大蓟与小蓟饮片的鉴别研究

目的:对大蓟和小蓟饮片进行鉴别研究,为其质量标准的完善和提升提供思路参考。方法:应用体式显微镜和光学显微镜等设备及数码成像技术,从叶片、茎、苞片、冠毛等细节特征,以及横切面、粉末的显微特征,对大蓟与小蓟饮片进行鉴别研究;采用硅胶GF254薄层板,以乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂,在紫外灯254nm下检视,建立薄层鉴别方法。结果:通过研究发现,大蓟和小蓟的叶片、茎、苞片、冠毛存在明显差别,显微特征差异性较小,粉末特征只在下表皮细胞上存在一定差异,薄层鉴别方法灵敏度高、重现性好,专属性强。结论:通过研究归纳了大蓟和小蓟饮片的鉴别特征,可为二者的鉴别提供一定的实验基础支持,并为其质量标准的完善提供有益思路。

小蓟TLC鉴别方法优化及小蓟炭“炒炭存性”内在表征研究

目的优化小蓟TLC鉴别方法并研究小蓟炭“炒炭存性”内在表征。方法对2020年版《中国药典》中“小蓟”项下TLC展开方法中的薄层板和展开剂进行改进,建立小蓟炭的TLC鉴别方法和UPLC指纹图谱,并测定蒙花苷、金合欢素的含量。结果小蓟TLC鉴别建议使用硅胶G板,展开剂建议改为甲苯-丙酮-甲酸-甲醇(6∶3∶0.5∶2.5)。小蓟及不同炒制程度小蓟炭的蒙花苷、金合欢素含量变化与TLC鉴别结果一致。结论与2020年版《中国药典》相比,改进的小蓟TLC鉴别方法较原方法成本低,所用展开剂毒性小。建立的小蓟炭“炒炭存性”的内在表征结合外观性状可用于解决市售小蓟炭的质量问题。

小蓟化学成分研究

目的:研究小蓟的化学成分。方法:用溶剂法提取,色谱法分离,光谱法鉴定结构(UV、1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS、DEPT、HSQC、HMBC)。结果:分离并鉴定了8个化合物,分别为:(7R,8S)-dehydroconiferyl alcohol-8,5′-dehydroconiferly aldehyde-9-O-β-D-glucopyranoside(Ⅰ)、(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9-O-β-D-glucopy-ranoside(Ⅱ)、Isokaempferide-7-O-β-D-glucopyranoside(Ⅲ)、Quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside(Ⅳ)、Pectolinarin(Ⅴ)、Rutin(Ⅵ)、Sucrose(Ⅶ)、β-sitosterol(Ⅷ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为首次在该植物中分离得到,该文首次报道了小蓟中的木脂素类化合物。

小蓟提取物对凝血、出血及实验性炎症的影响

目的:观察小蓟不同提取物对小鼠凝血、出血时间及实验性炎症的影响。方法:采用毛细血管法测定小鼠的凝血时间;用断尾法测定小鼠的出血时间;以小鼠耳肿胀实验考察抗炎作用。结果:正丁醇部位、总黄酮部位具有显著的凝血和止血作用;乙酸乙酯部位具有一定的止血作用;总黄酮部位显著抑制实验性炎症。结论:小蓟的乙酸乙酯部位、正丁醇部位和总黄酮部位具有不同程度的止血、凝血和抗炎作用。

小蓟的质量标准研究

目的建立小蓟药材的质量标准。方法运用薄层色谱法对小蓟中蒙花苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定蒙花苷的含量,色谱柱为Ultimate ColumnXB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(51∶49),检测波长为334nm,流速1.0ml.min-1,柱温25℃。结果薄层鉴别斑点清晰,重复性好;高效液相色谱法测定蒙花苷在0.00658～2.964μg之间峰面积与进样量呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为100.7%,RSD为1.89%。结论该方法简单可行,重复性好,可作为小蓟药材的质量控制方法 。

大蓟鲜花提取物对访花昆虫的引诱性气味物质研究

将大蓟Herba cirsii Japonici鲜花乙醇提取物浸膏,两相溶剂萃取和硅胶柱层析分离,使用Y型嗅觉仪测定了各分离流分对熊蜂的嗅觉引诱效果,并运用气相色谱-质谱联用法进行成分分析,确定了大蓟鲜花中对熊蜂具嗅觉引诱性的7个化合物分别为:(3R)-1,7,7-三甲基二环[2.2.1]庚烷-2-酮;4-甲基-3-丁基苯酚;邻苯二甲酸二(乙酸丁酯)酯(酯类);L-来苏糖;十九烷基酸乙酯;(9Z,12Z)-9,12-二烯十八烷基酸;(9Z,12Z,15Z)-9,12,15-十八烷基三烯-1-醇.

不同产地大蓟、小蓟的指纹图谱研究

目的:分别建立不同产地大蓟、小蓟HPLC指纹图谱,并比较其异同,为其质量控制提供参考依据。方法:色谱柱Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1 mL/min;检测波长为330 nm;柱温为30℃;进样量为10μL。采用相似度评价方法对指纹图谱进行研究。结果:10批大蓟共有18个共有峰,并指认其中6种,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、蒙花苷和柳穿鱼叶苷;15批小蓟共有16个共有峰,并指认其中6种,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁和蒙花苷。不同产地的大蓟、小蓟药材具有稳定且特征的指纹图谱。结论:该方法稳定、可靠,可为大蓟、小蓟的质量控制提供一定的依据。

分光光度法测定小蓟及其小蓟炭总黄酮含量

采用分光光度法测定小蓟及小蓟炭中总黄酮含量。试验得出线性回归方程,线性范围为0.008～0.048mg/mL,平均回收率为98.9%。试验结果说明,该方法可靠,测定结果能反映客观实际,可以作为小蓟及小蓟炭饮片质量标准之一。

小蓟中芦丁、蒙花苷、木犀草素和芹菜素一测多评方法的建立

目的建立小蓟中芦丁、蒙花苷、木犀草素和芹菜素的一测多评方法。方法以芦丁为内参物,分别建立蒙花苷、木犀草素和芹菜素的相对校正因子,并用该相对校正因子计算后3种黄酮类成分的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定小蓟中这4种成分的含量,比较计算值与实测值之间的差异,验证所建立的方法的准确性、适用性和重复性。结果10批小蓟中4种成分含量的计算值与实测值无显著性差异。结论实验建立的小蓟中芦丁、蒙花苷、木犀草素和芹菜素的一测多评方法准确性、可靠性、重复性良好,可用于小蓟药材的质量控制。

基于DNA条形码技术的中药小蓟基原植物的分子鉴定

目的:对中药小蓟的基原植物进行分子鉴定,以确保药材质量及其临床疗效。方法:以核基因ITS2片段及叶绿体基因片段psbA-trnH作为DNA条形码,对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建NJ(邻接)树。结果:所研究的刺儿菜复合体样本的ITS2序列间存在明显差异,psbA-trnH序列间也存在稳定差异,基于ITS2序列及psbA-trnH序列构建的邻接(NJ)树可以看出大刺儿菜与小刺儿菜不同样本均能聚为独立一支,表明中药小蓟的基原植物刺儿菜复合体确为两个独立的物种。结论:ITS2和psbA-trnH序列作为DNA条形码可以有效地区分和鉴别物种,在中药原植物物种分类与中药鉴定方面具有广阔的应用前景。

高效液相色谱法测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量

目的建立HPLC测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量方法。方法色谱柱为DIKMA Platisil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-醋酸(55∶44∶2),流速1.0 ml/min,进样量20μl,检测波长326 nm。结果蒙花苷在2.95～98.3μg/ml内线性良好,r=0.999 9(n=5),平均回收率100.2%,RSD为0.96%(n=15)。结论该法操作简便、灵敏、可靠,可用于支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量测定。

小蓟酸水提取物对巴马小型猪心肌的影响

目的研究小蓟酸水提取物对巴马小型猪心肌的影响。方法健康巴马小型猪30只随机分为正常对照组、异丙肾上腺素阳性对照组(阳性对照组)和小蓟酸水提取物(高、中、低剂量)干预组(高、中、低剂量组),每组各6只。分别予以生理盐水、异丙肾上腺素(1.0 mg/kg)、小蓟酸水提取物高(2.0 mL/kg)、中(1.0 mL/kg)、低(0.5 mL/kg)剂量腹腔注射,1次/d,连续给药7 d后,检测其心电图、血清心肌酶谱和心肌氯化三苯基四氮唑(TTC)染色结果。结果与正常对照组比较,低剂量组的心电图与正常对照组基本一致,中剂量组的心电图S-T段稍有抬高,高剂量组心电图呈典型心肌缺血。血清心肌酶各指标,低剂量组各指标与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);中剂量组乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)明显高于正常对照组,高剂量组LDH、CK-MB、肌酸激酶(CK)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。心肌TTC染色结果表明中、高剂量组都有因缺血而坏死的心肌。结论通过注射小蓟酸水提取物能在一定程度上诱发巴马小型猪产生心肌缺血,缺血程度与剂量有一定关系。

大蓟炭化学成分的研究

目的:研究大蓟炭70%乙醇提取物氯仿和乙酸乙酯萃取部分的化学成分。方法:利用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、ODS及正相硅胶柱等色谱手段进行分离,通过对波谱学数据分析,并与文献对照进行化合物的结构鉴定。结果:从氯仿和乙酸乙酯萃取部分共分离得到8个化合物,经鉴定为柳穿鱼黄素、柳穿鱼叶苷、刺槐素、刺槐苷、香叶木素、槲皮素、5,7,8-三羟基-6,4′-二甲氧基黄酮、邻苯二酚。所有化合物均系首次从大蓟炭中分离得到,其中化合物5,7,8-三羟基-6,4′-二甲氧基黄酮、邻苯二酚系首次从大蓟中分离得到。

小蓟及小蓟炭指纹图谱的初步研究

目的:采用高效液相色谱法建立小蓟、小蓟炭的指纹图谱,并进行分析比较。方法:用KromasilC18(46×250mm,5μm)色谱柱,0.5%冰醋酸溶液—乙腈为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温:30℃。结果:初步建立了小蓟、小蓟炭的指纹图谱,其精密度、重复性、稳定性试验中共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%。结论:该方法简便、准确、重复性好,小蓟炒炭前后指纹图谱有明显差异。

杨洪涛运用药对治疗血尿经验拾萃

杨洪涛教授秉承《黄帝内经》"少阳属肾,上连于肺,故将两脏"的经典理论,认为少阳枢机功能对于肾之气化,肺之宣肃,以至一身气、火、水的升降出入来说具有重要意义。杨洪涛教授治疗慢性肾脏病宗"肾疏宁疏利少阳"之旨,在小柴胡汤基础上配伍补益脾肾、清热祛痰化瘀中药,取效显著。杨洪涛教授取小蓟、白茅根性凉濡润,入血分而止血之效,凡因热而出现血尿者常用此二药凉血而止血,同时配合地榆、侧柏叶等其他凉血药物,加强柴胡、黄芩疏理中焦热邪之效,临证为防凉血药有凉血留瘀之弊,常采用温性的活血化瘀药蒲黄炭、三七佐之。

RP-HPLC测定小蓟中绿原酸的含量

目的:研究小蓟中绿原酸简便快速的含量测定方法,为评价药材及饮片质量提供方便。方法:采用反相高效液相色谱法,测定3种产地小蓟中绿原酸的含量。色谱条件:LichrospherC18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),柱温:30℃;甲醇-1%醋酸(15∶85)为流动相;流速:1.0mL·min-1;检测波长:327nm。结果:小蓟中绿原酸在0.00328～0.02952mg·mL-1具有良好的线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.1%,RSD=2.23%。结论:经过系统的方法学考察,该方法具有简便、专属、稳定、可重复的特点,可用于小蓟中绿原酸的含量测定。

HPLC法测定小蓟饮片中蒙花苷含量

目的研究小蓟中蒙花苷简便快速的含量测定方法,为评价药材及饮片质量提供方便。方法采用高效液相色谱法,测定3种产地小蓟中蒙花苷的含量。色谱条件:Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),柱温30℃,甲醇-水(45∶55)为流动相,流速1.0mL.min-1,检测波长326nm。结果小蓟中蒙花苷在0.09981～0.79848μg范围内具有良好的线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为99.89%,RSD=2.84%。结论经过系统的方法学考察,该方法具有简便、专属、稳定、可重复的特点,可用于小蓟中蒙花苷的含量测定。

刺儿菜中黄酮类化合物提取工艺的研究

在单因素试验的基础上,用正交试验对刺儿菜中的黄酮类化合物的提取工艺进行了优选,研究了浸提温度、提取时间、乙醇体积分数、料液比对刺儿菜黄酮得率的影响。结果表明,刺儿菜中黄酮的最佳提取工艺条件为:提取温度为60℃,提取时间为30 min,料液比为1 g∶10 ml,乙醇浓度为70%。在此条件下,黄酮得率为3.573%。

小蓟炒炭前后蒙花苷的含量测定

目的:比较小蓟炒炭前后蒙花苷含量的变化。方法:采用AgilentZORBAXSB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,流动相为甲醇-0.5%醋酸(55∶45),检测波长为326nm,流速为1.0mL·min-1。结果:蒙花苷在0.01～1.00μg线性关系良好,r=1.000,平均回收率为98.6%,RSD=2.48%(n=6)。结论:该方法方便,准确,重现性好,为小蓟和小蓟炭的质量控制提供依据,并有助于小蓟合理炮制工艺的制定。

仙鹤草、侧柏叶、小蓟治疗肾性血尿经验--仝小林三味小方撷萃

肾性血尿是肾内科常见疾病,多见于急慢性肾炎、IgA肾病、隐匿性肾小球肾炎、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等疾病中,这类疾病常反复发作,缠绵不愈,最终可进展为慢性肾功能衰竭。仝小林教授认为此类疾病属脏腑风湿病的范畴,其发病往往由于感受风寒湿,邪伏肾络所致,而见血尿者则多兼湿、热、瘀等病理产物,临床常在扶正透邪的基础上,加用仙鹤草、侧柏叶、小蓟三味药针对症靶治疗。仙鹤草收敛止血兼可补虚,侧柏叶祛风止血兼能散瘀,小蓟善清血分热而凉血,三者配伍,恰合肾性血尿的病机特点,能针对性减少尿红细胞数量,临床用量均为15~30 g。