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Pichia stipitis木糖醇脱氢酶基因XYL2在酿酒酵母中的表达 被引量:5
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作者 陈叶福 王正祥 +1 位作者 方慧英 诸葛健 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2003年第2期26-29,共4页
通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL2.通过电转化方法将pYX-XYL2转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303... 通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL2.通过电转化方法将pYX-XYL2转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303-1A中,酶活测定表明在酿酒酵母中树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶基因XYL2得到活性表达,酿酒酵母转化子粗酶液中木糖醇脱氢酶比活为每毫克蛋白0.6 U左右,约为供体菌的2.4倍.与基因供体菌不同,木糖醇脱氢酶基因在酿酒酵母中表达不需木糖诱导,为组成型表达. 展开更多
关键词 树干毕赤氏酵母 木糖醇脱氢酶基因xyl2 酿酒酵母 基因表达
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细菌纤维素生产过程中Acetobacter xylinum NUST4.2的细胞浓度测定方法研究
2
作者 殷智超 周浩 +3 位作者 徐海东 刘林枝 刘广梅 孙东平 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第10期39-41,共3页
讨论了比浊法和MTT比色法2种细胞浓度测定方法在Acetobacter xylinum NUST4.2发酵生产细菌纤维素过程中的应用。结果显示,比浊法可以很好的应用在总菌浓度的测量上,而MMT比色法测游离活菌浓度时较适合,但是仍然会受产物影响不能很好的... 讨论了比浊法和MTT比色法2种细胞浓度测定方法在Acetobacter xylinum NUST4.2发酵生产细菌纤维素过程中的应用。结果显示,比浊法可以很好的应用在总菌浓度的测量上,而MMT比色法测游离活菌浓度时较适合,但是仍然会受产物影响不能很好的反映发酵液总的活菌浓度。 展开更多
关键词 ACETOBACTER xylinum NUST4.2 细胞浓度测定 MTT比色法 比浊法
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基于XYLS的TGPSR路由协议 被引量:1
3
作者 马雯娟 张建军 尉刚强 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2010年第10期105-108,共4页
如果目的节点的位置信息较准确,GPSR路由协议可以高效地发送数据包到目的节点。目的节点的位置信息不准确时,则会导致数据包的严重丢失。针对这个问题,提出了TGPSR(Two-hop Greedy Perimeter Stateless Routing)路由协议:每个节点维持... 如果目的节点的位置信息较准确,GPSR路由协议可以高效地发送数据包到目的节点。目的节点的位置信息不准确时,则会导致数据包的严重丢失。针对这个问题,提出了TGPSR(Two-hop Greedy Perimeter Stateless Routing)路由协议:每个节点维持两跳的邻居节点列表,显著增加了对目的节点位置信息的容忍度,在位置信息不够准确的情况下也可以把数据包发送到目的节点。基于XYLS(Column-Ron-Location Service)的TGPSR协议利用XYLS位置服务协议负载较小、可扩展性良好的特点将更多的带宽用于数据传输,进一步提高协议的性能。 展开更多
关键词 贪婪边界无状态路由 基于XY轴方向的位置服务协议 两跳贪婪边界转发路由协议 带宽 负载 可扩展性
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Construction of a recombinant yeast strain converting xylose and glucose to ethanol
4
作者 Shen TIAN Jinxin ZANG +4 位作者 Yaping PAN Jikai LIU Zhenhong YUAN Yongjie YAN Xiushan YANG 《Frontiers in Biology》 CSCD 2008年第2期165-169,共5页
Candida shehatae gene xyl1 and Pichia stipitis gene xyl2,encoding xylose reductase(XR)and xylitol dehydrogenase(XD)respectively,were amplified by PCR.The genes xyl1 and xyl2 were placed under the control of promoter G... Candida shehatae gene xyl1 and Pichia stipitis gene xyl2,encoding xylose reductase(XR)and xylitol dehydrogenase(XD)respectively,were amplified by PCR.The genes xyl1 and xyl2 were placed under the control of promoter GAL in vector pYES2 to construct the recombinant expression vector pYES2-P12.Subsequently the vector pYES2-P12 was transformed into S.cerevisiae YS58 by LiAc to produce the recombinant yeast YS58-12.The alcoholic ferment indicated that the recombinant yeast YS58-12 could convert xylose to ethanol with the xylose consumption rate of 81.3%. 展开更多
关键词 recombinant Saccaromyces cerevisiae xyl1 xyl2 xylOSE GLUCOSE ETHANOL
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xyl-d二型乙醇脱氢酶(SADH)G198R突变体的研究 被引量:1
5
作者 韩俊 刘志斌 +1 位作者 马诗淳 杨毅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期187-192,共6页
本研究通过设计简并引物及文献参考,PCR克隆得到嗜热厌氧菌菌株xyl-d的SADH,并利用定点诱变技术将该酶的198位苷氨酸(Gly)突变为精氨酸(Arg).将野生型和突变基因连接到原核表达载体pET28a,IPTG诱导表达,再经镍柱纯化,然后比较了两个蛋... 本研究通过设计简并引物及文献参考,PCR克隆得到嗜热厌氧菌菌株xyl-d的SADH,并利用定点诱变技术将该酶的198位苷氨酸(Gly)突变为精氨酸(Arg).将野生型和突变基因连接到原核表达载体pET28a,IPTG诱导表达,再经镍柱纯化,然后比较了两个蛋白分别以NAD/NADH,NADP/NADPH为辅因子、异丙醇或异丁醛为底物、55℃条件下的酶活.发现突变后蛋白的总体催化活性相对于野生型有所下降,其中突变蛋白对NAD/NADH的亲和性分别下降了约8倍和6倍,而且对NADPH的亲和性下降也非常明显,但对NADP的亲和性变化却不大. 展开更多
关键词 SADH PCR定点诱变技术 xyl-d
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硫酸化木聚糖的制备及其体外益生菌增殖作用研究 被引量:1
6
作者 李霞 张绮颖 +3 位作者 关媛 李静 陈海珊 李丽芬 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第13期134-140,共7页
本研究旨在确定硫酸化木聚糖对益生菌生长的影响,根据氨基磺酸-N,N-二甲基甲酰胺法对木聚糖(xylan,Xyl)进行化学改性,产生硫酸化木聚糖(sulfated xylan,SXY)。采用傅里叶红外光谱、扫描电子显微镜和刚果红实验对SXY进行结构表征,利用德... 本研究旨在确定硫酸化木聚糖对益生菌生长的影响,根据氨基磺酸-N,N-二甲基甲酰胺法对木聚糖(xylan,Xyl)进行化学改性,产生硫酸化木聚糖(sulfated xylan,SXY)。采用傅里叶红外光谱、扫描电子显微镜和刚果红实验对SXY进行结构表征,利用德氏乳杆菌保加利亚亚种GIM1.155、植物乳杆菌GIM1.191、短乳杆菌GIM1.773和嗜热链球菌GIM1.540共4种肠道益生菌对其体外增殖作用进行研究。结果表明:红外光谱显示SXY在1243、1052和894 cm^(-1)处分别出现由S=O伸缩振动、C—O拉伸和C—O—SO_(3)基团对称C—O—S伸缩振动引起的特征吸收峰。扫描电镜显示得到表面结构平滑度增加的SXY。刚果红实验显示SXY具有三螺旋结构。采用BaCl_(2)-明胶比浊法测得SXY取代度为0.341。体外实验结果显示SXY对益生菌体外增殖最佳浓度为2.0%,培养10 h后观察到快速生长和增殖增加。所获结果表明,SXY对益生菌的生长有促进作用,是维持肠道健康的益生元替代物。 展开更多
关键词 木聚糖 硫酸化 益生菌 体外增殖 益生元
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长茎葡萄蕨藻中β-1,3-木聚糖的提取工艺优化及单糖组成分析
7
作者 刘倩 晋文慧 +4 位作者 矫浩田 谢全灵 张怡评 洪专 赵元晖 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第16期210-217,共8页
为了优化β-1,3-木聚糖的提取工艺并分析其单糖组成,试验对常见经济藻类进行筛选,以长茎葡萄蕨藻为主要原料,采用碱提方法,以提取时间、料液比和NaOH浓度为考察因素,在单因素优化的基础上设计三因素三水平正交试验,研究粗木聚糖的最优... 为了优化β-1,3-木聚糖的提取工艺并分析其单糖组成,试验对常见经济藻类进行筛选,以长茎葡萄蕨藻为主要原料,采用碱提方法,以提取时间、料液比和NaOH浓度为考察因素,在单因素优化的基础上设计三因素三水平正交试验,研究粗木聚糖的最优提取条件,并采用特异性酶解方法分析粗木聚糖的单糖组成成分。结果表明,各因素对粗木聚糖提取率影响顺序依次为:提取时间>料液比>NaOH浓度。最佳提取工艺为:提取时间3 h、NaOH浓度为2.5 mol·L^(-1)、料液比1:100 g·mL^(-1),粗木聚糖得率为28.1%±0.6%。采用薄层色谱法对酶解产物进行测定,表明从长茎葡萄蕨藻中提取的粗木聚糖为β-1,3-木聚糖,并明确其单糖组分为β-1,3-木糖。 展开更多
关键词 海藻 长茎葡萄蕨藻 β-1 3-木聚糖 碱提取 提取工艺 β-1 3-木聚糖酶(xyl3088)
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稳定代谢葡萄糖和木糖产乙醇的重组酿酒酵母工程菌初步构建 被引量:7
8
作者 杨忞 张金鑫 田沈 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期258-261,共4页
分别克隆了休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)的木糖还原酶基因XYL1和热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖醇脱氢酶基因XYL2,构建出重组表达质粒pACT2-xyl1和pDR195-xyl2,并使其分别转化酿酒酵母受体细胞.酶活测定结果显示,转化子... 分别克隆了休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)的木糖还原酶基因XYL1和热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖醇脱氢酶基因XYL2,构建出重组表达质粒pACT2-xyl1和pDR195-xyl2,并使其分别转化酿酒酵母受体细胞.酶活测定结果显示,转化子中木糖还原酶和木糖醇脱氢酶均在宿主菌中得到活性表达.并将这两个基因连同各自重组表达质粒上的表达元件进行了克隆,进而构建出重组酵母染色体整合质粒YIp5-kanR-x12,以期今后通过同源重组的原理将上述基因整合到发酵性能良好的酿酒酵母基因组中,得到稳定代谢葡萄糖和木糖产乙醇的重组酵母菌株. 展开更多
关键词 xyl1 xyl2 重组酿酒酵母 木糖 乙醇
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绿汁发酵液和不同水平木聚糖酶复合对灵芝菌糟发酵饲料发酵过程和品质的影响 被引量:1
9
作者 陈国富 张文昌 +3 位作者 朱小清 张诗 林芝 庄益芬 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期16-20,共5页
为了研究绿汁发酵液和不同水平木聚糖酶(XYL)复合对灵芝菌糟发酵饲料品质和发酵过程的影响,给利用菌糟大规模生产优质发酵饲料提供理论依据,试验分为4个处理组,即添加纯化水的对照组(CON组)和在灵芝菌糟中添加复合添加剂的MIX组,分别为M... 为了研究绿汁发酵液和不同水平木聚糖酶(XYL)复合对灵芝菌糟发酵饲料品质和发酵过程的影响,给利用菌糟大规模生产优质发酵饲料提供理论依据,试验分为4个处理组,即添加纯化水的对照组(CON组)和在灵芝菌糟中添加复合添加剂的MIX组,分别为MIX1组[2 m L/kg绿汁发酵液(FGJ)+1 250 U/kg XYL]、MIX2组(2 m L/kg FGJ+2 500 U/kg XYL)和MIX3组(2 m L/kg FGJ+5 000 U/kg XYL),每个处理设3个重复,常温下贮存,分别在发酵第7,14,30,60天开封,测定青贮的发酵品质和化学成分。结果表明:在4个发酵时间,3个MIX组都有显著的添加效果。伴随着发酵时间增加,发酵饲料的乳酸(LA)呈增加的趋势,pH值、干物质回收率(DMR)、可溶性碳水化合物(WSC)、中性洗涤纤维(NDF)以及半纤维素(HC)呈下降的趋势,气体损失率(GLR)、氨态氮(AN)显著增加(P<0.05)。说明FGJ和XYL复合添加能加快乳酸发酵,使发酵过程提前结束。 展开更多
关键词 灵芝菌糟 绿汁发酵液(FGJ) 木聚糖酶(xyl) 发酵品质 发酵过程
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XY110型X线机控制电路工作原理及检修 被引量:2
10
作者 毛竹 陈勇 《医疗卫生装备》 CAS 2004年第6期62-62,共1页
关键词 xyl lO型X线机 控制电路 工作原理 变压器
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极耐热双功能酶的表达纯化及性质研究 被引量:1
11
作者 王锐丽 王玉 薛业敏 《湖北农业科学》 2016年第7期1843-1847,共5页
将含海栖热袍菌(Thermoga maritima)β-木糖苷酶(Xyl)基因的重组质粒p ET-28a-xyl导入大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3)-RIL中,经诱导实现高效表达,经热处理和Ni2+亲和层析纯化达到电泳均一,并对纯化的重组酶Xyl的酶学性质进行研究... 将含海栖热袍菌(Thermoga maritima)β-木糖苷酶(Xyl)基因的重组质粒p ET-28a-xyl导入大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3)-RIL中,经诱导实现高效表达,经热处理和Ni2+亲和层析纯化达到电泳均一,并对纯化的重组酶Xyl的酶学性质进行研究。结果表明,重组Xyl同时具有木糖苷酶和阿拉伯糖酶活性,即为双功能酶。以对硝基苯酚-ɑ-阿拉伯呋喃糖苷(p NPAF)作为底物,重组酶Xyl的最适作用温度和最适p H分别为80~90℃和5.8,90℃的半衰期为1.0 h,在pH 7.0~7.8区间重组酶保持较高的稳定性。金属离子Mn2+对重组Xyl的双活性有促进作用,而Cu2+和SDS对酶的抑制作用最明显。重组Xyl能将低聚木糖中的木二糖和木三糖彻底分解为木糖。 展开更多
关键词 极耐热 双功能酶 海栖热袍菌(Thermoga maritima)β-木糖苷酶(xyl) 纯化 性质
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微波处理对玉米芯酶法制备低聚木糖的影响 被引量:9
12
作者 丁长河 宋娜 +1 位作者 李里特 郑春贤 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期5-8,12,共5页
用酸法、碱法、双氧水法处理玉米芯,比较了经微波处理与不经微波处理的酶解液的主要成分、提取率和还原糖的含量.结果表明:不经微波处理直接酶解其木聚糖提取率和还原糖含量最高的是双氧水法处理;经微波处理后酶解其木聚糖提取率和还原... 用酸法、碱法、双氧水法处理玉米芯,比较了经微波处理与不经微波处理的酶解液的主要成分、提取率和还原糖的含量.结果表明:不经微波处理直接酶解其木聚糖提取率和还原糖含量最高的是双氧水法处理;经微波处理后酶解其木聚糖提取率和还原糖含量最高的是碱法处理;TLC结果显示玉米芯酶解液的主要成分为木二糖. 展开更多
关键词 微波处理 预处理 玉米芯 低聚木糖
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灌浆期小麦籽粒水溶性戊聚糖含量、粘度的动态变化及其相互关系研究 被引量:3
13
作者 李春喜 高旺盛 +3 位作者 姜丽娜 刘玲 邵云 明红 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期38-41,共4页
选取豫麦50号、豫麦34号和河北8901三个河南省主栽小麦品种,研究了灌浆期小麦籽粒水溶性戊聚糖(WSP)含量、水溶性戊聚糖阿拉伯糖和木糖比值(Ara/Xyl)以及籽粒提取液粘度的动态变化,并分析了小麦籽粒WSP与籽粒提取液粘度之间的关... 选取豫麦50号、豫麦34号和河北8901三个河南省主栽小麦品种,研究了灌浆期小麦籽粒水溶性戊聚糖(WSP)含量、水溶性戊聚糖阿拉伯糖和木糖比值(Ara/Xyl)以及籽粒提取液粘度的动态变化,并分析了小麦籽粒WSP与籽粒提取液粘度之间的关系。结果表明,在籽粒发育过程中,WSP含量变幅为1.51%~5.91%,呈现先降后略升的变化趋势。Ara/Xyl比值和籽粒提取液粘度均表现先升后降的变化趋势。相关分析表明,籽粒提取液粘度与水溶性戊聚糖含量呈负相关关系,与Ara/Xyl比值呈正相关关系。在供试3个品种中,豫麦34号的粘度值和Ara/Xyl比值均高于其他2个品种。 展开更多
关键词 籽粒 水溶性戊聚糖含量 阿拉伯糖/木糖比值 粘度 相关关系
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荷叶山楂酸奶的配方研究 被引量:5
14
作者 孙敏 《安徽农业科学》 CAS 2017年第35期75-77,87,共4页
[目的]筛选出品质较好的荷叶山楂酸奶配方.[方法]在酸奶中加入荷叶汁和山楂汁,开发兼具荷叶山楂保健功能的酸奶,通过单因素和正交试验确定酸奶的最优配方.[结果]试验得出荷叶山楂酸奶最佳配方为荷叶汁添加量70 m L/L,山楂汁添加量60 m L... [目的]筛选出品质较好的荷叶山楂酸奶配方.[方法]在酸奶中加入荷叶汁和山楂汁,开发兼具荷叶山楂保健功能的酸奶,通过单因素和正交试验确定酸奶的最优配方.[结果]试验得出荷叶山楂酸奶最佳配方为荷叶汁添加量70 m L/L,山楂汁添加量60 m L/L,接种量4%,木糖醇添加量100 g/L,此时的酸奶感官品质最佳.[结论]经测定,酸奶的各项理化指标和微生物指标符合国家标准,可为保健酸奶的开发提供新思路. 展开更多
关键词 荷叶 山楂 木糖醇 正交试验
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棒状杆菌表达载体pJL23的构建
15
作者 陆军 唐炯 +2 位作者 张文波 严维耀 郑兆鑫 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期292-296,共5页
质粒 pGA46 4带有从谷氨酸棒杆菌染色体上分离到的有启动功能的片段 ,用PCR技术从 pGA46 4中扩增了该片段的关键区域 :启动子PGL.将该启动子经EcoRⅠ BamHⅠ双酶切后 ,与大肠杆菌质粒 pJL0 1的EcoRⅠ BamHⅠ大片段连接 ,再接入XylEg... 质粒 pGA46 4带有从谷氨酸棒杆菌染色体上分离到的有启动功能的片段 ,用PCR技术从 pGA46 4中扩增了该片段的关键区域 :启动子PGL.将该启动子经EcoRⅠ BamHⅠ双酶切后 ,与大肠杆菌质粒 pJL0 1的EcoRⅠ BamHⅠ大片段连接 ,再接入XylEgene和棒状杆菌质粒pXZ 10 142 ,构建成棒状杆菌 大肠杆菌穿梭表达载体 pJL2 3.用邻苯二酚双加氧酶基因检测表明 ,该表达载体可在棒状杆菌中高效地表达外源基因 . 展开更多
关键词 启动子 pXZ10142 pJL23 棒状杆菌 克隆表达载体
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转录因子MtlR介导嗜热厌氧杆菌SCUT27木糖代谢途径的激活
16
作者 陈莉莉 屈春云 +1 位作者 傅宏鑫 王菊芳 《生物技术》 CAS 2021年第4期321-328,共8页
[目的]探究嗜热厌氧杆菌Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27(SCUT27)木糖代谢途径的调控机制,强化葡萄糖和木糖共利用。[方法]通过q PCR、RT-PCR对木糖代谢相关基因xyl A、xyl B和xyl T的共转录及功能进行验证,然后利用基因敲除... [目的]探究嗜热厌氧杆菌Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27(SCUT27)木糖代谢途径的调控机制,强化葡萄糖和木糖共利用。[方法]通过q PCR、RT-PCR对木糖代谢相关基因xyl A、xyl B和xyl T的共转录及功能进行验证,然后利用基因敲除技术构建rok、lac I和mtlR的敲除菌,以探究其对木糖代谢的调控,最后构建mtlR的过表达菌株,强化葡萄糖和木糖的共利用。[结果]RT-PCR结果显示xyl A、xyl B和xyl T共转录;敲除xyl AB后,木糖利用能力下降83.72%;当敲除rok和lac I后,木糖利用能力变化不显著;敲除mtlR后,木糖利用能力下降67.56%,xyl AB和xyl T的转录水平分别下降约39.67%和86.93%。过表达mtlR后,xyl AB的转录水平提高约44.75%,木糖利用能力提高25.71%。[结论]转录因子MtlR是SCUT27木糖代谢的正调控因子,过表达mtlR可强化SCUT27的葡萄糖和木糖共利用。 展开更多
关键词 Thermoanaerobacterium aotearoense 木糖代谢 木糖操纵子 转录因子MtlR
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Demand for Benzole Increases Rapidly
17
作者 Li Yuanjie 《China Chemical Reporter》 2007年第23期17-18,共2页
Stable output increaseThe rapid development of the iron andsteel industry in China has promoteddramatic growth in the output of cokein recent years.But with the impact ofmacro economic controls and environ-mental prot... Stable output increaseThe rapid development of the iron andsteel industry in China has promoteddramatic growth in the output of cokein recent years.But with the impact ofmacro economic controls and environ-mental protection,the 2006 output ofcoke was 281 million tons,an increaseof 20.6% over 2005-growth had sloweddown.Hebei province,Inner Mongolia, 展开更多
关键词 Hebei BENZENE environ thousand SHANDONG SHANXI xyl
全文增补中
PetroChina Selected UOP Technology for New Complex near Chengdu
18
《China Chemical Reporter》 2008年第21期8-8,共4页
On July 11th,UOP LLC,a Honeywell (NYSE:HON) company,an-nounced that PetroChina Sichuan Petrochemical Co.,Ltd.,a subsidiary of PetroChina Company Limited,has selected UOP to supply technology,basic engineering services... On July 11th,UOP LLC,a Honeywell (NYSE:HON) company,an-nounced that PetroChina Sichuan Petrochemical Co.,Ltd.,a subsidiary of PetroChina Company Limited,has selected UOP to supply technology,basic engineering services and equipment for a new inte-grated refining and petrochemicals complex to be installed at its 展开更多
关键词 Chengdu SUBSIDIARY FACILITY REFINING installed xyl
全文增补中
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