消瘀片对粥样硬化兔血管壁组织ET-1mRNA和NOSmRNA表达的影响

采用原位杂交和ＲＴ－ＰＣＲ方法，观察消瘀片治疗１６周动脉粥样硬化免后对血管壁组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ和ＮＯＳｍＲＮＡ表达的影响。结果显示，粥样硬化组的ＥＴ－１ｍＲＮＡ和ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达较多，而 ｃＮＯＳｍＲＮＡ表达较少。使用消瘀片后，动脉壁组织中的 ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显减少，提示血浆和血管壁组织中的 ＥＴ－１减少是由于 ＥＴ－１ｍＲＮＡ转录水平降低所致。消瘀片对血管壁组织中ｉＮＯＳｍＲＮＡ和ｃＮＯＳｍＲＮＡ表达影响是不同的，它可降低ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达，增加ｃＮＯＳｍＲＮＡ表达。表明消瘀片可通过调节 ＮＯＳ不同亚型基因的表达而消减动脉粥样硬化病变的程度。

脂泰胶囊对实验性动脉粥样硬化家兔内皮素及一氧化氮合酶基因表达的影响

为在基因水平上探讨痰瘀同治方药脂泰胶囊保护血管内皮、抗动脉粥样硬化形成和发展的机理，采用烟酰胺磷酸腺嘌呤二核苷酸—硫锌酰胺脱氢酶组织化学染色和原位杂交法观察了脂泰胶囊对高脂血症家兔主动脉壁一氧化氮合酶活性及其ｍＲＮＡ表达和内皮素ｍＲＮＡ表达的影响，采用阳性积分法处理数据。结果发现，脂泰胶囊组家兔胸主动脉一氧化氮合酶活性（１．３８±０．６３）明显高于高脂组（０．４０±０．２４）（Ｐ＜０．０１）；脂泰胶囊组家兔胸主动脉一氧化氮合酶ｍＲＮＡ表达（１．３８±０．４８）明显高于高脂组（１．００±０．００）（Ｐ＜０．０５）；脂泰胶囊组家兔胸主动脉内皮素ｍＲＮＡ表达（２．４３±０．５３）明显低于高脂组（３．３３±０．８２）（Ｐ＜０．０５）。此外，脂泰胶囊可以阻止斑块增厚，减少斑块内脂质坏死中心的形成。提示脂泰胶囊能明显升高高脂状态下主动脉血管壁的一氧化氮合酶活性及其ｍＲＮＡ表达，降低内皮素ｍＲＮＡ表达。脂泰胶囊抗动脉粥样硬化形成和发展的作用机制之一可能是通过调控一氧化氮合酶ｍＲＮＡ和内皮素ｍＲＮＡ的表达，从而达到维持一氧化氮合酶的正常活性及一氧化氮的正常水平来实现的。

犬急性心肌缺血时循环内皮素和一氧化氮的变化及其相关酶的基因表达

目的：探讨急性心肌缺血犬循环内皮素和一氧化氮的浓度变化以及内皮素转换酶（ＥＣＥ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）基因在缺血心肌的表达和分布情况。方法：结扎麻醉犬冠状动脉左前降支中段，造成实验性急性心肌缺血模型。采用放射免疫法测定血浆内皮素含量，比色法测定血清一氧化氮代谢产物水平，以原位杂交技术检测缺血心肌中ＥＣＥ和ＮＯＳ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）的表达。结果：随着缺血时间的延长，血中内皮素含量显著升高，而一氧化氮代谢产物水平逐渐下降；缺血３小时后，心肌中ＥＣＥｍＲＮＡ呈高表达，而ＮＯＳｍＲＮＡ呈低表达。结论：心肌缺血时循环内皮素和一氧化氮的浓度变化与ＥＣＥｍＲＮＡ、ＮＯＳｍＲＮＡ表达水平一致，提示内皮素与一氧化氮两者的平衡失调可能参与了心肌缺血性损伤的发生和发展过程。

血瘀证兔血清对培养的血管内皮细胞活性因子基因表达的影响

【目的】探索血瘀证形成和发展过程中血管内皮细胞活性因子内皮素和一氧化氮 (NO)改变的分子机理。【方法】用半定量RT -PCR方法 ,观察血瘀证兔模型血清对体外培养的血管内皮细胞内皮素 (ET)和组成型NO合成酶 (constitutivenitricoxidesynthase ,cNOS)基因表达的影响。【结果】血瘀证动物模型血清导致体外培养的内皮细胞中ET - 1mRNA表达升高 (P <0 .0 1) ,cNOSmRNA表达下降 (P <0 .0 1) ,两者呈显著负相关 (r=- 0 .857,P <0 .0 1)。【结论】血管内皮细胞中ET基因高表达及cNOS基因低表达导致的二者平衡失调在血瘀证形成和发展过程中起着重要作用。

消瘀片及其组分对粥样硬化兔血清LDL电泳迁移率和血管壁中ET-1 mRNA及iNOS mRNA表达影响的比较

消瘀片由丹参提取物和山楂提取物组成,为验证其组方的合理性,本文比较消瘀片及其组分对粥样硬化兔血清 LDL电泳迁移速率和血管壁组织中 ET-1 mRNA及 iNOS mRNA表达的影响。结果表明,消瘀片对抑制血管壁中 iNOS mRNA表达作用与其组分丹参提取物和山楂提取物相似,但对减慢血清LDL电泳迁移速率和抑制血管壁中ET-1 mRNA表达的作用明显增强,提示两者合用后对防治动脉粥样硬化可产生明显的协同效应。

先天性心脏病肺组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的改变及临床意义

目的 探讨先天性心脏病肺动脉高压 (PH)病人肺组织一氧化氮合酶 (NOS)、内皮素(ET)的mRNA表达改变及其临床意义。方法 治疗组 2 1例先心病患者 ,平均肺动脉压为 5 8±2 1mmHg ,肺血管阻力 760± 2 0 6dyn .s.cm-5。于开胸后立即取肺组织采用RT PCR技术检测NOS、ET及其相关基因表达的变化。结果 PH组肺组织结构型NOS(cNOS)及诱导型NOS(iNOS)mRNA表达均减少 ,以cNOSmRNA为明显 ;cNOSmRNA ,iNOSmRNA电泳光密度均较对照组为低。肺组织ET 1及ETARmRNA的表达明显较对照组为高 ,而ETBRmRNA的表达则低于对照组。分析表明 ,PH程度越重 ,其cNOSmRNA的表达减少越明显 ,而ET及其受体的mRNA表达则呈现相反的改变。结论 先心病PH患儿肺组织血管活性因子发生明显改变 ,提示此类患儿宜尽早手术纠治 ,以从根本上消除形成PH的条件。

门脉高压症猪脾组织中内皮素受体及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的意义

探讨胆汁性肝硬化门脉高压症猪脾组织中内皮素受体 (ETR)及诱导型一氧化氮合酶 (i NOS) m RNA的表达及其对内脏血流动力学的影响。采用原位杂交方法检测实验组 (n=10 )和对照组 (n=5 )猪脾组织冰冻切片中 ETR(ETAR、 ETBR)及 i NOS m RNA的表达。同时监测猪的门脉血流量 (Qpv)、门静脉压 (Ppv)及平均动脉压 (MAP)。结果 ,实验组 ETAR m RNA表达水平与对照组无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,而 ETBR及 i NOS m RNA表达水平显著高于对照组 (P<0 .0 1) ,其中 ETAR m RNA表达主要位于血管平滑肌细胞中 ;ETBR m RNA主要位于脾窦内皮细胞 ;i NOS m R-NA主要在血管平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞中。 ETAR m RNA的表达与 Qpv、 Ppv无明显相关 (P=0 .11或 P=0 .0 8) ;ETBR与 i NOS m RNA的表达水平分别与 Qpv、Ppv呈正相关 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;而分别与 MAP呈负相关 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。研究表明 :ETBR及 i NOS m

正心泰对急性心肌梗死家兔心肌及血管内皮细胞一氧化氮合酶、内皮素基因表达的影响

目的 :观察正心泰对急性心肌梗死 ( AMI)家兔心肌及血管内皮细胞一氧化氮合酶 ( NOS)和内皮素 ( ET)的影响。方法 :将 4 0只家兔随机分为假手术组、模型组、卡托普利组、正心泰高剂量和低剂量组 5组 ,给药后 1周 ,通过结扎冠状动脉前降支方法 ,造成 AMI模型。制模后 3h处死动物 ,取心肌组织制成切片 ,应用原位杂交及图像分析仪方法进行内皮型一氧化氮合酶 ( e NOS) m RNA和 ET 1m RNA表达的分析。结果 :正心泰高、低剂量组及卡托普利组的 e NOS m RNA表达均较模型组提高 ,ET 1m RNA表达则均有所下降 ,相比较均有显著性差异 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。结论 :正心泰与卡托普利一样通过调控 NOS和 ET基因表达来达到对

+G_Z重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的 探讨＋ ＧＺ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍ ＲＮＡ 表达变化。 方法 ２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ 大鼠随机分成对照组、＋ ＧＺ重复暴露后３０ ｍ ｉｎ、６ ｈ 和２４ ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ 值为＋ １ ＧＺ， 实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋ １０ ＧＺ／３ ｍ ｉｎ（两次中间间隔３０ ｍ ｉｎ）作用。分别于暴露后３０ ｍ ｉｎ、６ ｈ 和２４ ｈ 处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测大鼠心肌组织ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 表达水平。 结果 ＋ ＧＺ暴露后３０ ｍ ｉｎ 和６ ｈ 大鼠心肌组织ＥＴ－１ ｍ ＲＮＡ 明显升高，ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 明显降低，但２４ ｈ 时均恢复正常。 结论 ＋ ＧＺ暴露可使大鼠心肌组织内ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 表达发生改变，其在心肌损伤中可能起一定的作用。

+G_Z重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的探讨＋ＧＺ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达变化。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ，实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测大鼠心肌组织ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ暴露后３０ｍｉｎ和６ｈ大鼠心肌组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ明显升高，ｅＮＯＳｍＲＮＡ明显降低，但２４ｈ时均恢复正常。结论＋ＧＺ暴露可使大鼠心肌组织内ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达发生改变，其在心肌损伤中可能起一定的作用，但这种变化是可逆的。

^(60)Co-γ射线照射对大鼠肺一氧化氮合酶和内皮素系统基因表达的影响

探讨一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）和内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）及ＥＴ转换酶（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ，ＥＣＥ）等在受照射肺中的基因表达变化，揭示其在肺纤维化发生中的参与作用。方法用６０Ｃｏ对大鼠肺进行３０Ｇｙ照射，照后４，８，２４天提取总ＲＮＡ，分别做ＲＴ－ＰＣＲ；对照射后１，３，５个月肺组织进行ＥＴ肽的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＮＯＳ－ｍＲＮＡ原位杂交。结果照射后肺ＮＯＳｍＲＮＡ转录减弱，ＥＴｍＲＮＡ增强，ＥＣＥｍＲＮＡ在第８和２４天增强，ＥＴＢ－ＲｍＲＮＡ在第２４天转为阴性。照射后１，３，５月肺组织ＥＴ肽合成增加。照射后５个月ＮＯＳｍＲＮＡ原位杂交呈阴性。结论ＥＴ和ＮＯ之间平衡失调可能与肺纤维化发生有关。