消癌平注射液对多西紫杉醇在大鼠体内的药代动力学及体外CYP450酶活性的影响研究

目的探讨消癌平注射液(XAP)对大鼠体内多西紫杉醇(DOC)药代动力学与体外细胞色素P450(CYP450)酶活性的影响。方法对24只SD雄性大鼠实施体内研究,随机分为A组(DOC对照组)、B组(XAP+DOC组)、C组[(咪达唑仑(MDZ)对照组)]、D组(XAP+MDZ组)共4组。借助超高效液相色谱串联质谱法检测给药后5、10、20、30 min和1、2、3、4、6、8、12、24 h大鼠血清中DOC/MDZ浓度,计算药代动力学参数。通过重组CYP450酶3A4(CYP3A4)的体外反应体系展开研究,制备人肝微粒体,以MDZ为底物探究XAP对CYP450酶活性的抑制作用,考察XAP对DOC代谢的影响。结果体内药代动力学结果显示,XAP可使DOC的C max和AUC 0→t分别增加150%(P<0.01)和60%(P<0.05);t 1/2和MRT分别为(4.24±1.78)h、(3.92±1.14)h,较DOC对照组显著延长;XAP可使MDZ的消除延长,半衰期t 1/2延长至(0.962±0.19)h,MRT延长至(1.008±0.13)h,药时曲线下面积(AUC 0→∞)为(1510.078±242.11)ng·h/ml,均显著高于MDZ对照组(P<0.05)。以MDZ为底物进行的体外抑制实验表明,XAP(10~100 mg/ml)和C 21总甾体提取物(10~50μg/ml)能明显抑制人肝微粒体CYP3A4活性。结论XAP与DOC联合使用后,DOC的血药浓度升高,DOC的多个药代动力学参数明显改变,XAP对DOC的消除有抑制效能,同时其作用机制可能与CYP3A4受抑制有关。

消癌平诱导人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞内caspase-3活化的荧光光谱分析

采用CCK-8技术检测发现传统中药消癌平(XAP)对人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞的增殖活性具有显著的抑制作用。利用共聚焦扫描荧光显微成像、荧光共振能量转移(FRET)及其受体光漂白技术证实了基于FRET技术构建的SCAT3质粒在ASTC-a-1细胞中的稳定表达。将消癌平加入细胞培养液中培育细胞,并在不同的时间检测活细胞内SCAT3的荧光发射光谱,从而监测细胞中caspase-3的活化状态。实验结果表明:(1)消癌平可以有效抑制人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞的增殖活性并诱导细胞的死亡,消癌平对细胞的抑制作用具有剂量依赖性。(2)消癌平处理细胞72 h后,细胞内大量的SCAT3被切割,表明细胞内caspase-3的活化水平明显升高。(3)将含消癌平的细胞培养液与细胞共同培养24 h,然后采用没有消癌平的细胞培养液培养细胞48和72 h后,细胞内SCAT3的光谱没有明显改变,表明消癌平作用细胞24 h内没有显著激活细胞内的caspase-3。

消癌平注射液治疗14例晚期胃癌的临床观察

采用乌骨藤草药制成的消癌平注射液治疗14例晚期胃癌患者。每日静脉给药100克,治疗30天为1个疗程,以2个疗程作评价。结果:治疗有效率为50％,无效率为50％;对腺癌、鳞癌、印戎细胞癌的有效率分别为57.9％、40％和50％;皿期与Ⅳ期的有效率分别为55.56％和40％。临床观察14例胃癌晚期患者,大多数患者的临床症状得到缓解,食欲增加,胃痛不适症状明显得到改善,生活质量评分较前提高。按中医分型疗效分析:治疗肝胃不和型效果较满意,有效率达83.33％;气滞瘀血型次之,有效率为50％;脾胃虚寒型效果欠佳,有效率仅为25％。

消癌平对伊马替尼在大鼠体内外代谢的影响

目的探讨消癌平注射液对伊马替尼在大鼠体内外代谢的影响。方法分别在伊马替尼人和大鼠肝微粒体孵育体系中加入2μl消癌平注射液和消癌平注射液10倍稀释液,孵育结束后终止反应。建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),检测代谢产物N-去甲基伊马替尼的生成量。将SD大鼠随机分成对照组和给药组(按7.5ml/kg连续10d腹腔注射消癌平注射液),每组8只,消癌平注射液连续给药10d,第10天两组大鼠按30mg/kg灌胃伊马替尼,并于灌胃后0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24h采集血样处理并检测。结果以伊马替尼为底物,消癌平注射液和消癌平注射液10倍稀释液在大鼠肝微粒体中,较对照组分别抑制了90.83%和50.73%;在人肝微粒体中,较对照组分别抑制了79.44%和28.77%。消癌平注射液连续10d腹腔注射后,伊马替尼及其活性代谢产物N-去甲基伊马替尼的相关药代动力学参数发生了改变:相比于空白对照组,血浆伊马替尼达峰时间(T_(max))延后了105.72%,表观分布容积(Vz/F)减少了24.76%;血浆N-去甲基伊马替尼AUC_(0-t)减少了21.37%,AUC_(0-∞)减少了19.29%,Tmax延后了35.70%,峰浓度(C_(max))减少了20.01%,Vz/F增加了45.38%,清除率(CLz/F)增加了32.44%。结论体内外实验结果提示消癌平注射液能影响伊马替尼的代谢。临床上同时应用消癌平注射液与伊马替尼时,应密切关注患者的临床症状和伊马替尼血药浓度Tmax。

消癌平诱导caspase-3活化动态过程的实时监测

消癌平是从萝摩科(Asclepiadaceae)植物通关藤(Marsdenia tenacissima)根部提取的药物,已经广泛应用于癌症和多种炎症的临床治疗,并且具有较好的疗效。将消癌平注射液与细胞培养液按照1∶1的比例混合后共同培养人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞,通过CCK-8方法检测发现消癌平能够显著抑制细胞的增长。然后利用荧光共聚焦扫描显微镜和荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术在稳定表达了SCAT3质粒的单个ASTC-a-1细胞中实时动态监测消癌平处理后SCAT3的空间分布以及SCAT3被caspase-3切割的动态过程。实验结果表明:消癌平处理后20 min中SCAT3开始向细胞核以及细胞膜部位转移,约在100min左右SCAT3被迅速切割。

消癌平抗肿瘤药理实验与临床研究进展

就消癌平抗肿癌作用的细胞、整体水平的药理实验研究,以及临床应用概况,主要是在抗消化系统肿瘤方面的作用作了简要介绍。

消癌平注射液辅助化疗治疗非霍奇金淋巴瘤的临床分析

【目的】评价消癌平注射液联合中医辨证治疗辅助化疗方案对非霍奇金淋巴瘤(NHL)的疗效及安全性。【方法】回顾分析南京中医药大学附属医院血液科2009~2014年经CHOP方案化疗2~3个疗程的NHL患者79例,根据治疗方法的不同将患者分为观察组38例和对照组41例。对照组单纯接受CHOP方案化疗,观察组在对照组基础上给予消癌平注射液(中药乌骨藤提取物)联合中医辨证治疗(根据寒痰凝结、气郁痰结、阴虚痰瘀和阴阳俱虚4型,分别给予阳和汤、柴胡疏肝散、壮骨丸、肾气丸加减治疗),比较2组的近期疗效和不良反应,并进一步将观察组按照病理类型、病情分期、侵袭程度、危险度及中医辨证等分层,比较其疗效差异。【结果】(1)观察组的总有效率和疾病控制率分别为71.1%和84.2%,明显高于对照组的58.5%、73.2%,差异有统计学意义(P <0.05)。(2)分层比较结果显示,观察组对B细胞淋巴瘤的有效率(78.1%)和疾病控制率(90.6%)均高于T细胞淋巴瘤(40.0%、40.0%),对低-中/中危组淋巴瘤的有效率(87.0%)和疾病控制率(95.7%)均高于中-高/高危组淋巴瘤(46.7%、66.7%),对惰性和初发淋巴瘤的疾病控制率(100.0%、91.7%)高于侵袭性和难治/复发淋巴瘤(78.6%、71.4%),差异均有统计学意义(P <0.05)。(3)观察组对气郁痰结和阴虚痰瘀组的有效率分别为81.8%、90.0%,对气郁痰结和阴虚痰瘀组的疾病控制率分别为90.9%、100.0%,均高于寒痰凝结组和阴阳两虚组,差异均有统计学意义(P <0.01)。(4)观察组在血小板减少、贫血和发热的发生率方面均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05),而2组在其他毒副反应方面的发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】消癌平注射液联合中医辨证治疗与化疗方案治疗NHL具有协同作用,对B细胞、惰性、初发、气郁痰结组和阴虚痰瘀淋巴瘤具有一定优势和潜在治疗价值。

消癌平联合吉非替尼对进展期非小细胞肺癌患者凝血功能及临床疗效的影响

目的探讨消癌平注射液联合吉非替尼治疗进展期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效及对患者凝血功能的影响。方法将173例ⅢA~Ⅳ期NSCLC患者随机分为对照组(n=77)和观察组(n=96)。对照组患者接受吉非替尼治疗,观察组患者接受消癌平注射液联合吉非替尼治疗。比较2组患者治疗前后血流动力学指标、凝血分子水平变化以及临床治疗效果。结果治疗后,观察组患者治疗总有效率为92.71%,明显高于对照组(P<0.05)。对照组患者有49例(63.64%)出现高凝状态,明显高于治疗前和观察组(P<0.05)。经治疗后,观察组患者血清纤维蛋白原和D-二聚体含量、全血粘度高切值低于治疗前和对照组(P<0.05);而全血粘度低切值、毛细管血粘度值、红细胞压积和红细胞聚集指数均低于对照组(P<0.05)。结论消癌平注射液可以改善进展期非小细胞肺癌患者的血液高凝、高粘状态,联合吉非替尼抗癌效果理想,值得临床推广。

消癌平注射液联合TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果

目的:探讨消癌平注射液联合TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的效果。方法:收治晚期非小细胞肺癌患者80例,将其分为对照组和研究组,各40例。对照组给予TP方案治疗,研究组给予消癌平注射液联合TP方案治疗。结果:治疗后,研究组NK、CD4/CD8、CD8、CD4均显著低于对照组(P<0.05)。结论:消癌平注射液联合TP治疗晚期非小细胞肺癌,可显著改善患者NK细胞免疫功能,安全性好。

基于三重四级杆质谱仪的一种定向细胞结合的植物化学组分筛选策略:发现中药制剂消癌平注射液中的潜在生物活性成分

消癌平注射液(XAP-Ⅰ)提取自通关藤,在我国临床上广泛用于治疗各种癌症,而从其复杂组分中阐释生物活性成分一直是学界研究的热点内容。本文结合三重四级杆质谱仪中的全扫描(full scan,FS)、母离子扫描(precursor ion scan,PCIS)、子离子扫描(product ion,PDIS)及多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式鉴定了XAP-Ⅰ中的主要孕甾烷糖苷及酚酸类成分,可利用丰富的加合离子信息确定组分结构特性并实现高灵敏度分析。此外,本文应用定向细胞结合植物化学组分筛选策略以发现XAP-Ⅰ中的生物活性成分,该策略可实现对XAP-Ⅰ的高通量定性、定量分析,并显著提高XAP-Ⅰ潜在生物活性成分筛选的灵敏度及选择性。

消癌平注射液抗血管生成作用及其机制研究

研究消癌平注射液对血管生成的影响,并探索其作用机制与血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的相关性。采用CCK8实验和Brd U掺入细胞免疫荧光实验检测消癌平注射液对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖影响;采用细胞划痕愈合和小室迁移实验考察消癌平注射液对HUVECs的迁移能力影响;采用HUVECs管腔形成实验、大鼠动脉环出芽实验以及鸡胚尿囊膜(CAM)实验等考察消癌平注射液的抗血管生成作用;分别采用ELISA酶联免疫吸附实验和Western blot检测HUVECs中VEGF的分泌情况以及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)等蛋白的表达变化。结果显示,消癌平注射液可剂量和时间依赖性地抑制HUVECs增殖,在24、48和72 h各时间点对HUVECs的IC50值(mg·m L-1)分别为48.7±7.14,29.1±2.25和22.0±4.53。消癌平注射液可抑制HUVECs的DNA合成以及迁移作用;还可抑制HUVECs管腔样结构形成,并且一定浓度下可抑制大鼠动脉环切口处微血管样结构萌发以及鸡胚尿囊膜血管生长;此外,消癌平注射液还可抑制HUVECs中VEGF分泌并下调p-VEGFR2和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。本研究结果表明,消癌平注射液可在体外和离体水平抑制血管生成,其作用机制可能与抑制VEGF分泌、VEGF引起的VEGFR2及其下游AKT信号通路活化有关。

消癌平注射液联合XELOX方案化疗对晚期结直肠癌患者近期增效减毒作用

目的观察消癌平注射液联合XELOX方案治疗晚期结直肠癌的疗效及不良反应。方法选取2015年4月至2016年10月确诊的晚期结直肠癌患者82例,按治疗方法分为两组,XELOX组应用XELOX方案化疗(n=36),消癌平+XELOX组应用消癌平注射液联合XELOX方案化疗(n=46),治疗过程中观察患者化疗不良反应,并于治疗2个周期后进行疗效评价。结果 XELOX组患者有效率为44.4%,消癌平+XELOX组有效率为67.4%,两组治疗有效率差异有统计学意义(P<0.05)。依据KPS评分标准,消癌平+XELOX组患者生活质量改善情况明显优于XELOX组(P<0.05)。消癌平+XELOX组的白细胞降低、恶心、呕吐、神经毒性明显低于XELOX组(P均<0.01)。结论消癌平联合XELOX方案化疗较单纯XELOX方案化疗可明显提高近期化疗效果,改善患者生活质量,减少毒副反应,具有增效减毒的作用。

细化和规范化肌肉刺激性试验方法的建议

目的:通过对化药注射剂、化药-中药注射剂和中药注射剂进行肌肉刺激试验,解读现行肌肉刺激试验指导原则,在细化和完善的试验方法的基础上,进一步规范判定标准。方法:参照《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》采用家兔股四头肌注射方式,左右侧自体对照,阳性组为0.425%和1.7%(w/v)乙酸溶液,对复方氨林巴比妥注射液、杏芎氯化钠注射液和消癌平注射液进行肌肉刺激试验检查。结果:复方氨林巴比妥注射液观察期内无肌肉刺激;杏芎氯化钠注射液和消癌平注射液自身对照和受试物处肌肉存在淤紫现象,48 h观察现象减轻,96 h刺激现象部分消失;阳性对照组出现不同程度的淤血、肌肉肿胀和硬化,延长至96 h观察刺激现象不消失。结论:2005年版《化学药物肌肉刺激指导原则》和中药、天然药物肌肉刺激指导原则存在差异,建议统一指导原则,细化试验方法,并进一步规范肌肉刺激试验结果的判定标准。

消癌平注射液对斑马鱼卵巢癌移植瘤的抗肿瘤作用研究

目的:评价消癌平注射液对斑马鱼卵巢癌移植瘤的抑制作用。方法:采用CM-DiI荧光标记的人卵巢癌A2780细胞,以显微注射的方式移植到斑马鱼卵黄囊内,建立斑马鱼卵巢癌移植瘤模型。根据斑马鱼毒性反应和死亡情况确定正常斑马鱼和荷瘤斑马鱼对消癌平注射液的最大耐受量。将荷瘤斑马鱼分为模型对照组、溶剂对照组、紫杉醇组和消癌平低、中、高剂量组,各组给予相应干预。荧光显微镜测定斑马鱼移植瘤的荧光强度及肿瘤细胞在斑马鱼尾部的转移距离,观察消癌平注射液对斑马鱼移植瘤生长和转移的影响,计算肿瘤生长抑制率和肿瘤转移抑制率。结果:①最大耐受量实验显示,消癌平注射液对正常斑马鱼的毒性较低;当其剂量≤1.25 ng/尾时,荷瘤斑马鱼未出现死亡和毒性反应,故选取0.312 5、0.625和1.25 ng/尾分别作为消癌平注射液低、中、高剂量进行后续试验。②与模型对照组相比,溶剂对照组、紫杉醇组和消癌平低、中、高剂量组的肿瘤生长抑制率分别为3%、33%、15%、14%、27%;紫杉醇组和消癌平高剂量组斑马鱼的整体荧光强度显著降低(P<0.05)。③与模型对照组相比,溶剂对照组、紫杉醇组和消癌平低、中、高剂量组的肿瘤转移抑制率分别为15%、61%、11%、36%、42%;紫杉醇组和消癌平中、高剂量组的肿瘤转移累计距离明显减少(P<0.01)。结论:消癌平注射液对斑马鱼卵巢癌移植瘤的生长和转移均具有一定的抑制作用。