全反式维甲酸对结肠癌细胞XIAP相关因子1表达的影响

目的了解全反式维甲酸对结肠癌lovo细胞XIAP相关因子1(XAF1)表达及细胞增殖的影响。方法以不同浓度的ATRA刺激lovo细胞,RT-PCR检测XAF1的mR-NA水平变化,Westernblot分析XAF1蛋白水平的表达;MTT法检测ATRA对lovo细胞生长抑制率。构建含有XAF1启动子序列荧火虫荧光素酶报告质粒,分析ATRA作用对XAF1启动子活性的影响。结果经ATRA作用,lovo细胞mRNA和蛋白的表达水平上调,细胞生长受到抑制。上述效应均具有药物浓度依赖性。报告基因分析结果显示,ATRA使含有XAF1启动子序列荧火虫荧光素酶报告质粒的虫荧光素酶的活性增加。结论ATRA通过促进启动子转录活性上调XAF1的mRNA和蛋白表达水平,并抑制结肠癌细胞的生长。

XIAP及其相关因子1在急性淋巴细胞白血病中表达意义

目的:探讨X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及其相关因子(XAF1)在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其临床意义,并评估其在临床治疗及预后中的价值。方法:采用病例对照研究,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测85例ALL患者骨髓标本中XIAP及XAF1的mRNA表达水平。结果:XIAP mRNA表达水平初诊ALL组高于CR组和对照组(P<0.05),而低于复发组(P<0.05),CR组表达水平高于对照组(P<0.05);而XAF1在ALL时呈低表达或不表达,CR组表达高于ALL其它组(P<0.05),与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。XIAP及XAF1二基因表达水平在T系ALL与B系ALL,成人与儿童,男女性别之间表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。XIAP/XAF1比值在ALL患者中初诊组和复发组明显高于对照组和缓解组(P<0.05),缓解组高于对照组(P<0.05)。结论:ALL患者XIAP基因高表达,而XAF1呈现低表达或不表达,提示XIAP可能通过抑制白血病细胞凋亡参与了ALL的发生发展,并与预后不良及治疗反应相关。ALL中XIAP与XAF1表达水平的不平衡,可能是ALL预后不良及复发的一项重要因素之一。抑制XIAP及上调XAF1基因来治疗ALL,将为ALL的基因治疗提供新思路。

颞叶癫痫大鼠海马XIAP相关因子-1蛋白表达变化研究

目的动态观察颞叶癫痫大鼠海马神经元XIAP相关因子-1(XAF1)的表达变化,探讨其在癫痫发生发展中的作用。方法清洁级SD雄性成年大鼠36只,随机分为正常对照组、致痫(SE)后3h、6h、12h、24h、72h组。用氯化锂(LiCl)和匹罗卡品(PILO)制备癫痫动物模型,应用免疫组化染色技术检测致痫后各时间点XAF1蛋白表达情况。结果对照组海马CA1、CA3区神经元XAF1蛋白表达极少,SE组CA1、CA3区XAF1蛋白表达在3～24h表达逐渐增高,72h表达有所下降,但仍高于对照组,各时间点两组间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论SE大鼠海马神经元XAF1表达增高,它可能参与了SE后脑神经元凋亡的调控。

X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究

目的观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值。方法选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例)。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平。对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组)。结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P<0.01)和非恶性血液病组(P<0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P<0.05)和非恶性血液病组(P<0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关。结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一。

慢性粒细胞白血病中X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1的表达及临床意义的初步研究

目的初步研究慢性粒细胞白血病（CML）中X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测35例慢性粒细胞白血病患者[慢性期19例，进展期16例（包括加速期5例，急变期11例）]和17例非恶性血液病组为对照组的骨髓标本中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）及其相关因子1（XAF1）的mRNA表达水平，采用SPSS16．0统计学软件进行数据分析处理。结果XIAP mRNA表达水平在进展期组患者骨髓中高于慢性期组（t=4．438，P〈0．01）和非恶性血液病组（t=10．93，P〈0．01），而XAF1mRNA表达水平则低于慢性期（t=2．61，P〈0．05）和非恶性血液病组（t=10．013，P〈0．05）；XIAPmRNA的表达水平在化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中显著低于化疗前（t=4．109，P〈0．01），而XAF1mRNA的表达水平则显著高于化疗前（t=5．995，P〈0．01）。结论XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一。

鼻咽癌组织中XIAP和XAF1的表达及意义

目的采用组织芯片技术研究鼻咽癌组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)与其拮抗蛋白XAF1的表达并探讨其意义。方法以50例鼻咽癌患者鼻咽部活体组织石蜡标本和20例鼻咽部慢性炎症组织石蜡标本为研究对象,利用组织芯片技术同时采用S-P免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织芯片中XIAP和XAF1的表达。结果 (1)鼻咽癌中XIAP的阳性表达明显高于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05)。鼻咽癌中XAF1的阳性表达明显低于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05);(2)XAF1在XIAP阳性的鼻咽癌石蜡标本中的阳性表达率低于在XIAP阴性的鼻咽癌石蜡标本中,XIAP和XAF1表达呈明显负相关(r=0.30,P<0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,XAF1在鼻咽癌中低表达,鼻咽癌中XIAP和XAF1表达呈负相关。XIAP和XAF1可能是鼻咽癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环,其与鼻咽癌的发生、发展密切相关。

建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株

【目的】为探索XIAP相关因子1(Xaf1)调节肿瘤细胞凋亡的机制,利用基因开关调节系统(Tet-on),拟建立由doxycycline调控表达的Xaf1诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1和pWZL-Hyg质粒用基因转染技术转入稳定表达rtTA的Saos-2细胞中。经过hygromycin的抗性筛选,挑出并扩增表达Xaf1的细胞株。在8例实验组中加入doxycycline,和不加doxycycline的8例对照组比较,重复3次实验用免疫印迹法和免疫荧光显微镜检测doxycycline对Xaf1表达的调控。Xaf1诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示。【结果】在30个抗hygromycin的细胞株中,免疫印迹法筛选出5个明显由doxycycline调控诱导表达Xaf1的细胞株,免疫荧光显微镜检测显示doxycycline诱导Xaf1表达于细胞核内。流式细胞检测Xaf1于8h开始诱导Saos细胞凋亡,凋亡率最高约20%,而且不影响细胞周期。【结论】Xaf1-Saos诱导细胞株是研究Xaf1调节肿瘤细胞凋亡机制的良好细胞模型;Xaf1是一种核蛋白,能独立诱导肿瘤细胞凋亡。

XAF1增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡的敏感性

背景：肿瘤坏死因子（TNF）相关凋亡诱导配体（TRAIL）可特异性诱导肿瘤细胞凋亡，但部分肿瘤细胞对TRAIL不敏感甚至耐药。目的：探讨X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）是否可增加TRAIL诱导的肝癌细胞株凋亡的敏感性。方法：重组人TRAIL（rhTRAIL）因子分别加入3株肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和Bel-7404中培养，联合或不联合相同感染复数（MOI）的重组腺病毒Ad5／F35-XAF1和对照空病毒Ad5／F35-Null。作用48h后，以MTT检测细胞活力，以AnnexinV—FITC／PI法检测细胞凋亡率。结果：随着TRAIL浓度的增加，3株肝癌细胞株的细胞活力均不同程度降低。TRAIL与Ad5／F35-XAFI联合作用后，其细胞活力显著低于单独TRAIL组，而Ad5／F35-Null组细胞活力与单独TRAIL组无明显差异。与空白对照组和Ad5／F35-Null组相比．TRAIL组和Ad5／F35-XAF1组3株肝癌细胞株的凋亡率均显著增加。TRAIL与Ad5／F35-XAF1联合作用后．细胞凋亡率显著高于Ad5／F35-XAF1组或TRAIL组。结论：XAF1可明显增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡的敏感性．两者联合应用对诱导不同肝癌细胞凋亡具有协同作用。

XAF1简介及其与肿瘤关系的研究现状

XIAP相关因子1(XAF1)是一个新近发现的通过与XIAP直接结合拮抗其抗凋亡作用的蛋白因子。XAF1在多种肿瘤细胞和组织中存在低表达或表达缺失。XAF1的基因沉默与其启动子高甲基化明显相关。XAF1过度表达可诱导凋亡,抑制肿瘤生长。因此,XAF1是一个新的肿瘤抑制基因,有可能成为肿瘤治疗的新靶向基因。

XAF1蛋白在人肝癌组织中的表达及术后复发中的作用研究

目的 XIAP相关因子1(XIAP-Associated Factor 1,XAF1)可与XIAP直接结合并拮抗其抗凋亡作用,本文研究了XAF1在人肝细胞癌组织中的表达,并探讨了其在肝癌患者预测复发中的价值。方法采用免疫组化法检测38例HCC患者肝癌组织中XAF1蛋白的表达,并分析其与术后复发的关系。结果 XAF1在人肝癌组织中表达免疫组化实验结果提示,XAF1在人肝癌组织中的表达阳性率为36.84%(14/38),在癌旁正常组织中的表达阳性率为100%(38/38),两者差异有统计学意义(P<0.05)。24例XAF1低表达患者中,XAF1表达水平与PVTT(P=0.012)、AFP高水平(P=0.016),肿瘤大小(P=0.037)有关;Log-rank检验结果显示,XAF1低表达患者的术后1年无瘤生存率显著低于XAF1正常表达患者(P<0.05),是影响HCC术后1年生存率的因素之一。结论 XAF1在人体肝癌组织中表达水平低于癌旁正常组织,这可能是影响肝癌术后复发的一个潜在危险因素。

性连锁凋亡抑制蛋白及其拮抗蛋白在急性白血病中的表达及意义

为了研究急性白血病(AL)性连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitorofapoptosisproteins,XIAP)和XIAP相关因子1(XIAP-associatedfactor1,XAF1)的表达及其临床意义,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测116例AL患者和17名正常人骨髓单个核细胞中XIAP、XAF1、Smac和HtrA2mRNA的表达,并分析其与临床治疗效果的关系。结果表明初治AL患者XIAPmRNA表达水平(0.990±0.337)明显高于正常对照(0.395±0.148)(P<0·01);初治AL患者XAF1mRNA阳性率及表达水平(56.3%,0.246±0.267)明显低于正常对照(100%,0.964±0.387)(P<0.01);69例初治AL患者中高表达XIAP患者完全缓解率明显低于低表达患者(P<0.01);XAF1阳性表达患者完全缓解率明显高于阴性表达患者(P<0.01)。结论XIAP在AL中异常高表达,XAF1在AL中异常低表达,XIAP高表达及XAF1低表达或阴性可能是AL患者不良预后的指标。

XIAP和XAF1在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的分析子宫肌瘤组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和XIAP相关因子1(XAF1)表达情况,并探讨其临床意义。方法选取该院2015年6月—2018年6月期间收治的因子宫肌瘤行子宫次全切除手术或子宫全切除手术患者118例作为研究组,另选取同期133例因宫颈CINⅢ级行子宫切除术的患者作为对照组。采用免疫组化法测定各子宫组织中XIAP和XAF1表达水平,分析二者表达水平与子宫肌瘤患者临床病理特征的关系。采用多因素Logistic回归分析子宫肌瘤患病的危险因素。结果研究组XIAP阳性表达率为87.29%(103/118),显著高于对照组的37.59%(P<0.05),XAF1阳性表达率为48.31%(57/118),显著低于对照组的87.97%(P<0.05),XIAP和XAF1在子宫肌瘤组织中表达水平与患者肌瘤大小、绝经情况相关(P<0.05),Spearman分析结果表明,XIAP表达水平与XAF1表达水平呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,年龄(≥35岁)、有妇科病史、有流产史、长期使用激素类药物、有遗传病史、XIAP高表达及XAF1低表达是影响子宫肌瘤发生的危险因素(P<0.05)。结论子宫肌瘤组织中XIAP表达水平显著升高,XAF1表达水平显著降低,二者均与子宫肌瘤大小、绝经情况相关,是子宫肌瘤发生的危险因素之一,可能在子宫肌瘤早期预防中发挥一定作用。

XAF1、PI3K蛋白在OSC组织中的表达及与患者病理学特征的关系

目的探讨XIAP相关因子-1(XAF1)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)蛋白在浆液性卵巢癌(OSC)组织中的表达及其临床意义,为临床上OSC的免疫靶向治疗或者生物学治疗提供理论基础。方法选取2016年4月-2017年5月湖南省妇幼保健院病理科收集的60例OSC患者病理组织(OSC组)、60例卵巢浆液性囊腺瘤组织(OSA组)、正常卵巢上皮组织60例(对照组),检测并比较3组标本中的XAF1、PI3K蛋白表达,并分析XAF1蛋白、PI3K蛋白与病理学分化、TNM分期、淋巴结转移的关系。结果OSC组的XAF1蛋白、PI3K蛋白阳性表达率43.33%、73.33%,OSA组分别为81.67%、11.67%,对照组分别为98.33%、3.33%,3组间XAF1蛋白、PI3K蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期+Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的OSC患者的XAF1蛋白阳性表达率均显著的低于Ⅰ期+Ⅱ期、高+中分化、未发生淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的OSC患者的PI3K蛋白阳性表达率均显著高于Ⅰ期+Ⅱ期、高+中分化、未发生淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论OSC组织中XAF1蛋白表达下调、PI3K蛋白表达上调,并且与患者肿瘤的分期、分化程度和是否发生淋巴结转移具有一定的相关性。