电穿孔法介导质粒DNA转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′菌株的实验研究

目的探讨电穿孔法介导质粒DNA转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′的最佳条件,提高其转化效率。方法将pCMV-Scrip质粒转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′菌株,观察不同的电转化条件对转化效率的影响。结果电场强度、脉冲时间、电击缓冲液的离子强度、细菌生长状态、感受态细胞保存时间、质粒DNA浓度对转化效率均有不同程度的影响;在电压2.0kV,电阻200Ω,电容25μF,脉冲时间4.3ms和低离子强度电击缓冲液的条件下转化,能获得较高的转化率。结论优化电穿孔条件能提高转化效率。

XL1-blue菌株电穿孔转化方案的条件优化

目的：优化大肠杆菌ＸＬ１－ｂｌｕｅ菌株的电穿孔转化条件。方法：采用不同的条件组合转化大肠杆菌ＸＬ１－ｂｌｕｅ菌株，对转化条件进行优化。结果与讨论：用电穿孔方案转化大肠杆菌ＸＬ１－ｂｌｕｅ菌株，可得到明显高于其他转化方法的转化效率。外加电场强度和作用时间是决定转化效率的关键因素，其间存在一定的互补关系，转化效率和外源基因浓度之间呈线性关系，并与细菌浓度密切相关。