重组诱导性质粒Egr1-XPO4的构建及其与5-FU联合对肝癌细胞SK-Hep1的协同抑制作用

目的:构建重组诱导性质粒Egr1-XPO4,探讨其与5-FU联合对肝癌细胞SK-Hep1的协同抑制作用。方法:将XPO4基因插入带诱导性启动子Egr1的质粒载体中,构建Egr1-XPO4重组质粒。将Egr1-XPO4质粒转染肝癌细胞SK-Hep1并经化疗药物5-FU诱导,采用Western blotting检测转染细胞中XPO4蛋白表达水平,CCK法检测转染诱导后SK-Hep1细胞的增殖水平,Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测SK-Hep1细胞凋亡情况。动物实验观察Egr1-XPO4质粒联合5-FU对裸鼠移植瘤的治疗效果。结果:成功构建携XPO4基因和启动子Egr1的重组诱导性质粒Egr1-XPO4,重组质粒转染SK-Hep1细胞并经5-FU诱导后,细胞中XPO4蛋白表达量明显增加,且与5-FU的质量浓度明显依赖。Egr1-XPO4转染联合5-FU诱导对SK-Hep1细胞增殖抑制明显强于单纯转染或5-FU诱导(P<0.05),同时导致SK-Hep1细胞的早期凋亡率显著高于单纯转染或诱导(P<0.05)。以Egr1-XPO4质粒联合5-FU治疗后,裸鼠肝癌移植瘤的体积明显小于Egr1-XPO4或5-FU单独治疗(P<0.05)。结论:重组诱导性质粒Egr1-XPO4联合5-FU对肝癌细胞SK-Hep1产生协同抑制作用。