水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas campestris pv.Oryzicola Dye)的致病力变异和菌系鉴别

1988-1991年,从福建省内外收集和分离了161个菌株,用针刺接种法,先后在25个水稻品种上进行了病菌致病力的测定.根据从中选择的17个水稻品种对选择的16个菌株所做的试验结果表明,稻条斑病菌菌株间存在明显的致病力差异,而且这种差异是数量性的.1991年,根据125个菌株对选择的4个鉴别品种的侵染反应,将这些菌株划分为致病力强弱不同的4个菌群.0群菌致病力退化;Ⅰ群菌致病力弱;Ⅱ群菌致病力中等;Ⅲ群菌致病力最强.其中Ⅱ和Ⅲ群菌占优势,在福建省34个县市已有分布.

水稻白叶枯病菌的桔抗菌的筛选及其抗菌物质的研究

从稻飞虱（ＮｉｌａｐａｒｖａｔｅｌｕｇｅｎｓＳｔａｌ）肠道中分离、筛选出对水稻白叶枯病菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｏｒｙｚａｅ）有抑制作用的桔抗菌，初步鉴定为芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｐ．）．进一步的分析表明其抗菌物质是一种蛋白质．

家蚕抗菌肽抑制水稻白叶枯病的初步研究

昆虫免疫识别的分子基础长期来不很清楚,但是昆虫在受到微生物侵入时,能够作出应答反应,其血液中的血细胞有识别外源物质的能力,经吞噬作用来攻击这些外源物质。昆虫对细菌感染的免疫反应中出现一个有效的体液杀菌系统。这个系统由一些具广谱杀菌效果的抗菌多肽和抗菌蛋白类物质组成。昆虫的免疫反应的研究已有不少报道,但普遍认为昆虫缺乏淋巴T细胞和免疫球蛋白,因而其免疫系统较为特殊。目前研究得较多的一类抗菌肽,蚕抗菌肽一般由35～40个氨基酸残基组成,对格兰氏阴性和阳性细菌均有明显杀伤作用。在其它一些鳞翅目昆虫以及棕尾别麻蝇(Sarcophaga peregrina)、果蝇(Drosophila melangaster)等昆虫体内也报道有抗菌肽。Lee等在猪的肠中也发现抗菌肽。抗菌肽基因也已分离。各种抗菌肽对不同的细菌都有抑杀作用。

抗稻白叶枯病体细胞突变体筛选操作技术体系及其利用

用对白叶枯病菌敏感的水稻品种的体细胞胚性细胞无性系,经继代培养,作为选择材料;以对数生长阶段的白叶枯病活体病原细菌为选择剂。已获得抗病突变体,其再生植株后代经人工接菌鉴定,具有稳定遗传抗病性。并且,该筛选技术体系具有重演性。从而建立了抗水稻白叶枯病的体细胞离体筛选体系。

水稻白叶枯病菌诱导非寄主植物烟草过敏性反应及其信号物质

用注射接种法测定了水稻白叶枯病菌诱导烟草过敏性反应的能力,发现所有测试菌株在诱导烟草过敏性反应出现时间和组织中的菌量方面都有差异。不同来源和小种的原始菌株都具有诱导能力,转座子Tn5诱变的突变体菌株只有一个突变体 XcoM3105失去了诱导能力.亲本菌株在烟草叶片组织中的种群量迅速下降,细菌被限制在接种区内,突变体菌株在组织中可以繁殖和扩展。测定细菌细胞不同组分的诱导活性,发现脂多糖是诱导烟草过敏性反应的信号物质,诱导活性中心是多糖体组分.亲本菌株和突变体的脂多糖和多糖体表现相同的诱导活性。对这一结果进行了讨论.

水稻中对不亲和白叶枯病菌株专一识别的多肽

经蛋白质双向电泳分析,发现水稻IR26、IR1545及TN1各有一个多肽能与不亲和的白叶枯病菌株产生特异性作用而消失,但与亲和菌株相互不发生作用。成株期抗病品种南粳15在成株期有与不亲和菌株作用的多肽存在,而在苗期则未观察到这一多肽。对全期抗病品种IR26分析表明,它无论在成株期或苗期均出现一个与不亲和菌株专一作用的多肽。经典遗传学分析认为有三个抗白叶枯病基因的DV85,则观察到DV85有两个以上的菌株特异识别多肽。由于这些多肽表现出菌株的专一性及其它表达生理时期均与该品种的田间抗病表型一致,同时多肽的数目也与经典遗传学分析结果类似,推测这些多肽可能是抗病基因的产物。

水稻白叶枯病菌菌落类型及致病力变异研究

在1983～1988年间从182个菲律宾水稻白叶枯病菌菌株和97个中国菌株中获得2万多个单菌落,根据菌落特征(形态,大小,色泽)及在鉴别品种上致病性测定的结果,供试菌株可区分为野生型,突变型和中间型三个类型,野生型代表菌株的原始致病力;突变型不但在菌落特征上有别于野生型,且致病力接近于无毒菌;中间型菌落的特征和致病力均不稳定,多糖体的产生量与病菌菌株的菌落特征及致病力间无明显的规律性可循,突变型菌落的出现频率与致病力有一定关系,但因菌而异,采用低温和冰冻真空干燥保存法、减少移植次数、延长移植间隔时期、选用适宜的培养基有减少突变型菌落而延缓致病力下降的作用。

用单克隆抗体酶联免疫吸附测定法检测水稻种子上的白叶枯病菌

我们于1988年建立了以水稻白叶枯病菌单克隆抗体为第二抗体的酶联免疫吸附测定法,虽然具有灵敏、精确、简便、快速的优点,但用于检测水稻白叶枯病病种所带的微量细菌,灵敏度仍然不足,存在漏检现象。因而,我们对利用单克隆抗体检测水稻白叶枯病病种的方法作了进一步的改进研究。

“滇榆1号”等5个水稻品种白叶枯病抗性基因分析

在1985～1986年,用云南西双版纳州勐腊县水稻白叶枯病分离菌85-91-1观察6个品种和5个组合的抗病遗传规律。结果表明,西南175×早生爱国3号,窄叶青8号×千红-35-2,滇榆1号×早生爱国3号,滇杂25×早生爱国3号的F_2代抗病和感病的分离比是3:1.其抗病性是由1对显性基因控制的。

氮硝基脲对稻瘟病菌及细条病菌的抑制作用

进行了氮硝基脲类农药对水稻稻瘟病菌、水稻细条病菌室内抑制作用的初步研究。结果表明 :氮硝基脲的间氯代衍生物对水稻细条病菌有明显的抑制作用 ,其最佳抑制浓度为 2 .0 0× 1 0 - 4g/ml,抑制效果在 4 8h内为 1 0 0 % ,72h内为 75.85% ,但此类农药对水稻稻瘟病菌没有抑制作用。

水稻白叶枯菌自然群体的毒力结构与致病力的关系

从水稻白叶枯病叶标样151份中,分离获得80个原始菌株,又从原始菌株稀释分离得单菌落菌株441个。对感病品种金刚30、金南风和抗病品种早生爱国3号、矢租,徐444分别剪叶接菌。并对接菌后发现的弱毒菌进行血清学测定。结果表明,在自然条件下存在水稻白叶枯菌的弱毒菌型,它们在血清学方面与强毒菌是同质的。因此水稻白叶枯菌自然群体是由包括基本无毒性的弱毒菌在内的不同致病型组成的混合群体,其中弱毒菌对强毒菌毒性的抑制可表现出数量的或质量的差异。弱毒菌对强毒菌毒性的抑制随弱毒菌在混合接种物中所占比例的增加而加强。代表自然群体的原始菌株的致病力与其毒力结构紧密相关。

应用单克隆抗体鉴别水稻白叶枯病菌血清型的研究

从已建立的15株稳定分泌抗水稻白叶枯病原细菌的单抗杂交瘤细胞株中筛选出4株,用其抗体采用琼脂双扩散和酶联免疫吸附试验检测了作者从采集的病叶分离和从各地收集的水稻白叶枯病菌菌株63株,将其分为4个血清型,其结果与常规多抗血清划分的血清型一致.并运用免疫电泳和琼脂双扩散试验比较了各血清型之间的差异,其结果表明,单抗较多抗特异性强,在鉴别血清型方面较优越.

生物素——亲和素酶联免疫吸附测定法检测水稻白叶枯病病菌

在以单克隆杭体为第2抗体的酶联免疫吸附测定法(ELISA)的基础上,应用生物素——亲和素系统,建立了亲和素——生物素化辣根过氧化物酶复合物——酶联免疫吸附测定法(ABC-ELISA)检测水稻白叶枯病病菌。比较了ABC-ELISA法和常规ELISA法的差异,表明ABC-ELISA法的灵敏度比常规ELISA法高10～100倍。常规ELISA双夹心法的检出量一般为10~6菌体/ml,ABC-ELISA双夹心法达10~菌体/ml;全菌包被ELISA间接法为10~5菌体/ml;而ABC-ELISA间接法为10~3个菌体/ml。ABC-ELISA法并不影响单克隆抗体的高度特异性。用ABC-ELISA法检测58份水稻白叶枯病病叶,16份病种,病叶全部表现阳性反应,病种稻壳如取样在1g以上,检出率较高。

20种植物提取物对植物病原细菌的抑制活性

[方法]以水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)、桃树细菌性穿孔病菌[Xanthomonus campestrispv.pruni(Smith)Dye.]为供试菌,对20种植物提取液进行抑菌活性筛选;采用液-液萃取法初步分离石榴皮、五倍子的抑菌活性成分。[结果]石榴皮、五倍子对2种病原细菌抑制效果最好;石榴皮的抑菌活性成分主要存在于正丁醇萃取层,五倍子乙酸乙酯萃取物的抑菌活性成分较好。[结论]石榴皮对2种病原细菌的抑制活性最好,其正丁醇萃取物是下一步研究的重点。

水杨酸对杂交稻抗白叶枯病的作用

杂交稻幼苗感染白叶枯病菌后,其叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性明显提高,丙二醛(MDA)积累和膜透性显著增大,叶绿素含量与不饱和脂肪酸指数(IUFA)下降。经水杨酸(SA)预处理的植株PAL活性仍继续增加,而MDA含量和膜透性的增大趋势得到缓解,膜脂不饱和度增加。作者认为外源SA对杂交稻抗白叶枯病可能有多方面的作用。

感染白叶枯病后水稻叶片光合同化物对病害的补偿作用

水稻抗白叶枯病品种IR 26和感病品种金刚30在拔节期接种白叶枯病菌后,接种叶片净光合速率均下降,而与病叶相邻的健叶的净光合速率则明显增加,在穗期,IR 26接种叶片的^(14)C同化物累积率和运输到穗的百分率均高于金刚30;IR 26与病叶相邻的健叶,^(14)C同化物输向接种病叶和穗的百分率高于金刚30。这表明抗病品种IR 26接种病叶和健康叶片光合同化物对病菌侵染和产量损失的补偿作用较强,相反,金刚30则不明显。

水稻白叶枯病黄单胞菌编码顺乌头酸酶的rpfA基因的鉴定

通过生化功能分析，证实了水稻白叶枯病黄单胞菌野生型菌株Ｔ３０００产生两种顺乌头酸酶（分别命名为ＸｏｏＡｃａｎＡ和ＸｏｏＡｃａｎＢ）。通过三亲本接合的方法，将获得的含水稻白叶枯病黄单胞菌ｒｐｆ基因簇的重组质粒ｐＧＸＮ３０００导入甘蓝黑腐病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因突变体８４７６中。经生化功能分析证实，８４７６／ｐＧＸＮ３０００中含有水稻白叶枯病黄单胞菌的顺乌头酸酶ＸｏｏＡｃａｎＡ；同时还证实了ＰＧＸＮ３０００能互补８４７６，恢复其合成胞外酶和胞外多糖的能力及致病性．这表明在ＰＧＸＮ３０００中含有一个完整的水稻白叶枯病黄单胞菌的顺乌头酸酶基因，该基因具有类似甘蓝黑腐病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因的功能．因此将该基因命名为水稻白叶枯病黄单胞菌ｒｐｆＡ基因。

柑桔溃疡病综合防治研究

1985—1989年研究结果表明:14%胶氨铜水剂是目前防治柑桔溃疡病较理想的杀菌剂,效果略超过常规农药波尔多液;溃疡病药剂防治适期是春、夏、秋梢的梢长分别为4—5、6—7、5—6cm 时,以及果实横径为0.8—1.0、1.8—2.0、2.8～3.0cm 时。重病园用单一防治措施无法奏效,综合防治可有效地降低发病程度,提高果实产量、品质及增加经济效益。