分泌抗水稻细菌性条斑菌单克隆抗体杂交瘤株的建立及其在种子检验上的应用

本文首次报导了通过硫酸铵沉淀法提取水稻细菌性条斑菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)(以下简称细条菌)的蛋白质,并以它作抗原建立了4个杂交瘤细胞株E_5、E_8、A_5和F_(11),其培养物上清的ELISA效价为1:20～1:160,腹水效价为1:10~6～1:10~7。该4个细胞株所分泌的单克隆抗体(McAb)与58个不同来源的细条菌都呈阳性反应,而对参试的具有一定代表性的其它13个细菌种,均呈阴性反应。试验还表明,4种McAb是针对同一抗原决定簇的,其亲和力大小为:E_8>A_5>E_5>F_(11)。应用McAb进行种子带菌检验也获得成功。

分泌抗水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

水稻细菌性条斑是由水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas campestris pv.oryzi-cola)引起的一种杂交稻重要病害,被列为农业部规定的农业植物检疫对象。但由于缺乏较先进的检疫手段,目前仍主要采用产地检疾法,致使该病的发展越来越烈,因而迫切需要有一种特异性强的诊断试剂,用来作快速检测。为此笔者对水稻细菌性条斑病菌的单克隆抗体进行了研究。

应用单克隆抗体检测水稻细菌性条斑病菌的效果

水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)是我国南方稻区危害水稻的重要病原物之一,为国内植物检疫对象。我国学者谢关林等人曾进行过对该病菌的免疫放射法检测研究,取得较好结果。但由于标记用的同位素价格贵、衰变快,且需要复杂的测定仪器,故推广应用受到了一定限制。笔者等在研制出了针对水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体的基础上,进行了间接酶联免疫吸附法(以下简称“间接ELISA法”)和间接免疫萤光法(以下简称“间接IFA法”)检测水稻种子是否携带细菌性条斑病菌原的研究,以期找出一条简易、有效的检测方法,现已取得较好结果。