消定膏对兔胫骨骨折愈合中TGF-β/BMPs信号通路表达的影响

目的:观察消定膏对兔胫骨骨折愈合中骨钙素、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)不同时相表达的影响。方法:采用骨缺损法造成家兔胫骨3mm骨缺损模型,随机分为对照组和消定膏组,外敷消定膏治疗后,分别于第7天、第14天、第28天、第42天4个不同时相点每组随机抽取8只,心脏取血,ELISA法检测血清骨钙素浓度,取骨痂组织,光镜下观察病理形态学变化,免疫组化法与RT-PCR技术检测骨痂中TGF-β1、BMP-2、BMP-7蛋白表达情况。结果:局部应用0.5g/cm^2消定膏后,与对照组比较,消定膏组血清骨钙素浓度值在各个时相点均高于对照组,消定膏组骨痂出现时间早、骨痂量多、骨折愈合时间明显缩短。消定膏组BMP-2、BMP-7、TGF-β1免疫组化MOD值、RT-PCR表达量在4个不同时相点均明显高于对照组,且在术后14天左右出现峰值,明显早于对照组(28天)。结论:消定膏对兔胫骨骨折愈合的促进作用可能通过调控骨痂组织中TGF-β/BMPs信号通路有关。

消定膏质量标准提高研究

目的提高消定膏的质量标准,有效控制制剂质量。方法采用薄层色谱(TLC)法对消定膏中大黄进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对儿茶中儿茶素、表儿茶素,大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进行含量测定。以十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250.0 mm,5μm)为填充剂,0.04 mol/L枸橼酸溶液-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(45∶8∶2)为流动相测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量;以甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15)为流动相测定大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。结果TLC鉴别分离度高、专属性强、重现性好;儿茶素、表儿茶素的回归方程分别为Y=5.62987X+52.62137(r=0.9995),Y=6.52447X+4.95308(r=0.9995),线性范围分别为18.91~605.00,1.59~51.00μg,平均加样回收率分别为100.29%,98.74%,RSD分别为3.14%,3.04%;芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的平均加样回收率分别为95.36%,89.66%,93.22%,95.04%,91.41%,RSD分别为1.07%,2.17%,2.09%,2.48%,1.35%。结论本方法简单准确、专属性强,可为提高消定膏质量标准提供依据。