高效液相色谱法测定消肿止痛洗剂中芍药苷的含量

目的建立消肿止痛洗剂中芍药苷含量测定的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:C18柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸(14∶86),流速:1.0 mL/min,检测波长:230 nm,柱温:室温。结果芍药苷进样浓度在5.84-58.38μg/mL(r=0.999 8)范围内与其峰面积呈良好线性关系,平均回收率为97.16%,RSD为1.05%。结论所建立的方法准确、重现性好,能有效控制该制剂的质量。

消肿止痛洗液微生物限度检查法的研究

目的:建立消肿止痛洗液的微生物限度检查法。方法:按《中国药典》(2010年版)微生物限度检查法进行验证和试验,测定消肿止痛洗液对5个规定试验菌株的回收率,对控制菌的检查法进行验证。结果:方法学验证中各菌的回收率菌>70%,该方法可行。结论:经方法学验证试验得出的检查方法可用于消肿止痛液的微生物限度检查。

消肿止痛液消肿、促溃疡面愈合、镇痛的有效部位筛选

目的:筛选消肿止痛液具有消肿、促溃疡面愈合、镇痛的有效部位,为其二次开发为软膏剂提供参考。方法:采用D101大孔树脂分离得到消肿止痛液的水洗脱部位和20%、40%、60%、95%乙醇洗脱部位。将120只SD大鼠随机分为正常组(n=8)和造模组(n=112);正常组大鼠不作处理,造模组大鼠采用肛周皮肤注射75%冰醋酸致肛周溃疡复制大鼠痔疮模型;将96只成模大鼠随机分为模型组[空白软膏基质0.51 g/(kg·d)],阳性组[马应龙麝香痔疮膏0.51 g/(kg·d)],消肿止痛液及其水洗脱部位和20%、40%、60%乙醇洗脱部位的高、低剂量组[按生药计给药剂量均分别为8.34、2.78 g/(kg·d),均制成含药软膏],每组8只;肛周涂抹给药,每天给药2次,连续给药7 d;观察给药第3、7天大鼠肛周局部症状以及给药第7天大鼠肛周局部黏膜组织病理形态并分别进行评分,考察各洗脱部位的消肿、促溃疡面愈合作用。分别取120只ICR小鼠随机分为模型组[空白软膏基质1.03 g/(kg·d)]、阳性组[马应龙麝香痔疮膏1.03 g/(kg·d)]和消肿止痛液及其各洗脱部位的高、低剂量组[按生药计均分别为16.65、5.55 g/(kg·d),均制成含药软膏],每组10只;经皮给药,每天给药2次,连续给药3 d;末次给药30 min后,分别通过醋酸扭体实验检测小鼠的扭体潜伏时间、15 min扭体次数以及热板致痛实验检测小鼠的痛阈值,考察各洗脱部位的全身和局部镇痛作用。结果:在消肿、促溃疡面愈合考察实验中,与正常组比较,模型组大鼠在给药第3、7天肛周局部症状评分以及在给药第7天肛周局部黏膜组织病理评分均显著升高(P<0.01);与模型组比较,阳性组和40%乙醇洗脱部位高、低剂量组大鼠上述评分均显著降低(P<0.05或P<0.01),20%乙醇洗脱部位高剂量组大鼠在给药第3、7天以及60%乙醇洗脱部位组大鼠在给药第7天肛周局部症状评分显著降低(P<0.05)。在镇痛考察实验中,与模型组比较,阳性组和40%乙醇洗脱部位高、低剂量组以及60%乙醇洗脱部位高剂量组小鼠的扭体潜伏时间显著缩短、15 min扭体次数均显著减少(P<0.05或P<0.01),20%乙醇洗脱部位高剂量组小鼠扭体潜伏时间显著缩短(P<0.05);阳性组、40%乙醇洗脱部位高、低剂量组小鼠给药后痛阈值显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:消肿止痛液40%乙醇洗脱部位具有较好的消肿、促溃疡面愈合和镇痛作用。

UPLC-Q-TOF-MS法鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分

目的:分析消肿止痛液有效部位的化学成分,为阐明其药效物质基础及将其二次开发为软膏制剂提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)法对消肿止痛液有效部位(经D101大孔树脂分离得到的40%乙醇洗脱部位)进行成分分析。色谱条件为采用Hypersil GOLD a Q C18色谱柱,以0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,进样量4μL,柱温30℃;质谱条件为采用电喷雾离子源(ESI)在正/负离子扫描模式(ESI+/ESI-)下进行检测,扫描范围100~2000 Da,碰撞能量45/-45 e V,扩展碰撞器能量10/15 e V。获得图谱后收集化合物的精确分子量、保留时间和多级碎片离子信息,通过与对照品质谱信息及参考文献比对进行化学成分鉴定。结果:共鉴定出48个化合物,在ESI+、ESI-检测模式下分别鉴定出9、39个。其中,酚酸类成分10个、苯丙素类成分8个、蒽醌类成分9个、黄酮类成分3个、生物碱类成分7个、鞣质类成分5个、其他类成分6个。结论:UPLC-Q-TOF-MS法可快速、高效、准确地鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分,该部位的主要化学成分为酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、生物碱类和鞣质类。

大孔树脂-无机陶瓷膜联用技术对消肿止痛液盐酸小檗碱含量的影响

目的优选大孔树脂与无机陶瓷膜联用精制消肿止痛液的工艺。方法以盐酸小檗碱吸附容量、洗脱率为评价指标,通过静态吸附-洗脱试验从AB-8、HPD600、D101三种型号树脂优选出大孔树脂型号,通过正交试验考察上样浓度、大孔树脂用量、乙醇体积分数及体积对盐酸小檗碱得率的影响;以盐酸小檗碱转移率为评价指标,衡量不同孔径无机陶瓷膜及运行参数对水提液的精制效果。结果AB-8型大孔吸附树脂对盐酸小檗碱的吸附和洗脱性能均较好,最佳上样浓度为1.0 g·mL^(-1),大孔树脂用量(g)与上样量(mL)比为8∶1,60%乙醇洗脱剂浓度,洗脱剂(mL)与上样量(mL)比为8∶1。选用膜孔径为800 nm的无机陶瓷膜,压差0.2 MPa,过膜温度40℃,药液浓度为0.1 g·mL^(-1)条件下,膜通量及盐酸小檗碱的转移率均较高。结论该试验表明大孔树脂与无机陶瓷膜联合用于消肿止痛液中盐酸小檗碱精制方法可行。