没有。表明脱乙酰几丁质酶是XF-1抑制根肿病作用机制之一,且上述5个氨基酸替代可能与抑菌机制有关。

XF-1高温高压储层孔隙介质气体吸脱附测试仪

结合氦孔隙度仪以及化工和煤岩气体吸附测试仪的测试方法和原理 ,研制了一种改进的固体介质气体吸附测量仪器。该仪器能在较大的温度 (15℃～ 15 0℃ )、压力 (0～ 6 0MPa)范围内 ,精确测量固结态圆柱状的、具有不同孔隙度、渗透率 (不限 )和非均质特征的岩心样品的气体 (各类纯组份气体或混合气体 )吸 /脱附等温线 ,并具有流程简洁、操作方便、性能可靠、制作成本低廉等优点。

XF-1可湿性粉剂对白菜根肿病的田间防控效果

针对目前防控根肿病登记药剂少和生防菌剂缺乏的现状,采用灌根法施药技术进行了田间药效试验,评价了XF-1可湿性粉剂对根肿病的防治效果。结果表明:XF-1可湿性粉剂4 500 g/hm 2、3 500 g/hm 2第4次施药55 d后对根肿病的防效分别达到70.0%和62.1%,与对照药剂氟啶胺悬浮剂2 500 g/hm 2的防效无显著差异;此外,该药剂对作物安全。因此XF-1可湿性粉剂是防治根肿病较理想的生防菌剂。试验结果可为新农药登记提供科学依据。

枯草芽孢杆菌XF-1提取物对11种植物病原菌的抑制作用

采用盐酸和甲醇抽提法,提取了枯草芽孢杆菌XF-1(Bacillus subtilis XF-1)的抑菌物质。以该提取物处理根肿菌孢子2 d,有50%孢子活性被抑制;处理9 d后,孢子萌发相对抑制率始终保持在90%以上。提取物对三七根腐病菌、水稻纹枯病菌、禾谷镰刀菌、魔芋基腐菌、烟草赤星菌生长抑制率分别为71.97%、62.23%、60.96%、60.70%和57.92%。

叶面喷施枯草芽胞杆菌XF-1防治大白菜根肿病

为了建立简易、有效的根肿病生防体系,本研究采用浇灌和喷施枯草芽胞杆菌XF-1的绿色荧光蛋白标记菌株XF-1-gfp,测定其在大白菜植株内的定殖能力,并用野生型菌株XF-1发酵液研究其防治根肿病和挽回产量效果。结果表明,叶面喷施XF-1-gfp发酵液后,标记菌在大白菜根、茎、叶等组织内的密度呈现出"先上升后下降最后趋于平稳"的趋势,最终稳定在约10~3 cfu/g组织;盆栽试验结果表明,与空白对照相比,所有处理发病率和病情指数均显著下降,喷施XF-1发酵液后最佳防治效果为56.4%,浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂2 000倍液及1×10~7 cfu/mL的XF-1发酵液防效分别为78.6%与70.7%。大田试验结果表明,喷施XF-1发酵液后防治效果达52.6%,与浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂(64.6%)及XF-1发酵液(74.0%)相比无显著差异。此外,与空白对照、浇灌10%氰霜唑悬浮剂及XF-1发酵液相比,喷施XF-1发酵液后大白菜单株产量分别增加了74.0%、35.1%及23.6%。试验结果表明叶面喷施XF-1发酵液是一种有效的防控大白菜根肿病及增产增收的方法。

枯草芽孢杆菌XF-1膏状悬浮剂增稠剂的筛选

生物相容性、贮存稳定性和析水性研究表明,先糊化6%可溶性淀粉成初级增稠剂,再在100 mL初级增稠剂中加入1 g枯草芽孢杆菌XF-1原粉和35 g可溶性淀粉所组成的初级悬浮剂,具有很好的热稳定性和耐冷性,XF-1菌体数达9.30×1010 CFU/g。

XF-1血红蛋白仪使用的点滴体会

随着血红蛋白仪的普遍使用，在使用中可不同程度出现一些故障或情况。现将我们应用XF-1型血红蛋白仪(南京半导体器件总厂产)的情况和几点体会简介如下：

吸附剂XF-1对奶牛舍中CO_2、CH_4、NH_3和H_2S的吸附能力试验

选用一种分子筛(XF-1)作为吸附剂,对奶牛圈舍中的CO_2、CH_4、NH_3和H_2S进行吸附试验。用便携式气体检测仪测定风机口排出的CO_2、CH_4、NH_3和H_2S浓度,悬挂吸附剂前后测得的浓度之差即为吸附剂XF-1的吸附浓度。根据实际测得的气温、气压、风速,利用理想气体状态方程推导出公式,将ppm换算为mg/m^3。当悬挂吸附剂后测得浓度与初始浓度无差异性时停止试验。结果表明:1kg吸附剂XF-4春季可吸附CO_2 61.29g、CH_4 8.39g、NH_3 1.27g、H_2S 1.71g;夏季可吸附CO_2 59.14g、CH_4 8.02g、NH_3 1.34g、H_2S1.75g;秋季可吸附CO_2 65.76g、CH_4 8.71g、NH_3 1.64g、H_2S 1.54g,冬季可吸附CO_2 70.91g、CH_4 9.32g、NH_3 2.29g、H_2S 1.57g。吸附剂XF-1对CO_2、CH_4和NH_3的吸附质量与圈舍温度、湿度、初始浓度相关性显著或极显著(P<0.05、P<0.01),对H_2S的吸附质量与圈舍湿度、气体的初始浓度相关性显著(P<0.05)。吸附剂XF-1在春、冬季悬挂31h,夏季、秋季悬挂30h需要更换。

枯草芽孢杆菌XF-1的碳水化合物活性酶类(CAZymes)蛋白预测与遗传关系分析

枯草芽孢杆菌XF-1对多种植物病原菌具有较好的抑制作用,是农业生产上非常重要的生防菌之一.碳水化合物活性酶类蛋白(CAZymes)作为植物病原真菌、细菌中重要的蛋白,在其生长和发育过程中发挥着重要作用.基于前期获得的枯草芽孢杆菌XF-1中104个分泌蛋白基本序列信息,利用CAT预测程序对该菌中的CAZymes蛋白进行预测分析,明确其含有CAZymes蛋白的数量是58个,上述蛋白可以分为主要类别和复合类别两大类,前者包括26个GHs、21个CBMs以及2个CEs、3个PLs、2个GTs;后者则包括4个复合蛋白类型GH/CBM.该研究有效地实现了枯草芽孢杆菌XF-1中CAZymes的预测,为进一步开展其功能研究打下坚实的理论基础.

XF-1型血红蛋白仪临床应用评价

临床目前测定血红蛋白(Hb)采用氰化血红蛋白法。我科用XF-1型血红蛋白仪并用生理盐水滴加溶血素代替文齐氏液测定Hb。现介绍如下: 材料和方法 1.仪器:XF-1型血红蛋白测定仪(南京半导总厂生产)721型分光光度计。 2.试剂:生理盐水、文齐氏液和溶血素。

ISOLATION AND STRUCTURE DETERMINATION OF XF-1,A NEW ANTHRACYCLINE ANTIBIOTIC

A new Mutactimycin group antibiotic(XF-1)was isolated from the mycelium of Streptomyces sp.80-115 and its structure has been determined on the basis of its spectroscopical and chemical properties. XF-1 showed active against some Gram positive bacteria.

枯草芽胞杆菌XF-1的根围定殖能力分析

采用抗生素标记菌株与盆栽试验研究了对大白菜根肿病具有良好防治效果的枯草芽胞杆菌XF-1的定殖动态及影响其定殖的因素,以便了解该菌株的生防机制及其商品化应用前景。结果表明,XF-1的定殖能力较强,能在大白菜根围、根表和根内长时间定殖,接种60天后,根围和根表定殖密度仍能稳定在103CFU/g土壤,根内定殖密度也仍稳定在102CFU/g根(鲜重)水平,根围和根表定殖趋势为先下降后上升再下降,最后趋于稳定;根内定殖动态则呈先上升后下降的趋势。XF-1在根部组织内的皮层薄壁细胞和导管内均有分布。定殖受土壤质量影响,灭菌土中定殖能力最强;施入菌液浓度越高,定殖菌体数越多;在16℃光照培养箱中28天后,定殖仍可达到105CFU/g土壤;施入马铃薯汁蔗糖液体培养基(PS)发酵的菌液后,XF-1在根围中的定殖量大于施入马铃薯汁葡萄糖液体培养基(PD)发酵的菌液。XF-1还能很好地在玉米根围定殖。

停用保护缓蚀剂XF-1的实验室试验研究

通过实验室的缓蚀试验和高压釜试验 ,研究了新型热力设备停用保护缓蚀剂 XF-1在常温下的缓蚀性能、热稳定性及毒性 ,为