基于免疫应激研究炮制对苍耳子致特异质肝损伤影响

目的探讨基于脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的免疫应激模型研究苍耳子(Xanthium sibiricum Patr.)经炮制后对特异性体质肝损伤的影响并初步探索其机制。方法采用SD大鼠尾静脉注射LPS方法构建免疫应激模型,实验分为正常组(Control)、生品组(raw products,RP)、炒品组(pan-fried products,FP)、酒品组(wine products,WP)、LPS组、生品低剂量联用LPS给药组(RPL+LPS)、生品高剂量联用LPS给药组(RPH+LPS)、炒品低剂量联用LPS给药组(FPL+LPS)、炒品高剂量联用LPS给药组(FPH+LPS)、酒品低剂量联用LPS给药组(WPL+LPS)、酒品高剂量联用LPS给药组(WPH+LPS)。检测分析血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(Aspartat aminotransferase,AST)等肝功能指标、苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色和原位末端转移酶标注技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)染色检测肝脏病理变化、血常规指标、血清细胞因子、炎症因子和氧化应激指标,对比考察苍耳子炮制前后单用或联合LPS的毒性差异。结果结果表明,苍耳子炒品、酒炙品能明显降低肝损伤大鼠血浆中ALT、AST等水平,减少大鼠肝组织炎症细胞浸润及肝细胞的凋亡,提示苍耳子炮制品具有抑制肝损伤的作用,而通过聚类图结果分析,苍耳子生品能导致特异性肝损伤;炒品苍耳子剂量低时对肝脏损伤小,剂量增加损伤加重,而酒品苍耳子对肝脏损伤较小。此外,苍耳子炒品、酒品可能通过降低炎症因子水平和降低白细胞、中性粒细胞、单核细胞的数目从而提高机体免疫状态、增强体内的抗氧化能力,恢复体内的氧化平衡,达到减轻特异质肝损伤的效果。结论机体在免疫应激的基础上,苍耳子生品能导致特异性肝损伤,经炒制、酒炙后的苍耳子减轻特异质性肝损伤,相比炒法而言,酒炙法减毒效果更为显著。

基于非靶向代谢组学的苍耳不同药用部位代谢产物特征分析

目的:分析苍耳不同药用部位之间代谢产物的差异。方法:采用超高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱法(UPLC-ESI-MS)对苍耳根、茎和叶进行测定;用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行数据处理;通过对代谢物精确相对分子质量及碎片信息的确认,结合软件数据库搜索鉴定代谢物;对差异代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:苍耳的根、茎和叶的化学组成得到有效区分,从3个部位中共鉴定出5902个代谢物,筛选出64个差异代谢物,主要富集在植物次生代谢物质的生物合成,癌症中的中央碳代谢,鸟氨酸、赖氨酸和烟酸生物合成生物碱等通路。结论:从苍耳根、茎和叶代谢产物差异的角度揭示不同部位药性、药效差异的物质基础,为苍耳类中药资源的最大化综合利用提供参考。

防风苍耳子水煎剂对小鼠免疫功能的影响

本文用ＥＬＩＳＡ法研究了防风、苍耳子水煎剂对ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ的调节作用。结果表明：防风和苍耳子水煎剂均能显著抑制ＤＮＰ－ＢＳＡ致敏小鼠的ＩｇＥ产生（Ｐ＜００５），延迟和减轻卵蛋白致敏豚鼠的Ｉ型超敏反应。其中防风对ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体的产生、以及细胞免疫功能都有显著的增强作用（Ｐ＜００５和＜００１），苍耳子对体液免疫作用不明显（Ｐ＞００５），但对细胞免疫却有抑制作用（Ｐ＜００１和＜００５）。

响应面法优化超声波提取苍耳子油工艺

采用响应面优化超声波提取苍耳子中苍耳子油的提取工艺。优选溶剂后,在单因素试验基础上,选择提取过程中的提取时间、液料比和超声波功率为随机因子,进行三因素三水平Box-Behnken中心组合设计,采用响应面法分析(RSM)3个因素对苍耳子油提取率的影响。结果表明,超声波法提取苍耳子油的最优条件为:提取溶剂为乙醇,提取时间为26.3min、液料比10.02∶1(mL∶g)、超声波功率309.1W,模型预测苍耳子油提取率理论值可达到9.246%,在最优的条件下进行3次验证试验,苍耳子油的平均得率为9.250%,与理论值的相对误差为0.04%。

不同产地苍耳子红外指纹图谱鉴别

目的:建立苍耳子药材的红外光谱鉴定方法。方法:对不同产地苍耳子药材进行红外光谱指纹鉴别,并进行相似度计算及化学模式识别。结果:获得了10批不同产地苍耳子药材红外指纹图谱,图谱相似度均大于0.96。结论:粉末的红外指纹图谱鉴定法可用于不同产地苍耳子药材的鉴别,相似度的计算结果及化学模式的聚类分析进一步证明了方法的可行性。

超声波法提取苍耳子油

利用超声波法提取苍耳子中的苍耳子油,对不同溶剂、超声时间、料液比、浸泡时间等因素进行研究,并与传统的提取法相比较。结果表明,提取苍耳子油较佳的工艺条件为用乙醇提取,浸泡2 h,超声40 min,每克苍耳子中加入12 mL溶剂。该法提取时间短,提取效率高,并且超声法提取与传统方法提取的苍耳子油的成分无明显差别。

苍耳的研究与应用

通过对苍耳的研究进展及其药用价值、油料用途、生态等几个方面的应用现状进行阐述分析,发现苍耳药用价值很高,能有效调节免疫、抗氧化和抑菌,治疗鼻科等疾病效果突出;苍耳籽仁富含油脂和蛋白质,含人体所必需的不饱和脂肪酸-亚油酸,含量高达65.9%,油酸含量可达20.8%;苍耳粕含蛋白可达58.0%,去毒后可制成饲料。同时,苍耳对Mn、Cu、B、P、Pb等矿物质具有较强的富集能力较强;而且苍耳的自散布和适应能力强,可作为特殊地段的恢复植物,实现治理环境与资源充分利用的双重功效,但由于人们对苍耳的研究与关注较少,还没有充分认识到苍耳的特殊作用,而往往把苍耳当作杂草而除掉,严重丧失了苍耳巨大的应用价值。因而苍耳有待于进一步研究与开发,以实现资源的合理综合利用和可持续发展。

柱前衍生RP-HPLC法测定苍耳子和意大利苍耳子中氨基酸的种类

对苍耳子和意大利苍耳子中游离和水解氨基酸种类及提取液中各氨基酸质量的测定，建立一种柱前衍生 RP-HPLC 法。用50％乙醇作溶剂超声提取苍耳子和意大利苍耳子中的游离氨基酸，用6 mol·L－1 HCl 水解提取出其水解氨基酸，柱前衍生化试剂选用异硫氰酸苯酯（PITC）。测定出苍耳子和意大利苍耳子中含20种氨基酸，且其在0．0391～1．250 mmol·L－1均呈现良好的线性关系（R2均大于0．9993），平均回收率为92．70％～98．44％，相对标准偏差值为0．70％～3．27％。该方法具有良好的灵敏度、准确性、重复性和稳定性，分离出了苍耳子和意大利苍耳子中的20种氨基酸，并计算出其提取质量。

苍耳子化学成分研究

目的:研究苍耳子的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱和制备型高效液相色谱等方法分离,从苍耳子70%乙醇提取物的正丁醇萃取组分中分离得到了4个化合物,并通过NMR和MS等波谱方法确定其化学结构。结果:所分离得到的4个化合物分别为2-methyl-3-buten-2-ol-β-D-apiofuranosyl-(1-6)-β-D-glucopyranoside(1),3-Methyl-3-butenyl-O-β-Dapiofuranosyl-(1-6)-O-β-D-glucopyranoside(2),3-Methyl-2-butenyl-O-β-D-apiofuranosyl-(1-6)-O-β-D-glucopyranoside(3)和everlastoside C(4)。其中所有化合物均为为首次从苍耳子中分离得到。

苍耳叶不同方式提取物的抑菌效果比较

[目的]比较苍耳叶4种提取方式所得提取物对微生物的抑制活性差异。[方法]采用去离子水,5%的盐酸水,无水乙醇和乙醚等不同的提取剂提取苍耳叶成分,采用倍比稀释法进行药液的稀释,考察抑菌活性。[结果]苍耳叶的不同提取方法所得的提取液对各菌种的抑制活性差异较大,各种方式中苍耳叶的酸水提取液具有最小的抑菌浓度。[结论]宜对苍耳叶的酸水提取物作进一步研究。

苍耳提取物对大葱紫斑病原孢子和菌丝的影响

以大葱紫斑病原菌为供试菌,采用菌丝生长速率测定法和病原孢子萌发率测定法,对苍耳(Xanthium sibiricum Patr.ex Widd)提取物的抗菌活性进行研究。结果表明,提取物在50、100 mg/mL的浓度下,大葱紫斑病原孢子萌发率低于50%,对菌丝的抑制率大于60%,对大葱紫斑病原菌具有较强的抑制作用。

苍耳子与伪品小刺蒴麻的鉴别

目的鉴别苍耳子与伪品小刺蒴麻。方法用性状鉴别与显微观察方法对两者进行比较研究。结果两者外观性状与显微特征有差异,易于区别。结论本研究可作为苍耳子与伪品苍耳子小刺蒴麻的鉴别方法。

HS-SPME-GC-MS分析炮制前后苍耳子挥发性成分

目的:分析苍耳子生品及炒制品中挥发性成分的化学成分及相对含量的变化。方法:采用顶空固相微萃取法(HSSPME)结合气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对苍耳子的生品及炒制品挥发性成分进行分析;以峰面积归一化法计算各组分的相对百分含量。结果:从苍耳子生品和炒制品中分别分离鉴定出26种和27种化合物,共有成分19种,分别占挥发性成分总量的68.69%和90.08%,其中生品含量较高的成分有桉叶油醇(15.3%)、樟脑(9.6%)、冰片(6.89%)等,炒制品中成分含量较高的成分有薄荷醇(24.09%)、冰片(18.48%)、桉叶油醇(7.19%)等。结论:炒制品中薄荷醇、冰片等具有治疗鼻炎作用的相对含量较生品有明显提高,采用HS-SPME-GC-MS联用技术分析苍耳子生品及炒制品中挥发性成分及相对含量变化,可以从挥发性成分的变化方面为苍耳子生品及炒制品的功效差异的物质基础奠定一定的理论基础,为其进一步研究和综合利用提供科学依据。

苍耳内生真菌的分离鉴定及抗菌活性研究

从植物苍耳中分离内生真菌,选出8株进行抑菌活性测定,有6株对番茄早疫病菌抑制率大于50%。菌株SC008对5种植物病原菌的抑制率均大于50%。对内生真菌SC008进行形态学观察及ITS序列鉴定,初步判定菌株SC008归属于黑孢霉属(Nigrospora Zim.)。碳氮源实验表明,SC008在以乳糖和蔗糖为碳源及以酵母提取物和牛肉膏为氮源的培养基上生长良好。

苍耳子化学成分及其对腺样体的影响

目的研究苍耳子Xanthium sibiricum Patr.的化学成分及其对腺样体的影响。方法苍耳子90%提取物采用硅胶、Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法检测其对腺样体肥大细胞增殖的影响。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为(9 S,10 R,11 E,13 R)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoic-acid(1)、isopropylidenkirenol(2)、5(S)-5-羟基-1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羟苯基)-3-庚酮(3)、ethylβ-D-xylopyranoside(4)、columbianetin acetate(5)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(6)、8-hydroxy-6-methoxy-3-pentylisocoumarin(7)、diasyringaresinol(8)、secologanoside(9)、十七烷酸(10)、十九烷酸(11)、2-desoxy-4-epi-pulchellin(12)。化合物5、9抑制腺样体肥大细胞增殖的IC_(50)值分别为10.72、42.15 mg/L。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物5、9可抑制腺样体肥大细胞增殖。

滇产苍耳子中重金属含量测定

目的:对云南大理、保山、昆明、文山、昭通、普洱、玉溪、临沧8个地区所产苍耳子中镉、铅、砷、汞的含量进行测定分析。方法:对样品进行硝化,利用原子荧光光谱法测定4种重金属含量。结果:云南8个地区所产苍耳子中重金属含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定的重金属限量标准。对于所测元素线性良好,r≥0.999 2,回收率为100.12%～100.57%,RSD<5%。结论:云南省8个地区的苍耳子皆符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》及2015年版《中华人民共和国药典》,为安全药用中药材。同时为苍耳子的优质分级管理提供基础性依据。

苍耳本草考证和药用文献考实

目的 对苍耳的药用情况进行本草考证及文献考实。方法 通过查阅历代本草文献结合植物资源普查及商品药材使用情况调查。结果 苍耳药用品种自古并不混乱 ,但在名称和原植物形态描述中 ,与石竹科卷耳某些特征一并描述 ,造成了一定的混乱 ;现代文献《中国药典中药彩色图集》中苍耳原植物图片有误应予纠正。结论 苍耳药用基源正品应为苍耳 Xanthium sibiricum。

甘肃陇南产植物苍耳茎叶挥发油成分分析

采用水蒸气蒸馏法提取苍耳挥发油,并用气相质谱联用技术对挥发油的化学成分进行了分析,共分离鉴定出95个化合物,其主要成分为烷类、倍半萜内酯及醛酮类等.

微波辅助提取苍耳子油的研究

利用微波辅助技术提取苍耳子中的苍耳子油,通过对不同溶剂、微波功率、微波作用时间以及料液比对微波辅助提取苍耳子油的影响进行单因素考察,以确定最佳提取工艺。试验结果表明:较佳的工艺条件为用无水乙醇提取,在微波功率为595 W条件下处理12 min,料液比为1∶10。与传统提取方法相比,该法提取时间短、提取效率高、并且提取的苍耳子油与传统方法提取的苍耳子油的成分无明显差异。

不同采收期苍耳草的指纹图谱研究

目的:研究不同采收期苍耳草的指纹图谱,建立稳定、可重复的苍耳草质量控制手段。方法:运用HPLC色谱技术建立不同采收期不同产地苍耳草的指纹图谱。结果:通过比较14批苍耳草和2批苍耳子药材样品HPLC图谱,建立其对照指纹图谱,并以共有模式为参照,通过《中药指纹图谱相似度计算软件》计算,得到色谱指纹图谱模拟图谱及相似度计算结果。除1号、15号和16号与其他批次样品相似度不高外,其他批次相似度较大,但是其主要成分在含量方面存在一定的差异,与药材采自不同采收期有关。结论:本文建立了苍耳草的HPLC指纹图谱,为苍耳草质量标准的建立提供了试验依据。