响应面法优化Xenorhabdus nematophila发酵培养基的研究

【目的】提高Xenorhabdus nematophilaYL001的抗菌活性,为该菌株杀菌活性成分的提取分离及生物农药的开发应用奠定基础。【方法】以YSG培养基为基础,采用单因子试验方法,对最佳碳源和氮源进行筛选,并采用全因子中心组合试验设计和响应面法对其最佳配比进行优化。【结果】YL001菌株的最佳碳源为玉米粉,氮源为豆饼粉,培养基的最佳组成为:玉米粉9.69 g/L,豆饼粉76.50 g/L,MgSO41.07 g/L,(NH4)2SO41.79 g/L,KH2PO40.63 g/L,K2HPO40.80 g/L,Na2SO41.25 g/L,在此条件下,YL001菌株抗菌活性达268.9 U/mL。【结论】培养基优化后YL001菌株的抗菌活性与试验的预测值接近,表明响应面法在培养基优化中十分有效,相对简单,且节省时间和材料。

嗜线虫致病杆菌产生抗生素的培养基及条件

本文对嗜线虫致病杆菌 (Xenorhabdus nematophilus)产生抗生素的发酵培养基和发酵条件进行了研究 ,同时对该菌代谢过程 p H值、还原糖、总糖、氨基氮与抗生素产量的关系进行了分析。通过筛选该菌对碳源和氮源的要求 ,用正交试验初步确定了该菌产素的最佳发酵培养基和条件为 :玉米粉 1% ,大豆粉 3% ,蔗糖 1% ,蛋白胨 1.5% ,KH2 PO4 0 .0 2 % ,Mg SO4 0 .2 % ,活化剂 T0 .1% ;发酵培养基的起始 p H值在 6 .0～ 8.0 ,种龄 16 h,接种量 4 % ,50 0 m L摇瓶装量 15～ 150 m L的条件下培养 72 h可获得较高的抗生素产量 ;产素量与菌代谢过程中 p H、还原糖、总糖和氨基氮的变化有一定关系 ,通过培养基和培养条件的研究使该菌的产抗生素能力提高了 56 .3%。

致病杆菌D43菌株产素培养基及发酵条件

对致病杆菌产生抗生素的发酵培养基和发酵条件进行了研究，同时对该菌代谢过程pH值、还原糖、总糖、氨基氮与抗生素产量的关系进行了分析。通过筛选，确定了对该菌产素有利的碳源、氮源和无机盐。用正交试验初步确定了该菌产素的最佳发酵培养基和条件为（g／L）：麦芽糖5g，牛肉胨10g，牛肉膏5g，CaCl25g，KNO30．2g。发酵培养基的起始pH值在6．0～8．0、种龄16h、摇瓶装量25—150ml／500ml的条件下，培养72h可获得较高的抗生素产量。产素量与菌代谢过程中pH、还原糖、总糖和氨基氨的变化有一定关系。通过培养基和培养条件的研究使该菌的产抗生素能力提高了46．67％。

拮抗放线菌S-091菌株的发酵条件

为提高拮抗放线菌S-091菌株发酵液的抑菌活性,对其发酵培养的营养及环境条件进行研究。用番茄灰霉病菌作为抑菌活性测定的靶标菌,分别测定该菌株发酵培养基营养成分中不同种类的碳源、氮源、微量元素等物质以及发酵温度、培养基初始pH值、装液量、摇床转速等不同的发酵条件下菌株发酵液对靶标菌抑制作用的大小,以筛选出最适宜S-091菌株发酵培养的营养组成和环境条件。结果表明:在营养条件方面,可溶性淀粉和花生饼粉是菌株产抗生素的较优碳源和氮源营养;多种微量元素中KCl对菌株抗生素产生有明显的促进作用;在发酵环境条件方面,S-091菌株抗生素产生的较优培养温度为32℃,pH值为7,摇床转数为140r·min-1,适宜的装液量为250mL三角瓶装液100mL,最适宜的发酵时间为7d。

海洋放线菌FA-F-5对水产病原菌的抑制作用

【目的】为了筛选可用于水生动物疾病防治的生防菌。【方法】以从福建琅琦岛海泥中分离得到的1株对多种水产病原菌具有较强抑制作用的菌株FA-F-5为研究对象,通过形态观察、生理生化测定、16SrDNA序列测定对其进行鉴定,并对其发酵条件和产生活性物质的理化性质进行了研究。【结果】初步判定菌株FA-F-5为弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae);FA-F-5产生的抑菌活性物质的最佳发酵条件为:发酵培养基配方为麦芽糖15 g/L、黄豆粉25 g/L、CaCO31 g/L、K2HPO40.5 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,海盐10 g/L,发酵培养基初始pH=8,培养温度25℃,种子液菌龄48 h,接种量100 mL/L,装液量100 mL/L,发酵时间7 d;该抑菌活性物质具有较好的热稳定性和pH稳定性;纸电泳试验证实该抑菌活性物质呈弱碱性。【结论】放线菌FA-F-5能够产生抑制多种水产病原菌的抑菌活性物质,有望开发成为新一代生物渔药的生防菌。

嗜线虫致病杆菌YL001菌株代谢产物的抑菌活性

从陕西杨凌土样中筛选得到一株昆虫病原线虫,从其体内分离到它的共生菌嗜线虫致病杆菌Xenorhabdusnematophilus,编号为YL001,为明确其代谢产物的抑菌活性,本试验采用抑制菌丝生长速率法、抑制孢子萌发法、组织测定法和盆栽试验法系统测定了其发酵液对植物病原真菌的抑制作用。结果表明,在离体条件下该菌株发酵液对供试的15种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,对番茄灰霉病菌和辣椒疫霉病菌的抑制作用最强,EC50分别为53.54和90.39mg·L-1;对供试的6种植物病原真菌孢子萌发均有一定的抑制作用,其中对番茄灰霉病菌和烟草赤星病菌孢子萌发有较强的抑制作用,EC50仅分别为16.97和21.87mg·L-1;组织法测定中,发酵液稀释10倍后,对番茄灰霉病的保护效果为74.98%,治疗效果为63.50%;对盆栽番茄灰霉病的保护效果为65.11%,治疗效果为54.64%。显微观察表明,YL001菌株的发酵液可使菌丝生长形态异常、变形萎缩,甚至断裂。

新疆沙漠放线菌XSS040811菌株抗生素合成条件

放线菌XSS040811菌株是从新疆吐鲁番鄯善县沙漠中采集的样品中分离获得的，该菌株能产生抗菌活性较高的抗生素，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黄曲霉具有不同程度的抑制作用；优化发酵培养基，发酵时间、pH条件对放线菌XSS040811菌株合成抗生素的影响。结果表明：发酵培养基A、发酵时间96h、发酵温度30～35℃，pH值7．2～8．0为抗生素合成的最佳条件。根据该菌株在高氏1号和燕麦粉培养基上的生长特性、菌落和形态特征，初步鉴定为链霉菌属（Streptomyces）。